В останні роки велика увага в медичній практиці приділяється ентеросорбентам фітогенезу, до яких належать неперетравлювані в тонкому кишечнику некрахмалисті полісахариди, такі як целюлоза, геміцелюлози, пектин, камедь, слиз і не вуглеводний лігнін [1]. Рослинні сорбенти стійкі до дії ферментів шлунку і тонкої кишки і піддаються бактеріальному бродінню в товстій кишці. Можливості волокон пов'язані з наявністю в їх молекулі гідроксильної та карбоксильної груп, що зумовлює їхні водоутримуючі, іонообмінні та адсорбційні властивості. Серед харчових волокон є лікарські засоби (наприклад, поліфепан) та біологічно активні добавки, такі як зостерин, детоксал та полісорбіт.

лігніну

Ентеросорбція заснована на відомому у фізіології травлення явищі підтримання сталості середовища кишечника, суть якого полягає в тому, що незалежно від характеру споживаної їжі куранти залишаються більш-менш постійними. Ця сталість забезпечується всмоктуванням у кров і лімфу та виведенням із просвітом кишечника різних компонентів (води, електролітів, вуглеводів, жирів тощо). У рециркуляції компонентів крові та хімусу беруть участь залози шлунково-кишкового тракту, печінки, жовчних проток і підшлункової залози.

МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ

В якості ентеросорбентного матеріалу в даній роботі було використано активоване вугілля та гідролітичний лігнін, отриманий на основі відходів санітарних деревних рубок саксаулу. При приготуванні ентеросорбентів вихідні компоненти піддавали механічному змішуванню у співвідношенні активоване вугілля: лігнін (100: 0, 60:40, 50:50, 0: 100) відповідно.

Метою роботи було вивчення ефективності сорбції клітин Salmonella typhimorium, Proteus vulgaris та Candida sp, отриманих за допомогою ентеросорбентних матеріалів. Бактерії вирощували на м’ясному настоєному бульйоні, дріжджі в рідкому середовищі Сабуро при рН 7,0. Суспензію для іммобілізації готували в ізотонічному розчині з щільністю клітин 10 7 кл/мл. Сорбцію клітин вивчали в розчині хлориду натрію в статистичних умовах. Зразки відбирали через 24 години контакту сорбентів з мікроорганізмами і після витримки протягом 1 години визначали кількість клітин. Кількість клітин у рідині визначали шляхом висіву культивувань на середовище Ендо або Сабуро. Ефективність сорбції оцінюють на різниці концентрацій клітин у живильному середовищі до і після процесу сорбції. Співвідношення маси сорбентів становило 1-3 грами на 100 мл суспензії. Сорбенти попередньо піддавали стерилізації шляхом автоклавування тривалістю 30 хв під тиском 1,5 атм. У процесі десорбції сорбенти з клітинами, адсорбованими на них, переносять у 100 мл ізотонічного розчину, перемішують протягом 5 хвилин і висівають на середовище Ендо для визначення титру клітин [2-4].

Морфофізіологічну характеристику зразків для візуальної оцінки кількості прикріплених клітин мікроорганізмів до поверхні сорбентів досліджували на мікроскопі Leika MRS № 1300.

РЕЗУЛЬТАТИ ТА ВИСНОВКИ

Ентеробактерії та дріжджоподібні гриби сорту Candida є частиною мікробної асоціації кишечника людини. Однак при імунодісфункції організму або зміні нормального мікробного ценозу може призвести до розвитку захворювання. Можна застосовувати сорбенти для корекції мікрофлори кишечника людини.

Про інтенсивність іммобілізації клітин Salmonella typhimorium, Proteus vulgaris та Candida sp судять за кількістю приєднаних клітин у відсотках від початкової кількості клітин у реакційному середовищі (таблиця 1).

З даних, представлених у таблиці, видно, що всі досліджені сорбенти-носії ефективно сорбують бактеріальні клітини, але на сорбентах типу 50-50 та 60-40 сорбція відбувається інтенсивніше для клітин Salmonella typhimorium, ніж на сорбентах типу 0- 100 та 100-0. Висока ефективність сорбції клітин Proteus vulgaris і Candida sp відзначена для сорбенту 60-40 і склала 61,1 та 32,8 відповідно. Найменша кількість сорбційних клітин характерна для дріжджових клітин порівняно з бактеріями.

Ефективність сорбції клітин мікроорганізмів безпосередньо залежить від часу вирощування та природи сорбенту. Відмінності в ступені сорбції клітин підтверджені даними світлової мікроскопії в процесі культивування
(рис. 1-3).

Активне прикріплення клітин до сорбентів спостерігалося через 6 годин контакту. Найбільша кількість сорбційних клітин на сорбентах-носіях типу 60-40 і 50-50 зберігається з 10 годин вирощування до 24 годин.

0 годин 24 години

Salmonella typhimorium (сорбент 60-40)

Рисунок 1. Іммобілізація культури Salmonella typhimorium на поверхні ентеросорбентів.

0 годин 24 години

Proteus vulgaris (сорбент 60-40)

Рисунок 2. Іммобілізація культури Proteus vulgaris на поверхні ентеросорбентів

0 годин 24 години

Candida sp. (сорбент 60-40)

Рисунок 3. Іммобілізація культури Candida sp на поверхні ентеросорбентів

Таблиця 1. Ефективність іммобілізації клітин Escherichia coli, Salmonella typhimorium, Proteus vulgaris та Candida sp. на лігніні, що містить сорбенти