Зниження рівня циркулюючих регуляторних лімфоцитів у пацієнтів із ожирінням, які перенесли баріатричну операцію

Affiliation Clinica Medica, Відділ клінічних та експериментальних наук, Університет Брешії, Брешія, Італія

Кафедра ревматології відділення клінічних та експериментальних наук Університету Брешії, Брешія, Італія

Ролі Курація даних

Кафедра ревматології відділення клінічних та експериментальних наук Університету Брешії, Брешія, Італія

Affiliation Clinica Medica, Відділ клінічних та експериментальних наук, Університет Брешії, Брешія, Італія

Affiliation Clinica Chirurgica, Відділ клінічних та експериментальних наук, Університет Брешії, Брешія, Італія

Ролі Курація даних

Affiliation Clinica Chirurgica, Відділ клінічних та експериментальних наук, Університет Брешії, Брешія, Італія

Affiliation Clinica Medica, Відділ клінічних та експериментальних наук, Університет Брешії, Брешія, Італія

Ролі Формальний аналіз

Affiliation Clinica Medica, Відділ клінічних та експериментальних наук, Університет Брешії, Брешія, Італія

Ролі Курація даних

Affiliation Clinica Chirurgica, Відділ клінічних та експериментальних наук, Університет Брешії, Брешія, Італія

Affiliation Clinica Medica, Відділ клінічних та експериментальних наук, Університет Брешії, Брешія, Італія

Ролі Курація даних

Affiliation Clinica Chirurgica, Відділ клінічних та експериментальних наук, Університет Брешії, Брешія, Італія

Кафедра ревматології відділення клінічних та експериментальних наук Університету Брешії, Брешія, Італія

Ролі Курація даних

Affiliation Clinica Chirurgica, Відділ клінічних та експериментальних наук, Університет Брешії, Брешія, Італія

Affiliation Clinica Medica, Відділ клінічних та експериментальних наук, Університет Брешії, Брешія, Італія

Ролі Концептуалізація, написання - оригінальний проект

Афіліації Clinica Medica, кафедра клінічних та експериментальних наук, Університет Брешії, Брешія, Італія, Istituto Clinico Città di Brescia, Медичний відділ, Брешія, Італія

Клавдія Агабіті-Росей,
Валентина Траплетті,
Сільвія Піантоні,
Паоло Еро,
Анжела Тинкані,
Кароліна де Сіусейс,
Клаудія Россіні,
Франческо Міттемпергер,
Амін Тіті,
Назаріо Портолані

Цифри

Анотація

Об’єктивна

Раніше було продемонстровано, що Т-лімфоцити можуть брати участь у розвитку гіпертонії та мікросудинного ремоделювання, і що циркулюючі Т-ефекторні лімфоцити можуть бути збільшені при гіпертонії. Зокрема, лімфоцити Th1 та Th 17 можуть сприяти прогресуванню гіпертонії та мікросудинних ушкоджень, тоді як Т-регулюючі (Treg) лімфоцити в цьому відношенні видаються захисними. Однак відсутні дані про пацієнтів з важким ожирінням, у яких спостерігались виражені мікросудинні зміни.

Дизайн та методи

Ми дослідили 32 пацієнтів з важким ожирінням, які перенесли баріатричну хірургію, а також 24 нормотензивних худорлявих пацієнтів та 12 гіпертоніків худих пацієнтів, які пройшли планове хірургічне втручання. Перед хірургічним втручанням отримували зразок периферичної крові для оцінки субпопуляцій CD4 + Т-лімфоцитів. Фенотип лімфоцитів оцінювали за допомогою проточної цитометрії з метою оцінки Т-ефекторних та Treg лімфоцитів.

Результати

Помітне зменшення кількох субпопуляцій Treg спостерігалося у пацієнтів із ожирінням порівняно з контролем, разом із збільшенням T-ефекторних клітин ефекторної пам'яті CD4 +.

Висновок

У пацієнтів з важким ожирінням лімфоцити Treg чітко знижуються, а клітини ефекторної пам'яті CD4 + збільшуються. Можна припустити, що вони можуть сприяти розвитку помітних мікросудинних змін, які раніше спостерігались у цих пацієнтів.

Цитування: Agabiti-Rosei C, Trapletti V, Piantoni S, Airò P, Tincani A, De Ciuceis C, et al. (2018) Зниження циркулюючих регуляторних Т-лімфоцитів у пацієнтів із ожирінням, які перенесли баріатричну операцію. PLoS ONE 13 (5): e0197178. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0197178

Редактор: Сяньву Ченг, Університет Нагої, ЯПОНІЯ

Отримано: 9 грудня 2017 р .; Прийнято: 27 квітня 2018 р .; Опубліковано: 14 травня 2018 р

Наявність даних: Усі відповідні дані містяться в роботі.

Фінансування: Автори не отримали конкретного фінансування для цієї роботи.

Конкуруючі інтереси: Автори заявили, що не існує конкуруючих інтересів.

Вступ

Зростаюча частота та поширеність ожиріння серед майже всіх країн світу різко впливає на серцево-судинний ризик [1,2]. Підвищений системний окислювальний стрес/запалення є загальним супутником ожиріння [3–6], як свідчить спостереження в ряді досліджень, підвищених маркерів циркуляції, включаючи інтерлейкін-6, С-реактивний білок, фактор некрозу пухлини альфа та плазміноген інгібітор активатора-1 [3–6]. Пацієнти з ожирінням, незалежно від наявності гіпертонії, демонструють наявність мікросудинних структурних змін разом із дисфункцією ендотелію [7]. Після хірургічної корекції ожиріння та постійної втрати ваги спостерігали значне поліпшення мікросудинної структури та деяких маркерів окисного стресу/запалення [7].

Пацієнти та методи

Ми обстежили тридцять двох пацієнтів з абдомінальним ожирінням, визначеним згідно з чинними італійськими рекомендаціями [24], і госпіталізовані до хірургічного відділення нашої лікарні для показань до баріатричної хірургії, зокрема до шунтування товстої кишки або біліопанкреатичного похідного.

Протокол дослідження був затверджений Комітетом з етики нашого закладу (Медична школа, Університет Брешії), і письмова інформована згода була отримана від кожного учасника. Процедури, які виконувались, відповідали інституційним рекомендаціям.

Вісімнадцять пацієнтів із ожирінням були нормотензивними та 14 гіпертоніками, згідно з даними Європейського товариства гіпертонії та Європейського кардіологічного товариства 2013 [25]. Контроль представляли 24 худих нормотензивних пацієнта та 12 худорлявих пацієнтів з есенціальною гіпертензією, які проходили стандартну операцію. Більшість з 14 пацієнтів з гіпертонічною ожирінням та 12 пацієнтів з гіпертонічною худобою раніше лікувались різними антигіпертензивними препаратами, хоча різниці між групами не було у частці лікуваних пацієнтів, а також у типах антигіпертензивних препаратів. Заздалегідь не було встановлено відповідності випадків та контролів, і вся досліджена популяція є репрезентативною для популяції пацієнтів, які зазвичай надходять до нашого хірургічного відділення. Отже, 36 худорлявих контролів було включено послідовно, а потім, після прийому, підгрупували гіпертонікам та нормотензивам.

Зразки венозної крові брали для стандартних гематологічних та біохімічних досліджень сироватки крові (включаючи тригліцериди та загальний холестерин) у пацієнтів із ожирінням та у худих суб'єктів та пацієнтів.

Оцінка фенотипу циркулюючих CD4 + Т-лімфоцитів

Фенотипову характеристику CD4 + Т-клітин периферичної крові проводили за допомогою проточної цитометрії (Cytomics NAVIOS, Beckman Coulter Inc., Fullerton, CA), як повідомлялося раніше [14,26]: 100 мікролітрів цільної крові інкубували сумішшю моноклональних антитіл (від Бекмана Coulter, R&D Systems, Caltag Laboratories, Becton Dickinson, San Jose, CA), кон'югований з флуорохромами при 4 ° C протягом 30 хвилин. Подвійні негативні CD3 + CD4-CD8-Т-клітини оцінювали у всіх пацієнтів, і не спостерігалось різниці між нормальними та гіпертонічними особами. Абсолютну кількість клітин визначали одноплатформовим аналізом із використанням гранул Flow-Count (Beckman Coulter).

CD4 + Tregs визначались високою експресією CD25 та низькою експресією/відсутністю CD127, використовуючи кон'югований з РС5 анти-CD4, кон'югований з РЕ анти-CD25 та кон'югований з РС-7 анти-CD127 [27].

Крім того, різні субпопуляції Tregs були ідентифіковані з використанням у двох окремих пробірках кон'югованого FITC CCR7 або FITC-кон'югованого CD31 та CD45RA-кон'югованого ECD.

Підгрупи трегів визначали наступним чином: -Недавні емігранти тимусу (RTE), безпосередньо похідні від тимусу: CD31 +; -Naive: CCR7 + CD45RA +; -Центральна пам'ять (СМ): CCR7 + CD45RA-; -Пам'ять ефектора (ЕМ): CCR7-CD45RA-; -Термінальна диференційована ефекторна пам'ять (TDEM): CCR7-CD45RA +. Нарешті, кількість ЕМ оцінювали серед усіх CD4 + Т-клітин (CD4 + ЕМ).

Приклади даних проточної цитометрії та використовуваної стратегії регулювання представлені на рис. 1.