Виявлення сибутраміну в рослинних харчових добавках за допомогою UHPLCHRMS та UHPLCMS-MS

Стаття дослідження - Біомедичні дослідження (2018) Том 29, Випуск 14

Виявлення сибутраміну в рослинних харчових добавках за допомогою UHPLC/HRMS та UHPLC/MS-MS

1 Кафедра фармацевтичних наук, фармацевтичний факультет, медичний університет м. Пловдив, Пловдив, Болгарія

2 Кафедра фармакогнозії та фармацевтичної хімії фармацевтичного факультету Медичного університету м. Пловдив, Пловдив, Болгарія

3 Медичний університет м. Пловдив, Медичний коледж, м. Пловдив, бул. Василя Априлова 15-А, Болгарія

* Автор-кореспондент: Анна Михайлова
Медичний університет м. Пловдив
Медичний коледж, Пловдив
Бул. Василя Априлова 15-А, Болгарія

Дата прийняття: 17 липня 2018 р

Відвідайте для отримання додаткових статей за адресою Біомедичні дослідження

Анотація

Недавні дослідження оголосили, що багато харчові добавки для схуднення містять незадекларований сибутрамін. Ми проаналізували 10 зразків рослинних харчових добавок для схуднення за допомогою ВЕРХ/HRMS та UHPLC/MS-MS. Ми встановили, що два аналізованих зразка містили сибутрамін: відповідно 5 мкг/на капсулу та 20 мкг/на капсулу. Незаконне включення цієї речовини до складу ФС може спричинити серйозні побічні ефекти та довгострокові наслідки для здоров’я. Необхідно посилити нормативні вимоги до ФС для більш повного захисту споживачів. Необхідність обов'язкового контролю якості цієї продукції та інформування громадськості незаперечна.

Ключові слова

Сибутрамін, ВЕРХ, харчові добавки, аналіз, недекларовані речовини, WADA.

Вступ

Фігура 1: Сибутрамін.

Матеріал та методи

Матеріали

Довідковий стандарт: Сибутрамін гідрохлорид моногідрат з чистотою> 98%.

Реагенти: Ацетонітрил для ВЕРХ (Sigma Aldrich), дистильована вода.

Зразки: 10 рослинних харчових добавок для схуднення. Зразки купували в магазинах дієтичних добавок, аптеках та в Інтернеті.

Методи

UHPLC/HRMS та UHPLC/MS-MS.

Приладобудування: “Accela UHPLC” з мас-спектральним детектором HRMS “Q-Exative” з H-ESI-інтерфейсом (“Thermo Fisher Scientific”, Уолтем, штат Массачусетс, США) та колонкою EVO C18 100 × 3 мм, 2,6 мкм; ультразвукова ванна (Branson Wilmington, NC, США); апарат для надчистої води: "Milli-Q", "Milipore" (Бедфорд, Массачусетс, США) та "Elga" (VWR International, Randor, PA, USA).

Підготовка зразка

Вміст однієї капсули (або однієї розмеленої таблетки) вводили в поліпропіленову пробірку об'ємом 15 мл, екстрагували 10 мл 80% ацетонітрилу у воді та обробляли ультразвуком та центрифугуванням. Аликвотну частину екстракту фільтрували через мембранний фільтр 0,45 мкм і фільтрат розбавляли в 100 разів 50% ацетонітрилом/50% води. Отримані екстракти поданих зразків аналізували до 3 год після їх приготування.

Мобільна фаза

Мобільна фаза А: 95% води/5% ацетонітрилу (рН = 4,3; 10 мм формату амонію).

Мобільна фаза B: 95% ацетонітрилу/5% води (рН = 4,3; 10 мм формату амонію).

Градієнт: 50% рухлива фаза A/50% рухлива фаза B.

Швидкість: 600 мкл/хв.

Результати і обговорення

Згідно з останніми дослідженнями, більшість споживачів вважають ФС безпечними продуктами, навіть безпечнішими за звичайні ліки. Клієнти не очікують побічних ефектів від використання ФС та багатьох корисних ефектів, таких як: схуднення або контроль ваги, підвищення імунітету та інші. Більшість клієнтів приймають FS як фармацевтичну продукцію високої якості. Більшість споживачів також довіряють ярлику FS та “Претензіям до здоров’я” цих продуктів.

Насправді аналітичний контроль для ФС не є обов'язковим. Більшість дослідників та спеціалістів у галузі охорони здоров'я підтримують те, що законодавство про ФС є ліберальним та недостатньо суворим. Не можна заперечувати, що для остаточного захисту споживачів контроль якості повинен застосовуватися на всіх етапах переробки ФС - від сировини до готового продукту [19].

Результати наших аналізів показали, що два із вивчених десяти ФС містили незадекларований інгредієнт сибутрамін-зразок No 5 та зразок № 8.

Малюнок 2 представлена екстрагована хроматограма 1 мкл екстракту зразка № 5 при діапазоні сканування мас-спектрометричного детектора від 279,68 до 280,68 м/з (вгорі) та мас-спектрі піку з часом утримування 1,48 хв (внизу).

Малюнок 2: Хроматограма референтного сибутраміну та зразок No 5.

Малюнок 3 представляє дані для зразка № 5 як порівняння між сумарною іонною хроматографією в діапазоні сканування 200-300 м/з (вище), витягнутою хроматограмою аналіту (друга лінія), передачею електронних сигналів 280> 125 м/з та 280> 139 м/з, характерні для аналіту (лінія третя і четверта) та ESI-мас-спектр (нижче), відповідно - ліворуч для референтного розчину (стандарт) та праворуч - для аналізованого зразка (зразок No 5 ).

Малюнок 3: Хроматограма стандартного сибутраміну (лівий бік) та аналізований зразок No 5 (правий бік).

Час утримування та площі відповідних піків позначені на піках аналіту (сибутрамін з моноізотопною масою 279,175 Да).

Результати аналізу дозволяють зробити висновок, що зразок 5 містить 5 мкг/на капсулу сибутраміну.

Малюнок 4 представляє дані для зразка № 8 як порівняння між сумарною іонною хроматографією в діапазоні сканування 200-300 м/з (вище), витягнутою хроматограмою аналіту (друга лінія), передачею електронних сигналів 280> 125 м/з і 280> 139 м/z, характерні для аналіту (лінія третя і четверта) та ESI-мас-спектр (нижче), відповідно - зліва - для референтного розчину (стандарт) та праворуч - для аналізованого зразка (зразок No 8 ).

Малюнок 4: Хроматограма стандартного сибутраміну та аналізований зразок No 8.

Встановлено, що кількість сибутраміну у зразку 8 перевищує 20 мг на таблетку.

Лікарські засоби, що містять 10 мг сибутраміну під різними торговими назвами, рекомендовані для прийому один раз на день пацієнтами старше 16 років.

В Інтернет-рекламі для зразка 8 зазначається, що продукт є інноваційним, спеціально розробленим, щоб допомогти в процесі схуднення, не змушуючи споживачів змінювати своє повсякденне життя. Заява про здоров’я - „продукт зменшить вагу з меншими зусиллями; ефект буде постійним, оскільки діє надзвичайно точно, природним та безпечним для організму способом. Його ефект реалізований завдяки спеціальній комбінації абсолютно нейтральних синергетично зв'язаних екстрактів та трав.

Це пригнічує апетит природним шляхом. Рекомендований прийом: вранці натщесерце зі склянкою води. Абсолютно безпечний продукт, без побічних ефектів; зразок харчової добавки № 8 містить незадекларований інгредієнт у концентрації (> 20 мг), що вдвічі перевищує концентрацію в лікарському засобі, що містить сибутрамін (10 мг) (заборонено до прийому в 2010 році).

Зразки 5 і 8 є надзвичайно небезпечними ФС, і їх не слід продавати на ринку ФС. Аналітичні результати підтвердили тези інших дослідників про те, що численні харчові добавки містять незадекларовані речовини.

Глобальні дослідження показали, що близько 20% харчових добавок містять незадекларовані речовини. Встановлено, що заявлений кількісний та якісний зміст часто не відповідав реальному формулюванню [20-27].

Висновок

Більшість клієнтів розглядають FS як безпечний продукт без побічних ефектів та протипоказань. Клієнти не очікують наявності лікарського засобу у ФС. Для пацієнта із серцево-судинними захворюваннями прийом рослинного ФС, що містить незадекларований сибутрамін, може спричинити серйозні та навіть летальні наслідки. Згідно з нещодавніми дослідженнями, більше 20% рослинних ФС містять незадекларований сибутрамін. Ми організували скринінг різних FS для схуднення на сибутрамін за UHPLC/HRMS та UHPLC/MS-MS: 20% аналізованих зразків містили незадекларований сибутрамін. Необхідність кращого контролю якості ФС та інформування громадськості незаперечна.

Подяка

Медичний університет Пловдив, Докторант проекту 2.