Висока експресія β-маннанази сімейства глікозидгідролаз з Aspergillus niger у Pichia pastoris для отримання частково гідролізованої камеді пажитника

Додати до Менділі

Основні моменти

Ген β-маннанази (AnMan26) був оптимізований та експресований в Pichia pastoris.

Висока активність β-маннанази 22100 U мл −1 була отримана завдяки ферментації з високою щільністю клітин.

N-глікозилювання покращило питому активність AnMan26.

AnMan26 ефективно гідролізує галактоманнан у камеді пажитника (82,2%).

Анотація

Ген β-маннанази, оптимізований для кодону з Aspergillus niger (AnMan26), гетерологічно експресувався у Pichia pastoris. Пік ферментної активності 22100 U мл -1 досягався у 5-л ферментері. AnMan26 очищали до однорідності 1,6-кратним очищенням за допомогою гель-фільтрації Sephacryl S100 HR. Він виявляв оптимальну активність при рН 5,0 та 45 ° C. AnMan26 був стабільним у діапазоні рН 2,5–7,0 і демонстрував хорошу термостабільність до 40 ° C. Більше того, він виявив найвищу питому активність 2869,0 U мг −1 по відношенню до камеді рожкового дерева і ефективно розкладав різні маннани до манно-олігосахаридів та гідролізованої маннотетраози та маннопентаози. Крім того, гідролізована камедь пажитника AnMan26 отримує частково гідролізовану камедь пажитника (PHFG) із середньою вагою молекулярної маси 1,8 × 10 3 Да. Коефіцієнт гідролізу галактоманнану в камеді пажитника склав 82,2%. Таким чином, у цьому дослідженні була отримана ефективна β-маннаназа для виробництва ПГФГ.

Графічний реферат

Завантажити: Завантажити зображення з високою роздільною здатністю (172 КБ)
Завантажити: Завантажте повнорозмірне зображення

Попередній стаття у випуску Далі стаття у випуску