Чи є ліганди Hydantoin-1,3,5-triazine 5-HT6R надією на пошук нового прокогнітивного та проти ожиріння препарату? Міркування, засновані на первинних аналізах in vivo та профілі ADME-Tox in vitro

Переважаючі сульфон- та індол-містять структури лігандів 5-НТ6 (5-НТ6R) рецепторів серотоніну, виявлені раніше: єдина несульфонільна та неіндольна структура в клінічних випробуваннях (1) [4]; найактивніші агенти 5-HT6R, які представляють хімічні сімейства, нещодавно виявлені в первинних скринінгах, тобто 1 H-пірроло [3,2-c] хінолони (2) [11], N 1-азинілсульфоніл-1 H-індолі (3 ) [12], спіро [піролідин-3,3′-оксиндоли] (4) [13] та трициклічні пірано [2,3,4-cd] індоли (5) [14]; найдосконаліші сполуки в клінічних випробуваннях щодо хвороби Альцгеймера (БА), тобто ідалопірдин (6), інтепірдин (7) та SUVN-502 (8) [15].

Виявлені загальні структури двох серій 1,3,5-триазину гідантоїну 5-HT6R, групи А та групи В, з відповідними “хітами” DJ-18 та 3 - ((4-аміно-6- (4-метилпіперазин) -1-іл) -1,3,5-триазин-2-іл) метил) -5-метил-5- (нафтален-2-іл) імідазолідин-2,4-діон (KMP-10).

Режим стикування до 5-HT6R ідалопірдину (A), SUVN-502 (B) та KMP-10 (C).

Вплив верапамілу (VL) та лігандів 5-HT6R на базальну активність P-глікопротеїну (Pgp) (базальна). Статистична значущість (** p TM 6 програмне забезпечення з використанням одностороннього ANOVA та багаторазового порівняння Бонферроні пост-хоктесту. Сполуки досліджували у трьох примірниках.

In silico прогнозування ділянок метаболізму за допомогою MetaSite 6.01 для KMP-10 та DJ-18. Блакитне коло, позначене на структурах функціональної групи, вказує на найбільшу ймовірність біотрансформації. Вицвітання червоного кольору свідчить про зменшення ймовірності метаболізму.

Спектри UPLC реакційних сумішей після 120 хв інкубації DJ-18 (a) та KMP-10 (b) з мікросомами печінки людини (HLM).

Вплив еталонного інгібітора (кетоконазолу), KMP-10 та DJ-18 на активність CYP3A4 (a). Вплив референтного інгібітора хінідину, KMP-10 та DJ-18 на активність CYP2D6 (b). З'єднання досліджували у трьох примірниках.

Кількість ревертантів штаму Salmonella typhimurium TA100, що зазнали дії еталонного мутагену ноніл-4-гідроксихінолін-N-оксиду (NQNO, 0,5 мкМ) та 5-HT6R лігандів у двох концентраціях 1 та 10 мкМ. Пунктирною лінією позначено подвоєну базову лінію контролю середнього рівня (MCB). З'єднання досліджували у трьох примірниках.

Вплив референтного цитостатичного препарату доксорубіцину (DX, 1 мкМ), DJ-18 (a) та KMP-10 (b) на життєздатність клітинної лінії HepG2. DMSO 1% у середовищі для росту клітин (носій) використовували як контроль. Статистична значущість (*** p p TM 6, програмне забезпечення з використанням одностороннього ANOVA та багаторазового порівняльного тесту Бонферроні post-hoc. Сполуки досліджували в чотирьох повторах.

Вплив тривалого введення KMP-10 на кількість перитонеального жиру (a, b) та вагу печінки (c, d) у самців щурів Wistar. Результати є середніми ± SEM, n = 8. Порівняння проводили за допомогою t-тесту Стьюдента.

Зміни спонтанної активності після одноразового (а) та чотирнадцятого (б) та двадцять (в) днів введення КМР-10 щурам, яких годували смачною дієтою. Результати є середніми ± SEM; n = 8, порівняння порівняно з групами контролю надмірного харчування, які отримували транспортний засіб (двостороння ANOVA).

Анотація

1. Вступ

2. Результати та обговорення

2.1. Молекулярне моделювання

2.2. Параметри ADME-Tox In vitro

2.2.1. Аналізи проникності

Паралельний аналіз проникності штучної мембрани (PAMPA)

На 1,65 сильніша здатність проникати через штучну мембрану, ніж високопроникний еталонний кофеїн, тоді як KMP-10 із нафтильним заступником показав

У 4 рази слабша проникність, ніж кофеїн (табл. 2). Результат для DJ-18 підтвердив наші попередні дані, де ліганд 5-HT6R на основі триазину з присутністю хлорбензильного фрагменту (З'єднання 1 у посиланні [22]) також був показаний як високопроникна сполука в PAMPA (Pe = 23,6 × 10-6 см/с).

Аналіз проникності з використанням клітин Caco-2

2.2.2. Спорідненість до P-глікопротеїну

2.2.3. Зв’язування з білками плазми

98,5% частки варфарину, зв’язаного з білками плазми крові (fb), було оцінено та виявлено подібним до результатів літератури [25,26]. Як наслідок, лише 1,5% варфарину в крові забезпечувало його терапевтичний ефект. Випробуване похідне триазину KMP-10 показало набагато кращий результат, ніж варфарин, оскільки його fb було розраховано на рівні 84,5% (табл. 2). Більше того, розрахована константа рівноваги дисоціації (KD) для KMP-10 становила

В 10 разів вищий, ніж у варфарину (112 проти 9,50 мкМ відповідно; Таблиця 2).

2.2.4. Стійкість метаболізму

У 8 разів (KMP-10) довший за еталон - нестабільний препарат верапаміл (табл. 2). Спостережувані хороші фармакокінетичні властивості відповідають результатам попередньо випробуваних лігандів триазину 5-HT6R (зі значенням CLint також нижче 8,6 мл хв -1 кг -1) [22]. У цьому контексті властивості KMP-10 були навіть кращими, ніж найактивнішого агента 5-HT6R, виявленого раніше, похідного тимол-1,3,5-триазину MST4 (4 у посиланні [22]) діапазон похідного індолеметилтриазину (3 у посиланні [22]).

2.2.5. Взаємодія між наркотиками та наркотиками (DDI)

42% активності CYP3A4, але лише при найвищих концентраціях ≥ 10 мкМ. З іншого боку, незначний стимулюючий ефект CYP3A4 спостерігався для KMP-10 при найвищій використаній дозі 25 мкМ (рис. 7а). Обидва сполуки також злегка індукували CYP2D6 (рис. 7b). Підводячи підсумок, сполуки показали дуже низький або відсутність ризику розвитку ДДІ порівняно з еталонними інгібіторами хінідином та кетоконазолом, результати, які корелюють з попередніми даними, отриманими для інших лігандів 5-HT6R із групи 1,3,5-триазин-метилпіперазинів [22].

2.2.6. Тест Еймса

2.2.7. Аналіз гепатотоксичності

83% контролю (рис. 9а). KMP-10 не виявляв жодного гепатотоксичного характеру (рис. 9b). Загалом, беручи до уваги результати наших сучасних та попередніх аналізів безпеки, всі дотепер перевірені 1,3,5-триазин-метилпіперазини з нашої бібліотеки сполук виявляли слабку або відсутність цитотоксичної активності [19,22].