Створення каталітично ефективної рекомбінантної білкової лігази

Історія публікацій

Перегляди статей

Альтметричний

Цитати

Перегляди статей - це сумісна з COUNTER сума повнотекстових завантажень статей з листопада 2008 року (як PDF, так і HTML) для всіх установ та приватних осіб. Ці показники регулярно оновлюються з урахуванням використання до останніх кількох днів.

Цитати - це кількість інших статей, що цитують цю статтю, розрахована Crossref і оновлюється щодня. Знайдіть більше інформації про кількість посилань Crossref.

Альтметричний показник уваги - це кількісний показник уваги, яку дослідницька стаття приділяла Інтернету. Клацнувши на піктограму пампушки, ви завантажите сторінку на altmetric.com із додатковими відомостями про оцінку та присутність у соціальних мережах для даної статті. Знайдіть більше інформації про показник висоти уваги та про те, як обчислюється рахунок.

Анотація

Руйнування та утворення пептидильних зв’язків є основними біохімічними реакціями в хімії білка. На відміну від широко доступних протеаз, швидкодіючі лігази зустрічаються рідко. OaAEP1 - це фермент, виділений з рослини, що виробляє циклотид oldenlandia affinis які виявляли слабку пептидну циклазну активність, незважаючи на те, що мають подібну структурну складку з іншими аспарагініл-ендопептидазами (AEP). Тут ми повідомляємо про першу атомну структуру OaAEP1, з роздільною здатністю 2,56 Å, у формі попередньої активації. Наша структура та біохімічний аналіз цього ферменту виявляє його механізм активації, а також структурні особливості, важливі для його лігатурної активності. Важливо, що за допомогою структурного мутагенезу OaAEP1 ми отримали надшвидкий варіант, що має в сотні разів швидшу каталітичну кінетику, здатний лігувати добре складені білкові субстрати, використовуючи лише субмікромолярну концентрацію ферменту. Навпаки, білково-білкова активність лігування в оригінальному ферменті дикого типу OaAEP1, описаному раніше, надзвичайно слабка. Таким чином, структурна інженерія OaAEP1, описана тут, забезпечує унікальний та новий рекомбінантний інструмент, який тепер може бути використаний для проведення різних міток білків та модифікацій, які були надзвичайно складними раніше.

Довідкова інформація

Додаткова інформація доступна безкоштовно на веб-сайті публікацій ACS за адресою DOI: 10.1021/jacs.6b12637.