Аналіз сечі

Тревор Дж. Вітбрід

, BSc, BVSc, MRCVS, DECVP, Abbey Veterinary Services

Аналіз сечі - це важливе лабораторне дослідження, яке можна легко провести у ветеринарній практиці і вважається частиною мінімальної бази даних. Це корисно документувати різні типи захворювань сечовивідних шляхів і може надати інформацію про інші системні захворювання, такі як печінкова недостатність та гемоліз. Сеча може бути зібрана за допомогою цистоцентезу, катетеризації уретри або порожнечі. Сечу слід оцінювати протягом 30 хв, але якщо це неможливо, її можна зберігати в холодильнику до 24 годин або здавати у зовнішню діагностичну лабораторію; однак це може призвести до осадження кристалів. Холодильне обладнання не змінює рН сечі та питому вагу. Якщо необхідна цитологічна оцінка та передбачається затримка з підготовкою предметних стекол, тоді слід додати консервант. Кілька крапель 10% формаліну (точна концентрація не потрібна) краще борної кислоти. Однак звичайні плями Романовського не підходять для формаліну; при надходженні до зовнішньої лабораторії слід повідомити, що доданий формалін.

Зовнішній вигляд сечі

Колір:

Нормальна сеча при візуальному огляді зазвичай прозора і жовта або жовта. Інтенсивність забарвлення частково залежить від об’єму зібраної сечі та концентрації виробленої сечі; тому його слід інтерпретувати в контексті питомої ваги сечі. Значне захворювання може існувати, коли колір сечі в нормі. Аномальний колір сечі може бути спричинений наявністю ендогенних або екзогенних пігментів, але він не надає конкретної інформації. Інтерпретація напівкількісних реагентних смужок, які є колориметричними тестами, вимагає знання кольору сечі, оскільки знебарвлена сеча може призвести до хибнопозитивних результатів. Сеча коней може через деякий час придбати коричневий колір.

Чіткість:

Сеча зазвичай прозора, але може стати менш прозорою при пігментурії, кристалурії, гематурії, піурії, ліпідурії або при наявності інших сполук, таких як слиз. Залежно від причини, підвищена каламутність може зникнути при центрифугуванні зразка.

Звичайна сеча має легкий запах аміаку; однак запах залежить від концентрації сечі. Деякі види, такі як коти та кози, мають різкий запах сечі через склад сечі. Бактеріальна інфекція може спричинити сильний запах через піурію; може виникнути сильний аміачний запах, якщо бактерії виробляють уреазу.

Сечохімія

Для точного вимірювання питомої ваги сечі та хімічного аналізу сеча повинна бути кімнатної температури. Ці випробування зазвичай проводять перед центрифугуванням; однак, якщо сеча знебарвлена або помутніла, може бути корисно провести ці тести на супернатанті (див. Осад сечі).

Питома вага:

Питома вага визначається як відношення маси об’єму рідини до маси рівного об’єму дистильованої води; отже, це залежить від кількості, розміру та ваги частинок у рідині. Він відрізняється від осмоляльності, яка залежить лише від кількості частинок у рідині; вимірювання осмоляльності вимагає спеціальних приладів.

Питома вага сечі (SG) визначається за допомогою рефрактометра, призначеного для ветеринарних зразків, який включає шкалу, відкалібровану спеціально для котячої сечі. SG для інших видів, крім котів, слід визначати, використовуючи шкалу для собак. У здорових тварин СГ дуже мінливий, залежно від рідинного та електролітного балансу організму. Зазвичай це не менше 1,015. Інтерпретація SG, отже, залежить від клінічного стану та результатів хімічної сироватки. (Див. Також Вступ до сечовидільної системи.) У тварини, яка зневоднена або має інші причини преренальної азотемії, буде гіперстенурична сеча з SG> 1,025–1,040 (залежно від виду). Розведена сеча у зневодненої або азотемічної тварини є ненормальною і може бути спричинена нирковою недостатністю, гіпо- або гіперадренокортицизмом, гіперкальціємією, цукровим діабетом, гіпертиреозом та діуретичною терапією. У випадках нецукрового діабету, значення

Напівкількісні, колориметричні смужки реагентів:

Смужки реагентів, такі як Multistix ® або Chemstrip ®, можуть використовуватися для одночасного проведення кількох напівкількісних хімічних оцінок. Їх регулярно використовують для визначення рН сечі, білка, глюкози, кетонів, білірубіну/уробіліногену та прихованої крові. Деякі смужки реагентів включають пробірки для визначення лейкоцитарної естерази (для виявлення лейкоцитів), нітриту (для виявлення бактерій) та SG; вони не є дійсними для тварин і не повинні використовуватися. На смужки реагентів негативно впливає волога та обмежений термін зберігання. Пляшки слід щільно закупорювати, а невикористані смужки викидати після закінчення терміну придатності.

РН сечі:

РН сечі типово кислий у собак і котів і лужний у коней і жуйних тварин, але варіюється залежно від дієти, ліків або наявності хвороби. Колориметричні тестові прокладки для реагентної смужки для визначення рН мають точну точність

0,5 одиниці рН. Наприклад, показання 6,5 означає, що фактичний рН, ймовірно, становить від 6,0 до 7,0. Портативні рН-метри є більш точними, ніж колориметричні пробірки для рН. Бактеріальна інфекція сечовивідних шляхів з мікробом, що продукує уреазу, призведе до лужності. РН сечі впливатиме на кристалурію, оскільки деякі кристали, такі як струвіт, утворюються в лужній сечі, тоді як інші кристали, такі як цистин, утворюються в кислій сечі.

Білок:

Глюкоза:

Глюкоза визначається ферментативною реакцією глюкозооксидази, яка є специфічною для глюкози. Глюкозурія зазвичай відсутня, оскільки нирковий поріг глюкози становить> 180 мг/дл у більшості видів та> 240 мг/дл у котів. При еуглікемії кількість відфільтрованої глюкози менше ниркового порогу, і вся відфільтрована глюкоза реабсорбується в проксимальних ниркових канальцях. Глюкозурія може бути наслідком гіперглікемії (внаслідок цукрового діабету, надмірних ендогенних або екзогенних глюкокортикоїдів, гепатокутанного синдрому або стресу) або проксимального ниркового канальцевого дефекту (наприклад, первинна ниркова глюкозурія або синдром Фанконі). Якщо присутня глюкозурія, слід визначити концентрацію глюкози в крові. Помилково негативні результати можуть мати місце при високій концентрації аскорбінової кислоти (вітаміну С) у сечі або формальдегіду (метаболіту сечового антисептика, метенаміну, який може використовуватися для профілактики бактеріальних інфекцій сечовивідних шляхів). Помилково позитивні результати можуть мати місце, якщо зразок забруднений перекисом водню, хлором або гіпохлоритом (відбілювачем).

Кетони:

Кетони виробляються в результаті метаболізму жирних кислот і включають ацетооцтову кислоту, ацетон та β-гідроксибутират. Кетонова пробна площадка виявляє ацетон і ацетооцтову кислоту, але не β-гідроксибутират (який можна виміряти в крові та сечі за допомогою приладу для догляду або біохімічного аналізатора). Випробувальна площадка містить нітропрусид, який реагує з ацетооцтовою кислотою та ацетоном, викликаючи фіолетову зміну кольору; він більш чутливий до ацетооцтової кислоти, ніж ацетон. Кетонурія асоціюється з первинним кетозом (жуйних), кетозом, вторинним при цукровому діабеті (дрібні тварини), споживанням дієти з низьким вмістом вуглеводів (особливо у котів), а іноді і з тривалим голодуванням або голодуванням. Помилково позитивна реакція може виникнути при наявності в сечі редукуючих речовин.

Білірубін/уробіліноген:

При руйнуванні гемоглобіну частина гему перетворюється на білірубін, який кон’югується в печінці і виводиться з жовчю. Частина кон’югованого білірубіну фільтрується клубочком і виводиться з сечею. У собак, але не у котів, нирка може метаболізувати гемоглобін до білірубіну та виділяти його. Собаки-самці мають вищу секреторну здатність, ніж самки. Накладки для реактиву щупа використовують солі діазонію, щоб створити зміну кольору, і вони більш чутливі до кон'югованого білірубіну, ніж некон'югований білірубін. Білірубінурія виникає, коли кон'югований білірубін перевищує нирковий поріг, як при захворюваннях печінки або гемолізі. У собак з концентрованою сечею невелика кількість білірубіну може бути нормою. Пігментурія та фенотіазин можуть призвести до хибнопозитивної реакції; помилково негативні реакції можуть виникати при великій кількості сечової аскорбінової кислоти (вітамін С).

Уробіліноген, що утворюється з білірубіну мікрофлорою кишечника, всмоктується в портальний кровообіг і виводиться нирками. Невелика кількість сечового уробіліногену є нормою. Підвищений уробіліноген сечі виникає при гіпербілірубінемії; негативний тест може спостерігатися при непрохідності жовчовивідних шляхів. Однак тест недостатньо конкретний, щоб бути клінічно корисним.

Окультна кров:

Тест на приховану кров використовує метод «псевдопероксидази» для виявлення інтактних еритроцитів, гемоглобіну та міоглобіну. Позитивна реакція може бути наслідком крововиливу (гематурія), внутрішньосудинного гемолізу (гемоглобінурія) або міоглобінурії. Два останні процеси можна розрізнити при дослідженні плазми: плазма буде виглядати рожевою до червоної після внутрішньосудинного гемолізу, тоді як міоглобін швидко очищається від плазми, що призводить до прозорості плазми. Як і у випадку з іншими колориметричними пробірками, знебарвлена сеча може дати хибнопозитивні результати. Позитивний результат слід інтерпретувати при мікроскопічному дослідженні осаду сечі.

Осад сечі

Мікроскопічне дослідження осаду сечі має бути частиною звичайного аналізу сечі. Для центрифугування 3–5 мл сечі переносять у конічну пробірку для центрифуги. Сечу центрифугують при 1000–1 500 об/хв протягом

3–5 хв. Надосадову рідину зливають, залишаючи

0,5 мл сечі та осаду на кінчику конічної трубки. Осад ресуспендують, кілька разів постукуючи кінчиком конічної трубки об стіл. Кілька крапель осаду переносять на предметне скло і накладають покривне покриття. Для рутинних зразків рекомендується досліджувати незабарвлену сечу. Мікроскопічне дослідження проводиться зі збільшенням 100 × (для кристалів, зліпків та клітин) та 400 × (для клітин та бактерій). Контраст зразка посилюється шляхом закриття діафрагми райдужної оболонки та опускання конденсатора мікроскопа. Такі плями, як Sedistain ® та новий метиленовий синій, можуть бути використані для полегшення ідентифікації клітин, але можуть розріджувати зразок та вводити такі артефакти, як осад плям та кристали. Використання модифікованого плями Райта підвищує чутливість, специфічність та позитивні та негативні прогнозні значення для виявлення бактерій. Для деяких тестів необхідні мазки, висушені на повітрі.

Червоні кров'яні тільця:

У нефарбованому препараті еритроцити малі і округлі, мають легкий помаранчевий відтінок і гладкий вигляд. Нормальна сеча повинна містити

Клітини білої крові:

Білі лейкоцити трохи більші за еритроцити і мають зернисту цитоплазму. Нормальна сеча повинна містити

Епітеліальні клітини:

Перехідні епітеліальні клітини, загальний забруднювач сечі, що походить із сечового міхура та проксимальної уретри, нагадують лейкоцити, але більші. Вони мають більшу кількість зернистої цитоплазми і кругле центрально розташоване ядро. У порожнечій пробі сечі можуть бути помітні клітини плоского епітелію. Вони великі, мають овальну до кубоподібну форму і можуть містити ядро або не містити його. Іноді у тварини з перехідно-клітинною карциномою можуть спостерігатися неопластичні перехідні клітини. У тварин з плоскоклітинним раком можуть спостерігатися неопластичні плоскоклітини.

Циліндрурія (зліпки):

Інфекційні організми:

Наявність бактерій у сечі, зібраних цистоцентезом, свідчить про інфекцію. Невелика кількість бактерій із нижніх відділів сечостатевих шляхів може забруднювати порожнечі зразки або зразки, зібрані шляхом катетеризації, і не вказувати на інфекцію. Бактеріальні палички найлегше визначити в осаді сечі. Частинки сміття можуть прийняти за бактерії. Підозри на бактерії можна підтвердити фарбуванням осаду сечі плямою Грама; однак аеробні культури найкраще підтверджують бактеріальну інфекцію сечовивідних шляхів. Рідко в осаді сечі можна спостерігати дріжджові та грибкові гіфи та паразитичні яйцеклітини. Їх наявність не завжди пов’язана з клінічним захворюванням. Паразитичні яйцеклітини, що спостерігаються, включають яєчка Стефанур зубчастий, Capillaria plica, C felis, і Dioctophyma renale. Крім того, мікрофілярії Dirofilaria immitis може спостерігатися в осаді сечі.

Кристали:

Багато відкладень сечі містять кристали. Тип присутнього кристала залежить від рН сечі, концентрації кристалогенних матеріалів, температури сечі та тривалості часу між забором сечі та дослідженням. Кристалурія не є синонімом сечокам'яної хвороби і не обов'язково є патологічною. Крім того, уроліти можуть утворюватися без спостерігається кристалурії. Багато зразків сечі досліджують при кімнатній температурі, що може змінити кількість присутніх кристалів, і результат може не відображати ситуацію in vivo.

Кристали струвіту зазвичай можна побачити в сечі собак та котів. Струвітна кристалурія у собак не є проблемою, якщо немає паралельної бактеріальної інфекції сечовивідних шляхів з мікробом, що продукує уреазу. Без інфекції кристали струвіту у собак не пов'язані з утворенням струвіту уроліту. Однак деякі тварини (наприклад, коти) утворюють струвітові уроліти без бактеріальної інфекції сечовивідних шляхів. У цих тварин струвітурна кристалурія може бути патологічною. Кристали струвіту зазвичай виглядають як «кришки гробу» або «призми»; однак вони можуть бути аморфними.

Кристалурія оксалату кальцію зустрічається рідше у собак і котів. Якщо стійкий, це може свідчити про підвищений ризик утворення оксалату кальцію уроліту, який збільшується в деяких країнах протягом останніх кількох років. (Див. Також Сечокам’яна хвороба у великих тварин та Див. Сечокам’яна хвороба у дрібних тварин.) Однак оксалат кальцію та кристалурія карбонату кальцію поширені у здорових коней та великої рогатої худоби. Кристали дигідрату оксалату кальцію виглядають у вигляді квадратів із "Х" посередині або "у формі конверта". Кристали моногідрату оксалату кальцію мають форму «німого дзвоника». Незвична форма кристалів оксалату кальцію зазвичай спостерігається у зв'язку з токсичністю етиленгліколю (див. Токсичність етиленгліколю). Ці кристали містяться в нейтральній до кислої сечі. Вони невеликі, плоскі, безбарвні і за формою нагадують «стовпи для парканів».

Кристали уратної кислоти амонію припускають захворювання печінки (наприклад, портосистемний шунт). Ці кристали трапляються в кислій сечі і являють собою жовто-коричневі сфери з неправильними, колючими виступами; однак вони також можуть бути аморфними. Деякі види, такі як птахи та рептилії, а також певні породи собак, зокрема далматини, можуть зазвичай мати уратну кристалурію амонійної кислоти.

Кристали цистину є шестигранними і мають різний розмір. Вони помітні в кислій сечі. Наявність кристалів цистину являє собою проксимальний канальцевий дефект при реабсорбції амінокислот. Цистинурія зареєстрована у багатьох порід собак і рідко у котів. Такси, ньюфаундленди, англійські бульдоги та шотландські тер'єри мають високу частоту цистино-сечокам'яної хвороби.

Кристали білірубіну виникають при білірубінурії; однак вони можуть бути нормальними у невеликій кількості у собак.

Ліпіди:

Краплі жиру зазвичай присутні в сечі собак і котів, і їх можуть прийняти за еритроцити. Вони часто відрізняються за розміром і, як правило, плавають на іншій площині фокусу, ніж решта осаду. Вони не вважаються патологічними.

Сперматозоїди:

Сперматозоїди зазвичай можна спостерігати в сечі, зібраній від репродуктивно інтактних собак-самців.

Рослинний матеріал:

Іноді в зразках сечі, зібраних шляхом порожнечі, можна побачити рослинний матеріал. Якщо вони є, вони вказують на забруднення зразка сечі і не є патологічними.

Тест на антиген пухлини сечового міхура

Тест на антиген пухлини сечового міхура може бути використаний для скринінгу на перехідно-клітинний рак у собак. Результати не є специфічними для перехідно-клітинної карциноми, а непухлинні захворювання (наприклад, інфекції сечовивідних шляхів, гематурія тощо) можуть дати позитивні результати. Однак негативний тест має значення тим, що перехідноклітинна карцинома, швидше за все, не буде присутньою. Цей тест може бути корисним для рутинного обстеження собак, що мають більш високий ризик розвитку перехідно-клітинної карциноми (наприклад, шотландських тер'єрів), які не мають інших ознак або лабораторних результатів захворювання нижніх сечовивідних шляхів. Це тестує на наявність фрагментів базальної мембрани та являє собою кольорову реакцію за допомогою комерційного набору для тестування.