Альтернативне сплайсинг UCP1 шляхом неклітинної автономної дії PEMT - ScienceDirect

Абляція PEMT у всьому тілі призводить до повної втрати білка UCP1.

Хоча ПК, отриманий з PEMT, може брати участь у біосинтезі CL, зміни мітохондріального ПК або CL не пояснюють втрату білка UCP1.

PEMT регулює коричневий жировий UCP1 неавтономно.

Делеція PEMT сприяє використанню альтернативного 3 ′ сплайсингового з’єднання в екзоні 5 UCP1, запобігаючи експресії білка UCP1.

Анотація

Об’єктивна

Фосфатидилетаноламінметилтрансфераза (PEMT) генерує фосфатидилхолін (ПК), найпоширеніший фосфоліпід в мітохондріях і важливий донор ацильної ланцюга для біосинтезу кардіоліпіну (CL). Миші, яким не вистачає PEMT (PEMTKO), не переносять холоду, якщо їх годують дієтою з високим вмістом жиру (HFD) через незрозумілі механізми. Метою цього дослідження було визначити, чи є фосфоліпіди, отримані з ПЕМТ, важливими для функції роз'єднання білка 1 (UCP1) і, отже, для підтримки температури в серцевині.

Методи

Щоб перевірити, чи важливі фосфоліпіди, отримані з PEMT, для функції UCP1, ми дослідили мітохондрії на холодостійкість та мітохондрії коричневого жиру (BAT) від мишей PEMTKO з або без годівлі HFD. Ми доповнили ці дослідження експериментами на мишах, у яких відсутня функціональна ХЛ внаслідок нокауду тафаззину (TAZKD). Ми створили кілька умовних моделей мишей для вивчення ролі ПЕМТ, характерних для тканини, включаючи мишей із специфічним для НДТ нокаутом ПЕМТ (PEMT-BKO).

Результати

Мишам PEMTKO, що годувались чау та HFD, повністю не вистачало білка UCP1 в НДНТ, незважаючи на відсутність різниці в рівнях мРНК, і миші відповідно не переносили холод. Хоча миші PEMTKO, що годувались HFD, демонстрували знижений вміст мітохондріального CL, цього не спостерігалося у мишей PEMTKO, що годувались чау, або мишей TAZKD, що вказує на те, що відсутність UCP1 не пояснюється дефіцитом CL. Дивно, але миші PEMT-BKO демонстрували нормальний рівень білка UCP1. Нокаут PEMT в жировій тканині (PEMT-AKO), печінці (PEMT-LKO) або скелетних м'язах (PEMT-MKO) також не впливав на рівень білка UCP1, що свідчить про те, що відсутність PEMT в інших клітинах, що не експресують UCP1, повідомляє до BAT для придушення UCP1. Натомість ми виявили неперекладений варіант сплайсингу UCP1, який був запущений у перинатальний період у мишей PEMTKO.

Висновки

PEMT необхідний для сплайсингу UCP1, який дає функціональний білок. Цей ефект отримують за допомогою PEMT в неадипоцитах, які передають BAT під час ембріонального розвитку. Подальші дослідження будуть зосереджені на виявленні неавтономного PEMT-залежного механізму сплайсингу UCP1.

Попередній стаття у випуску Далі стаття у випуску