Дуже довгий ланцюг C24: 1 Церамід підвищений в позаклітинних везикулах сироватки зі старінням і може викликати старіння в похідних від кісток мезенхімальних стовбурових клітинах

Виділення та характеристика старих та молодих електромобілів. (А) Пептидний спектр збігається для одного зразка EV сироватки людини, виділеного за допомогою хроматографії виключення за розміром (SEC) або 8% поліетиленгліколю (PEG). Перші дві фракції EV (F1/F2) з ізоляції SEC демонструють більшу кількість відомих маркерів EV порівняно з ізоляцією PEG. (B) Zetaview кількісне визначення розміру частинок EV у молодих (25–40 років) та вікових (75–90 років) кавказьких донорів. (C) Керамідний ліпідомічний профіль ВЕ, виділених із сироватки крові молодих та літніх жінок (n = 5 для вікової групи, стовпчики помилок = SD). Зверніть увагу, що електромобілі старших жінок сильно збагачені керамідом С24: 1. (D) Ділянки коробки та вуса для рангових трансформованих значень керамідів С24: 1 ЕВ від резус-мавп. ЕВ із сироватки крові вікових мавп (n = 8) демонструють значне збільшення вмісту кераміду C24: 1 порівняно із сироватковими ЕВ, виділеними у молодших мавп (n = 8). Значення перетворювались на ранги, і однофакторну ANOVA проводили з віком як фактором.

Мічені PKH67 сироваткові ЕВ ендоцитуються мезенхімальними стовбуровими клітинами кісткового мозку людини. EV, позначені PKH67 (зелений, лівий та правий стовпці), ендоцитуються клітинами, візуалізованими за допомогою конфокальної мікроскопії. Клітини показані при великому (A, 40 ×) та нижчому (B, 20 ×) збільшенні. Зображення клітин, оброблених неміченими (без барвника PKH67), показані як контролі (CON). Синє фарбування являє собою ядерне фарбування DAPI. Шкала шкал = 20 мкм.

Мічені PKH67 сироваткові ЕВ ендоцитуються мезенхімальними стовбуровими клітинами кісткового мозку людини. EV, позначені PKH67 (зелений, лівий та правий стовпці), ендоцитуються клітинами, візуалізованими за допомогою конфокальної мікроскопії. Клітини показані при великому (A, 40 ×) та нижчому (B, 20 ×) збільшенні. Зображення клітин, оброблених неміченими (без барвника PKH67), показані як контролі (CON). Синє фарбування являє собою ядерне фарбування DAPI. Шкала шкал = 20 мкм.

Електромобілі, завантажені керамідом C24: 1, індукують клітинне старіння. (A) Ліпідомічні профілі лише деіонізованої води (DIW), DIW + EVs, DIW + C24: 1 керамід, або DIW + EV, завантажені керамідом C24: 1. Стовпчики представляють єдиний зразок. (B) Фарбування на β-гал вказувало на посилене старіння у BMSC, оброблених EV з завантаженням кераміду C24: 1. Шкала шкал = 40 мкм.

Експресія нейтральної сфінгомієлінази (nSMase2) значно збільшується з віком у печінці миші. Результати qPCR, що показують значне збільшення експресії nSMase2 з віком у печінці миші щодо експресії CerS2 (n = 4 для вікової групи, стовпчики помилок являють собою SEM). nSMase2 виробляє церамід C24: 1 гідролізом сфінгомієліну.

Анотація

довгий

Виділення та характеристика старих та молодих електромобілів. (А) Пептидний спектр збігається для одного зразка EV сироватки людини, виділеного за допомогою хроматографії виключення за розміром (SEC) або 8% поліетиленгліколю (PEG). Перші дві фракції EV (F1/F2) з ізоляції SEC демонструють більшу кількість відомих маркерів EV порівняно з ізоляцією PEG. (B) Zetaview кількісне визначення розміру частинок EV у молодих (25–40 років) та вікових (75–90 років) кавказьких донорів. (C) Керамідний ліпідомічний профіль ВЕ, виділених із сироватки крові молодих та літніх жінок (n = 5 для вікової групи, стовпчики помилок = SD). Зверніть увагу, що електромобілі старших жінок сильно збагачені керамідом С24: 1. (D) Ділянки коробки та вуса для рангових трансформованих значень керамідів С24: 1 ЕВ від резус-мавп. ЕВ із сироватки крові вікових мавп (n = 8) демонструють значне збільшення вмісту кераміду C24: 1 порівняно із сироватковими ЕВ, виділеними у молодших мавп (n = 8). Значення перетворювались на ранги, і однофакторну ANOVA проводили з віком як фактором.

Мічені PKH67 сироваткові ЕВ ендоцитуються мезенхімальними стовбуровими клітинами кісткового мозку людини. EV, позначені PKH67 (зелений, лівий та правий стовпці), ендоцитуються клітинами, візуалізованими за допомогою конфокальної мікроскопії. Клітини показані при великому (A, 40 ×) та нижчому (B, 20 ×) збільшенні. Зображення клітин, оброблених неміченими (без барвника PKH67), показані як контролі (CON). Синє фарбування являє собою ядерне фарбування DAPI. Шкала шкал = 20 мкм.

Мічені PKH67 сироваткові ЕВ ендоцитуються мезенхімальними стовбуровими клітинами кісткового мозку людини. EV, позначені PKH67 (зелений, лівий та правий стовпці), ендоцитуються клітинами, візуалізованими за допомогою конфокальної мікроскопії. Клітини показані при великому (A, 40 ×) та нижчому (B, 20 ×) збільшенні. Зображення клітин, оброблених неміченими (без барвника PKH67), показані як контролі (CON). Синє фарбування являє собою ядерне фарбування DAPI. Шкала шкал = 20 мкм.

Електромобілі, завантажені керамідом C24: 1, індукують клітинне старіння. (A) Ліпідомічні профілі лише деіонізованої води (DIW), DIW + EVs, DIW + C24: 1 керамід, або DIW + EV, завантажені керамідом C24: 1. Стовпчики представляють єдиний зразок. (B) Фарбування на β-гал вказувало на посилену старість у BMSC, оброблених EV з навантаженим керамідом C24: 1. Шкала шкал = 40 мкм.

Експресія нейтральної сфінгомієлінази (nSMase2) значно збільшується з віком у печінці миші. Результати qPCR, що показують значне збільшення експресії nSMase2 з віком у печінці миші щодо експресії CerS2 (n = 4 для вікової групи, стовпчики помилок являють собою SEM). nSMase2 виробляє церамід C24: 1 гідролізом сфінгомієліну.