Кілька місць глікації в білках плазми крові як інтегрований біомаркер цукрового діабету 2 типу

Раннє та поглиблене глікування в плазмі крові людини. Основні шляхи утворення кінцевого продукту гликерування (AGE): автосаксид моносахаридів (шлях Вольфа), автоокислення альдимінів (шлях Намікі), поліольний шлях, автоокислення продуктів Амадорі (ходж-шлях) та неокислювальний шлях.

сайти

Огляд експериментального робочого процесу.

Тандемні мас-спектри, отримані при m/z 673,66 (A) та 463,56 (B), що відповідає іонам [M + 3H] 3+ пептидів, EQLKAmAVMoxDDFAAFVEK та FKAmDLGEENFK (обидва сироваткові альбуміни людини). Спектри були отримані за допомогою мас-спектрометра LTQ-Orbitrap Velos Pro, що працював у режимі позитивних іонів, як частина цільового робочого процесу RP-HPLC-Orbitrap-LIT-MS/MS DDA. Вставки представляють екстраговані іонні хроматограми (m/z ± 0,02), отримані для m/z 673,66 (A) та 463,56 (B). KAm та MOx позначають глікований лізил та окислені залишки метіонілу відповідно.

Тандемні мас-спектри, отримані при m/z 673,66 (A) та 463,56 (B), що відповідає іонам [M + 3H] 3+ пептидів, EQLKAmAVMoxDDFAAFVEK та FKAmDLGEENFK (обидва сироваткові альбуміни людини). Спектри були отримані за допомогою мас-спектрометра LTQ-Orbitrap Velos Pro, що працював у режимі позитивних іонів, як частина цільового робочого процесу RP-HPLC-Orbitrap-LIT-MS/MS DDA. Вставки представляють екстраговані іонні хроматограми (m/z ± 0,02), отримані для m/z 673,66 (A) та 463,56 (B). KAm та MOx позначають глікований лізил та окислені залишки метіонілу відповідно.

Результати аналізу основних компонентів (PCA), проведеного для пацієнтів з Т2DM (розкриті алмази) та нормоглікемічних (замкнені кола) груп. Аналіз був заснований на всіх 42 диференційовано глікованих пептидах і показав чітке розділення між групами.

Значення змінної відповіді лінійного дискримінантного аналізу (LDA), побудовані для T2DM (відкриті алмази) та контрольних (замкнених кіл) осіб, розраховані за допомогою вибраних наборів прогнозуючих змінних (як наведено в Таблиці 3). (A) Оцінюється шляхом одноразової перехресної перевірки; (B) оцінюється за оригінальними зразками, а LDA навчається на створених зразках.

Пікові площі сигналів за 38,7 хв (А) та 48,9 хв (В), інтегровані в хроматограми екстрагованих іонів (XIC) m/z 698,56 ± 0,02 (A) та 691,09 ± 0,02 (B), що відповідає [ M + 4H] 4+ іонів глікованих пептидів LVNEVTEFAKAmTCCAMVADESAENCCAMDK (сироватковий альбумін людини, A) та QNCCAMELFEQLGEYKAmFQNALLVR (альбумін сироватки людини, B) відповідно. Дані були отримані в експериментах RP-HPLC-QqTOF-MS, проведених з використанням аффинной хроматографії борної кислоти (BAC), збагаченої триптичними дайджестами, отриманими з окремих T2DM та контрольних зразків плазми. Статистичну значимість оцінювали за U-тестом Манна-Уітні, а значення р нижче 0,05 вважали значущими. KAm та CCAM позначають гліковані залишки лізилу та карбамідометильованого цистеїнілу відповідно.