Метод зменшення маси тіла, накопичення жиру та розміру адипоцитів

Даний винахід описує спосіб зменшення маси тіла, накопичення жиру та розміру адипоцитів шляхом введення пробіотичної бактерії Parabacteroides goldsteinii. Тому цю пробіотичну бактерію можна використовувати для лікування ожиріння у тварин та людей.

метод

Останні CHANG GUNG BIOTECHNOLOGY CORP. Патенти:

Ця заявка заявляє пріоритет заявки на патент Тайваню № 106128174, поданої 18 серпня 2017 р., Зміст якої включений сюди повністю у вигляді посилання.

ПІДСУМКИ ВИНАХОДУ 1. Область винаходу

Даний винахід включає спосіб зменшення маси тіла, накопичення жиру та розміру адипоцитів у осіб із надмірною вагою шляхом введення пробіотичної бактерії Parabacteroides goldsteinii. Тому цю бактерію можна використовувати для лікування ожиріння.

2. Попередній рівень мистецтва

Частота ожиріння зросла за останні роки, досягнувши світового статусу епідемії. У 2014 році Всесвітня організація охорони здоров’я підрахувала, що 39% людської популяції страждає від надмірної ваги (1,9 мільярда людей), а 13% страждає ожирінням (600 мільйонів людей). Люди з ожирінням виявляють підвищений ризик розвитку декількох проблем зі здоров’ям, включаючи гіпертонію, серцево-судинні захворювання, остеоартроз, цукровий діабет 2 типу та рак. Відповідно ожиріння знижує якість життя і може призвести до передчасної смерті. Хоча гени можуть брати участь у розвитку ожиріння, епідемія ожиріння в основному пояснюється висококалорійною дієтою та малорухливим способом життя. Тому ожиріння та його ускладнення можна запобігти зміною способу життя.

Хоча низькокалорійні дієти та регулярні фізичні вправи використовуються для зменшення маси тіла та лікування ожиріння, ці підходи важко реалізувати, а їх ефективність обмежена, головним чином завдяки адаптивним фізіологічним механізмам, що підтримують запаси енергії в організмі. Фармацевтичні препарати схвалені для тривалого лікування ожиріння (наприклад, орлістат, фентермін/топірамат), але вони часто пов’язані з серйозними побічними ефектами, які обмежують ефективність лікування та відповідність пацієнта. Операція для схуднення призводить до значної втрати ваги, але це втручання підходить не всім людям із зайвою вагою. З цих причин альтернативні стратегії зменшення маси тіла та накопичення жиру безпечним та ефективним способом були б дуже корисними.

РЕЗЮМЕ ВИНАХОДУ

Основною метою цього винаходу є створення способу зменшення маси тіла, накопичення жиру та розміру адипоцитів, що включає введення композиції, що містить ефективну кількість Parabacteroides goldsteinii бактерія суб’єкту, який цього потребує.

Згідно з варіантом здійснення цього винаходу, P. goldsteinii є живою бактерією.

Згідно з варіантом здійснення цього винаходу, ефективна кількість P. goldsteinii бактерій становить від 0,001 КУО/кг до 5 × 10 18 КУО/кг маси тіла на добу, а ефективна кількість P. goldsteinii бактерія - 6,1 × 10 9 КУО/особина на добу.

Згідно з варіантом здійснення цього винаходу, композиція містить додатковий активний інгредієнт, і активним інгредієнтом є, щонайменше, один, вибраний із групи, що складається з білка, моносахариду, дисахариду, олігосахариду, полісахариду, вуглеводів, амінокислот, ліпідів, вітамінів та їх комбінацій цього.

Згідно з варіантом здійснення цього винаходу, композиція містить інші бактерії.

Згідно з варіантом здійснення цього винаходу, композиція має форму розчину, желатинової капсули, капсули софтгелю та пресованої таблетки.

Згідно з варіантом здійснення цього винаходу, композицію вводять перорально суб'єкту, який цього потребує.

Відповідно, даний винахід пропонує спосіб лікування ожиріння за допомогою P. goldsteinii; бактерія може зменшити масу тіла, накопичення жиру та розмір адипоцитів, щоб досягти мети запобігання та лікування ожиріння. Отже, спосіб цього винаходу забезпечує нову стратегію запобігання та лікування ожиріння.

КОРОТКИЙ ОПИС КРЕСЛЕНЬ

Наступні креслення складають частину цього опису і включені сюди для подальшої демонстрації деяких аспектів цього винаходу, які можна краще зрозуміти за допомогою посилання на один або декілька з цих креслень у поєднанні з докладним описом варіантів здійснення, представлених тут.

Фіг. 7В показано зменшення розміру адипоцитів епідидиму після цього P. goldsteinii добавки у мишей, що харчуються HFD. Мишей лікували протягом 8 тижнів, як на фіг. 1. Статистичний аналіз проводили з використанням одностороннього пост-hoc ANOVA-тесту (****, P Рисунок 8 показує відсутність ефектів P. goldsteinii добавки щодо щоденного споживання енергії у мишей, що харчуються HFD. Мишей лікували протягом 8 тижнів, як на фіг. 1. Статистичний аналіз проводили з використанням одностороннього пост-специфічного тесту ANOVA Бонферроні (**, P РИС. 9 показує, що Parabacteroides merdae добавки не дозволяють зменшити масу тіла у мишей, що харчуються HFD. Групи тварин складаються з мишей, яких годували стандартним чау та обробляли PBS (Chow + PBS); мишей, яких годували HFD і обробляли PBS (HFD + PBS); і мишей, яких годували HFD і обробляли P. merdae (H1-1)+P. merdae). Наведені дані представляють середнє значення ± SEM. Через 8 тижнів маса тіла мишей HFD + PBS не відрізнялася від маси мишей HFD+P. merdae групу, як було проаналізовано за допомогою двостороннього тесту ANOVA Bonferroni post hoc.

Фіг. 10 показує це P. merdae не зменшує відносної зміни маси тіла у мишей, що харчуються HFD. Експерименти та статистичний аналіз проводили, як на фіг. 9. Статистично значущої різниці між масою тіла HFD + PBS та HFD не виявлено+P. merdae групи через 8 тижнів.

Фіг. 11 показує це P. merdae не впливає на збільшення маси тіла у мишей, що харчуються HFD. Лікування тварин проводили, як на фіг. 9. Після 8 тижнів годування маса тіла мишей, яких годували HFD + PBS, не відрізнялася від маси мишей, яких годували HFD+P. merdae. Дані аналізували, використовуючи односторонній тест ANOVA Bonferroni post hoc.

Фіг. 12 показує це P. merdae не впливає на відносний приріст маси тіла у мишей, що харчуються HFD. Експерименти проводили, як на фіг. 9. Вага тіла мишей, яких годували HFD + PBS, не відрізнялася від маси мишей, яких годували HFD+P. merdae після 8 тижнів годування. Дані аналізували, використовуючи односторонній тест ANOVA Bonferroni post hoc.

ПОДРОБНИЙ ОПИС ПРИБАЖНОГО ВАРІАНТУ

У наступному детальному описі варіантів здійснення цього винаходу робиться посилання на супровідні креслення, які показані для ілюстрації конкретних варіантів здійснення, в яких може бути здійснено справжнє розкриття. Ці варіанти здійснення пропонуються для того, щоб кваліфіковані в даній області техніки практикували справжнє розкриття. Зрозуміло, що можуть бути використані інші варіанти здійснення, і що варіанти здійснення можуть бути внесені без відхилення від обсягу цього винаходу. Отже, наступний опис не слід розглядати як обмежуючий обсяг цього винаходу.

"Ефективна кількість", описана у цьому винаході, являє собою кількість бактерій, яка може зменшити масу тіла, накопичення жиру та розмір адипоцитів у тварин та людей. Ефективна кількість може варіюватися в залежності від організму або окремо обробленого, але може бути визначена експериментально, використовуючи різні методики, включаючи дослідження підвищення дози.

Застосовувані в даному документі дані представляють експериментальні значення, які можуть коливатися в межах ± 20%, переважно в межах ± 10%, а найбільш переважно в межах ± 5%.

Даний винахід пропонує спосіб зменшення маси тіла, накопичення жиру та розміру адипоцитів, що включає введення композиції, що містить ефективну кількість Parabacteroides goldsteinii бактерія суб’єкту, який цього потребує. Наведені нижче експерименти показують ефекти P. goldsteinii на масу тіла, накопичення епідидимального та підшкірного жиру, розмір адипоцитів, середнє споживання енергії та біохімічні маркери крові. Загалом, P. goldsteinii бактерії можна давати ссавцям і людям у дозі від 0,001 КУО/кг до 5 × 10 18 КУО/кг на добу. Винахід докладно описано нижче.

У цьому винаході живі P. goldsteinii бактерія може ефективно лікувати ожиріння та зменшувати масу тіла, накопичення жиру та розмір адипоцитів. P. goldsteinii бактерія цього винаходу може бути додана до раціону суб'єкта, який цього потребує, як лікарський засіб, напій, щоденна добавка або їжа, не зазнаючи значних змін способу життя, токсичності або інших несприятливих станів здоров'я.

У цьому винаході восьмитижневих мишей C57BL/6Narl годують стандартною чау (13,5% енергії з жиру; LabDiet 5001; LabDiet, США) у контрольній групі або з дієтою з високим вмістом жиру (HFD) (60% від енергія від жиру; TestDiet 58Y1; TestDiet, США) в експериментальній групі. Мишей також щодня обробляють 200 мкл P. goldsteinii Штам ATCC BAA-1180 (2 × 10 6 КУО), P. merdae Штам ATCC 43184 (2 × 10 6 КУО) або PBS щодня протягом 8 тижнів внутрішньошлунковою шлунковою шлунковою кишкою (n = 5 мишей на групу). Групи тварин складаються з (1) мишей, яких годували стандартною чау і обробляли PBS (Chow + PBS); (2) мишей, яких годували стандартною чау і обробляли P. goldsteinii (Чау+P. goldsteinii); (3) миші, яких годували HFD і обробляли PBS (HFD + PBS); (4) миші, яких годували HFD і обробляли P. goldsteinii (HFD+P. goldsteinii); та (5) мишей, яких годували HFD та обробляли P. merdae (HFD+P. merdae).

Приклад 1 Ефекти P. goldsteinii Бактерія за масою тіла, накопиченням жиру та розміром адипоцитів у HFD-мишей

ФІГ. 1-7 показують ефекти P. goldsteinii цього винаходу на масу тіла, рівень жиру та розмір адипоцитів мишей, що харчуються чау та HFD. Годування за допомогою HFD збільшувало масу тіла, рівень жиру та розмір адипоцитів порівняно з годуванням чау (ФІГ. 1-7). Варто відзначити, що мишей, оброблених HFD+P. goldsteinii показали зменшення абсолютної та відносної маси тіла (ФІГ. 1 і 2), абсолютного та відносного приросту маси тіла (ФІГ. 3 і 4), епідидимального жиру (ФІГ. 5), підшкірного жиру (ФІГ. 6) та розміру адипоцитів (ФІГ. 7A та 7B) у порівнянні з HFD-мишами. Примітно, P. goldsteinii добавки зменшили масу тіла мишей, що годували HFD, на 6,2 г порівняно з групою HFD (фіг. 1), що представляє зменшення на 22,5% маси тіла (фіг. 2).

Як показано на ФІГ. 1-7, P. goldsteinii може зменшити масу тіла, накопичення жиру та розмір адипоцитів у мишей, що харчуються HFD. Виходячи з цих результатів, ефективна сума P. goldsteinii необхідний для досягнення ефектів проти ожиріння у мишей із середньою масою тіла 23 г становить 8,7 × 10 7 КУО/кг на день протягом 8 тижнів. Відповідно, ефективна сума P. goldsteinii що призведе до подібних ефектів проти ожиріння у людини із середньою вагою 70 кг, оцінюється у 6,1 × 10 9 КУО/особа на день.

Приклад 2 Ефекти P. goldsteinii Лікування бактерій щодо середнього споживання енергії у HFD-мишей

Фіг. 8 показує ефекти P. goldsteinii лікування середнім споживанням енергії мишами, що харчуються чау та HFD. У той час як група HFD-PBS демонструвала вищі середні рівні споживання енергії порівняно з Chow + PBS та Chow+P. goldsteinii групи, P. goldsteinii група лікування не впливала на середнє споживання енергії у мишей, що годували HFD. Ці результати свідчать про те, що P. goldsteinii лікування не впливало на апетит.

Приклад 3 Ефекти P. goldsteinii Лікування бактерій за біохімічними показниками крові у мишей, що харчуються чау

Даний винахід розкриває відсутність ефектів P. goldsteinii лікування біохімічних показників крові у мишей, що годували чау. До досліджуваних біохімічних показників крові належать такі, що використовуються для оцінки функцій печінки, такі як ферменти аспартаттрасаміназа (AST) та аланінтрасаміназа (ALT), а також біохімічні показники крові, що використовуються для оцінки функцій нирок, такі як азот сечовини крові (BUN) і креатинін. Біохімічні показники крові контролювали за допомогою біохімічного аналізатора (Hitachi 7080, Hitachi, Японія). Як показано в таблиці 1, статистичних відмінностей між біохімічними показниками крові мишей, що годували чау, не отримували PBS або P. goldsteinii, із зазначенням того P. goldsteinii не впливало на функції печінки або нирок за цих умов.

Порівняльний приклад 1 Ефекти інших Парабактероїди Види бактерій за масою тіла та приростом маси тіла у HFD-мишей

Даний винахід розкриває ефекти P. merdae, інший вид Парабактероїди роду, який використовували як негативний контроль, на масу тіла мишей, що годувались чау та HFD. Після 8 тижнів годування, P. merdae добавки не змогли зменшити абсолютну масу тіла (фіг. 9), відносну зміну маси тіла (фіг. 10), абсолютний приріст маси тіла (фіг. 11) та відносний приріст маси тіла (фіг. 12) у мишей, що годували HFD. Іншими словами, миші HFD+P. merdae група не показала статистично значущої різниці у згаданих параметрах маси тіла порівняно з мишами, які отримували HFD + PBS (ФІГ. 9-12). Ці результати вказують на те, що властивість проти ожиріння P. goldsteinii не є загальною характеристикою Парабактероїди рід, але обмежений видом P. goldsteinii.

Даний винахід пропонує спосіб лікування ожиріння з використанням пробіотичної бактерії P. goldsteinii. P. goldsteinii бактерія може зменшити масу тіла, накопичення жиру та розмір адипоцитів у тварин та людей. Поки багато Парабактероїди існують види (напр., P. merdae), даний винахід розкриває, що не всі Парабактероїди види спричиняють ефект ожиріння у мишей, що харчуються HFD. Отже, даний винахід пропонує нову стратегію управління вагою тіла, стимулювання втрати ваги та зменшення накопичення жиру у людей. Ця стратегія має очевидне потенційне комерційне застосування, враховуючи величезну кількість продуктів та процедур, доступних на ринку для зменшення маси тіла або підтримки оптимальної ваги та загального стану здоров'я.

Незважаючи на те, що даний винахід було описано з посиланням на кращі варіанти здійснення, для фахівця в даній галузі буде очевидно, що різноманітні модифікації та зміни форми та деталей можуть бути здійснені, не виходячи за межі обсягу цього винаходу, визначеного додані вимоги.

Претензії

1. Спосіб зменшення маси тіла, накопичення жиру та розміру адипоцитів суб'єкта на дієті з високим вмістом жиру, що включає введення композиції, що містить ефективну кількість бактерії Parabacteroides goldsteinii, зазначеному суб'єкту.

2. Спосіб за п. 1, в якому бактерія Parabacteroides goldsteinii є живою бактерією.

3. Спосіб за п. 1, в якому ефективна кількість бактерії Parabacteroides goldsteinii становить від 0,001 КУО/кг до 5 × 1018 КУО/кг маси тіла на добу.

4. Спосіб за п. 1, в якому ефективна кількість бактерії Parabacteroides goldsteinii становить 6,1 × 109 КУО на день.

5. Спосіб за п. 1, в якому композиція додатково містить додатковий активний інгредієнт.

6. Спосіб за п. 5, в якому додатковим активним інгредієнтом є, принаймні, один, обраний із групи, що складається з білка, моносахариду, дисахариду, олігосахариду, полісахариду, вуглеводів, амінокислот, ліпідів, вітамінів та їх комбінацій.

7. Спосіб за п. 1, в якому композиція додатково містить інші бактерії.

8. Спосіб за п. 1, в якому композиція має форму розчину, желатинової капсули, капсули софтгель або пресованої таблетки.

9. Спосіб за п.1, в якому композицію вводять перорально зазначеному суб'єкту.