Зниження гомоцистеїну в плазмі натще, пов’язане з вагітністю, не пояснюється добавками фолієвої кислоти, гемодилюцією або зменшенням альбуміну в лонгітюдному дослідженні

Мішель Мерфі, Джон М Скотт, Джозеф М Макпартлін, Джоан Д Фернандес-Балларт, Зниження вагітності плазмового гомоцистеїну натще не пояснюється добавками фолієвої кислоти, гемодилюцією або зменшенням альбуміну в лонгітюдному дослідженні, The American Journal клінічного харчування, том 76, випуск 3, вересень 2002, сторінки 614–619, https://doi.org/10.1093/ajcn/76.3.614

натще

АНОТАЦІЯ

Передумови: Загальний гомоцистеїн у плазмі натще (tHcy) зменшується під час вагітності. Попередні звіти припускали, що це пов’язано з добавками фолієвої кислоти, гемодилюцією або зменшенням альбуміну. Однак ці гіпотези не були перевірені в лонгітюдному дослідженні.

Завдання: Ми досліджували взаємозв'язок між фізіологічними змінами, пов'язаними з вагітністю, і tHcy у групі здорових жінок, які не отримували добавки або не отримували фолієву кислоту.

Дизайн: У лонгітюдному дослідженні від попереднього зачаття протягом всієї вагітності ми вивчали 54 жінки, які не отримували доповнень, та 39 жінок, яким вводили фолієву кислоту протягом другого або третього триместру вагітності. tHcy, гематокрит та сироватковий альбумін визначали попередньо і на 8, 20 та 32 тижнях вагітності.

Результати: Для всієї групи середньогеометричні концентрації tHcy у період до зачаття (8,2 мкмоль/л) були значно вищими (P

ВСТУП

ПРЕДМЕТИ І МЕТОДИ

Предмети

Вивчати дизайн

Протягом усього дослідження у досліджуваних відбирали зразки крові після того, як вони голодували протягом ночі. Якщо суб'єкти не завагітніли протягом 3 менструальних періодів після першого зразка крові перед зачаттям, брали інший зразок. Подібним чином, проби крові брали кожні 3 менструальних періоди до зачаття суб'єктів. Були використані дані останнього візиту до зачаття, PreC, який становив ≈2–10 тижнів до зачаття. Випробовуваним було доручено провести тест на вагітність та повідомити слідчу групу негайно після пропуску першої менструації. Вагітність підтверджено ультразвуковим дослідженням. Вагітним випробовували зразки крові у першому триместрі між 53 і 59 днями після першого дня їх останньої менструації (тобто на ≈7,5–8 тижнів вагітності). Зразки крові у другому триместрі були взяті на 20 тижні вагітності, а в третьому триместрі - на 32 тижні вагітності.

Добавки фолієвої кислоти

Рішення щодо використання добавок фолієвої кислоти залишалося спільною відповідальністю суб'єкта та акушера. Жодна з жінок не приймала добавки з фолієвою кислотою ні в період до зачаття, ні в перший триместр вагітності, а 54 жінки не приймали добавки з фолієвою кислотою протягом усього дослідження. Тридцять дев'ять жінок приймали добавки з фолієвою кислотою протягом другого або третього триместру вагітності. Протягом другого триместру 34 жінки приймали 500 мкг фолієвої кислоти на добу, 1 - 750 мкг фолієвої кислоти на добу, 1 - 1 мг фолієвої кислоти на добу та 1 - 15 250 мкг фолієвої кислоти на добу. Протягом третього триместру 33 жінки приймали 500 мкг фолієвої кислоти на добу, 1 - 750 мг фолієвої кислоти на добу, 1 - 1 мг фолієвої кислоти/день, 1 - 2 мг фолієвої кислоти/день, 1 - 15 мг фолієвої кислоти/день і 1 приймав 15 500 мг фолієвої кислоти на добу. Доповнену групу не розподіляли за дозою фолієвої кислоти, оскільки аналізи показали, що висновки були незмінними, включивши всіх споживачів добавок до однієї групи.

Інтерв’ю

На тижні кожного збору зразків крові були опитані випробовувані щодо поточного використання ними ліків та вітамінних добавок, а також проводились антропометричні вимірювання та вимірювання артеріального тиску. У першому з цих випадків також було записано детальну історію хвороби. Під час цих інтерв'ю випробовуваних опитували щодо структурованих щоденників, в яких вони детально фіксували вживання ліків або вітамінних добавок протягом попередніх 7 днів. Суб'єкти, які вживали ліки або добавки, опитувались щодо назви препарату, дози та тривалості лікування. Відповіді випробовуваних на ці запитання підтверджувалися змістом їх щоденників. Суб'єкти, які підтвердили використання добавок як під час інтерв'ю, так і в щоденнику, були віднесені до категорії споживачів добавок. Курців та некурців не розділяли для аналітичних цілей, оскільки куріння під час вагітності не впливає на концентрацію tHcy у матері (14).

Збір та аналіз зразків

Зразки венозної крові натще приймали з антекубітальної вени в евакуйовані з використанням калію ЕДТА для аналізу цільної крові та плазми та в необроблені евакуйовані зонди для приготування сироватки. Зразки крові негайно охолоджували, а плазму відокремлювали центрифугуванням при 1000 × g протягом 15 хв при 4 ° C протягом 2 год відбору зразків. Плазму зберігали при -20 ° C перед аналізом tHcy. Концентрації tHcy визначали за допомогою імунологічного аналізу IMx (відділ діагностики лабораторій Abbott, Абботт-Парк, штат Іллінойс). Гематокрит визначали за допомогою гематологічного аналізатора Coulter STKS (Beckman Coulter, Miami). Концентрації альбумінів у сироватці крові визначали за допомогою колориметричного аналізу альбуміну Boehringer Mannheim (Boehringer Mannheim Laboratories, Мангейм, Німеччина).

Статистичний аналіз

Всі статистичні аналізи проводились за допомогою програми SPSS версії 10.0 (SPSS Inc, Чикаго). Дані tHcy були перетворені в журнал для наближення до нормалізації. Середні процентні зміни між попереднім зачаттям та вагітністю також були визначені для даних гематокриту та альбуміну, трансформованого в журнал. Спочатку використовували двосторонній дисперсійний аналіз дисперсії, щоб дослідити вплив використання добавок (міжсуб’єктний фактор) на концентрацію tHcy протягом вагітності (внутрішньосуб’єктний фактор). Оскільки термін взаємодії був значним, ми проаналізували вплив часу під час вагітності на концентрацію tHcy у кожній групі (вкладена модель). Неортогональний повторний контраст був використаний для перевірки достовірності відмінностей середніх концентрацій tHcy між послідовними часовими точками під час вагітності.

Щоб дослідити, чи була концентрація PreC tHcy сполучником у досліджуваному раніше відношенні, ми розширили модель, встановивши тристоронній дисперсійний аналіз дисперсії з 1 внутрішньосуб'єктним фактором (час під час вагітності) та 2 міжсуб'єктними факторами (використання добавки та PreC tHcy концентрація тертил). Враховуючи значущість як двосторонньої взаємодії (час під час вагітності × вживання добавки та час під час вагітності × концентрація PreC tHcy), ми перевірили вплив часу під час вагітності на концентрацію tHcy у кожній групі добавок та концентрацію PreC tHcy (вкладена модель) ). Простий контраст використовували для перевірки достовірності відмінностей середніх концентрацій tHcy між кожною точкою часу під час вагітності та періодом PreC (контрольне значення). Паровий t-тест Стьюдента був використаний для порівняння середніх процентних різниць у tHcy, гематокриті та сироватковому альбуміні між попереднім зачаттям та вагітністю. Усі значення P, отримані в результаті пост-хок аналізів, були виправлені за Бонферроні. Лінійні коефіцієнти кореляції Пірсона були визначені для оцінки асоціації між індукованими вагітністю змінами гематокриту, сироваткового альбуміну та tHcy. Значення для двосторонньої гіпотези було встановлено при Р = 0,05.

РЕЗУЛЬТАТИ

Як показано в таблиці 1, випробовуваних розподілили на 2 групи залежно від того, чи отримували вони добавки з фолієвою кислотою. Для аналітичних цілей для розрізнення фізіологічних ефектів вагітності та фармакологічного впливу добавок фолієвої кислоти на концентрації tHcy 2 групи аналізували окремо. Характеристики попереднього зачаття та звички куріння під час вагітності 2 груп наведені в таблиці 1. Вік, співвідношення, попереднє застосування оральних контрацептивів, концентрація гемоглобіну, індекс маси тіла та відсоток курців не суттєво відрізнялися між двома групами.

Характеристика досліджуваної популяції до узагальнення та звички куріння під час вагітності в групах фолієвої кислоти - без добавки та - з доповненням 1

. Без доповнень (n = 54). Додано (n = 39) .
Вік (y) 2 29,7 ± 2,6 29,1 ± 3,0
Первородний (%) 66,7 50,0
Вживання пероральної контрацепції (%) 81,5 71,8
Гемоглобін (г/л) 2 133,0 ± 7,5 133,0 ± 8,4
ІМТ (кг/м 2) 2 23,4 ± 2,7 22,8 ± 3,2
Куріння під час вагітності
До 10 тижня
(%) 37.4 20,0
Сигарети/д 2 4,43 ± 7,04 3,76 ± 5,80
До терміну
(%) 8.3 12,0
Сигарети/д 2 1,68 ± 3,52 0,74 ± 1,91
. Без доповнень (n = 54). Додано (n = 39) .
Вік (y) 2 29,7 ± 2,6 29,1 ± 3,0
Первородний (%) 66,7 50,0
Вживання пероральної контрацепції (%) 81,5 71,8
Гемоглобін (г/л) 2 133,0 ± 7,5 133,0 ± 8,4
ІМТ (кг/м 2) 2 23,4 ± 2,7 22,8 ± 3,2
Куріння під час вагітності
До 10 тижня
(%) 37.4 20,0
Сигарети/д 2 4,43 ± 7,04 3,76 ± 5,80
До терміну
(%) 8.3 12,0
Сигарети/д 2 1,68 ± 3,52 0,74 ± 1,91

Істотних відмінностей між характеристиками груп, що не доповнювались та доповнювали, не було.

Характеристика досліджуваної популяції до узагальнення та звички куріння під час вагітності в групах фолієвої кислоти - без добавки та - з доповненням 1

. Без доповнень (n = 54). Додано (n = 39) .
Вік (y) 2 29,7 ± 2,6 29,1 ± 3,0
Первородний (%) 66,7 50,0
Вживання пероральної контрацепції (%) 81,5 71,8
Гемоглобін (г/л) 2 133,0 ± 7,5 133,0 ± 8,4
ІМТ (кг/м 2) 2 23,4 ± 2,7 22,8 ± 3,2
Куріння під час вагітності
До 10 тижня
(%) 37.4 20,0
Сигарети/д 2 4,43 ± 7,04 3,76 ± 5,80
До терміну
(%) 8.3 12,0
Сигарети/д 2 1,68 ± 3,52 0,74 ± 1,91
. Без доповнень (n = 54). Додано (n = 39) .
Вік (y) 2 29,7 ± 2,6 29,1 ± 3,0
Первородний (%) 66,7 50,0
Вживання пероральної контрацепції (%) 81,5 71,8
Гемоглобін (г/л) 2 133,0 ± 7,5 133,0 ± 8,4
ІМТ (кг/м 2) 2 23,4 ± 2,7 22,8 ± 3,2
Куріння під час вагітності
До 10 тижня
(%) 37.4 20,0
Сигарети/д 2 4,43 ± 7,04 3,76 ± 5,80
До терміну
(%) 8.3 12,0
Сигарети/д 2 1,68 ± 3,52 0,74 ± 1,91

Істотних відмінностей між характеристиками груп, що не доповнювались та доповнювали, не було.

Середні геометричні концентрації tHcy до і під час вагітності для обох груп наведені в таблиці 2. В обох групах спостерігався значний (Р ТАБЛИЦЯ 2

Концентрації tHcy у фолієвій кислоті - не доповнені та - доповнені групи до і під час вагітності 1

Геометричні x̄ ± SD; n у дужках.

Двосторонні повторні заходи ANOVA (внутрішньосуб’єктний фактор: час вагітності; міжсуб’єктний фактор: використання добавок). Термін взаємодії між часом вагітності та вживанням добавок: P

Значно відрізняється від 8 тижнів, P

Доповнюється фолієвою кислотою протягом другого або третього (або обох) триместру вагітності.

Істотно відрізняється від не доповненого: P

Суттєво відрізняється від не доповненого: P = 0,015.

Концентрації tHcy у групах фолієвої кислоти - без доповнення та - з добавками до і під час вагітності 1

Геометричні x̄ ± SD; n у дужках.

Двосторонні повторні заходи ANOVA (внутрішньосуб’єктний фактор: час вагітності; міжсуб’єктний фактор: використання добавок). Термін взаємодії між часом вагітності та вживанням добавок: P

Значно відрізняється від 8 тижнів, P

Доповнюється фолієвою кислотою протягом другого або третього (або обох) триместру вагітності.

Істотно відрізняється від не доповненого: P

Суттєво відрізняється від не доповненого: P = 0,015.

Результати, наведені в таблиці 2 та на малюнку 1, показують, що концентрації tHcy поступово зменшувались на початку та в середині вагітності та досягали мінімуму на пізніх термінах вагітності, без подальшого зниження. У лонгітюдному дослідженні Cikot та співавт. (10) повідомили лише про незначне зниження концентрації tHcy під час вагітності на ранніх термінах, без подальшого зниження протягом всієї середини та пізньої вагітності. Цей висновок явно суперечить результатам літератури, згаданим раніше, та спостереженням, про які повідомляється в цій статті. Невеликий розмір голландської проби та той факт, що концентрації tHcy були визначені у зразках крові, що не містять голоду, є 2 критичними факторами у дослідженні, які ускладнюють порівняння результатів. Інші автори повідомляли про спостереження, подібні до наших, за зниженою концентрацією tHcy під час вагітності (8, 9).

Концентрація tHcy під час вагітності може бути індукована ендокринною системою, і гормони можуть чинити сильніший вплив, ніж вміст вітамінів, на зниження концентрації tHcy. Таким чином, мінімальна концентрація tHcy, нижче якої подальше зниження не може відбутися, незважаючи на підвищення концентрації естрогену, може бути досягнута під час вагітності, як показано в найнижчому ефекті цього та інших досліджень. Альтернативно, інші гормональні зміни, які відбуваються під час вагітності пізніше, можуть зменшити початковий ефект зниження рівня tHcy. Steegers-Theunissen та ін. (16) припускають, що зміни потреби в метіоніні можуть пояснити зниження концентрації tHcy під час вагітності. Однак важко зрозуміти, як посилене використання метіоніну плодом на 8-му тижні вагітності зменшило б концентрацію материнського tHcy на ранніх термінах вагітності. Гомоцистеїн, що виникає внаслідок такого фетального метаболізму метіоніну, може взагалі відображатися в одночасному збільшенні концентрації tHcy у матері. Початкове зниження та подальше зниження концентрації tHcy може, навпаки, пояснити зниження потреби в метіоніні під час вагітності. Навіть якщо фетальне поглинання tHcy відбулося в середині та пізній вагітності, це малоймовірне пояснення зниження концентрації tHcy у матері на 8 тижні вагітності.

Можна очікувати зниження концентрації tHcy під час вагітності через гемодилюцію. При нормальній вагітності об'єм плазми матері починає збільшуватися при ≈10 тижнів вагітності. Середнє збільшення об’єму плазми на 30–34 тижні становить 50% (17). У цьому випадку зниження концентрації tHcy, яке ми спостерігали у 8 тижнів вагітності, було б незалежним від гемодилюції. Ми використовували зміни гематокриту до і під час вагітності як маркер розвитку гемодилюції. Це лонгітюдне дослідження показало, що індуковане вагітністю зниження концентрації tHcy було значно вищим у значенні процентного зниження, ніж гематокриту, навіть на запущених стадіях вагітності, під час яких гемодилюція була б добре встановлена. Цей ефект спостерігався як у групі, що не отримувала добавок, так і в групі, яка отримувала фолієву кислоту. Ми виявили, що в обох групах, а також у комбінованій досліджуваній популяції зміни концентрації tHcy були обумовлені часом під час вагітності та не були пов'язані зі зменшенням концентрації сироваткового альбуміну.

Крім того, не було значної кореляції між зміною концентрації гематокриту або альбуміну та зміною концентрації tHcy під час вагітності. Якби кореляція була значною, ми змогли б кількісно визначити внесок цих фізіологічних змінних у зменшення концентрації tHcy за допомогою множинного регресійного аналізу. Оскільки кореляції не були значущими, ми не можемо відкинути можливість того, що коливання концентрації tHcy під час вагітності не залежать від зниження концентрації гематокриту та альбуміну, тобто 2 фактори, передбачені для впливу на зниження концентрації tHcy, спричинене вагітністю. Перевага цього лонгітюдного дослідження полягає в тому, що ми змогли індивідуально співвіднести зміни, викликані вагітністю цих змінних. Цей тип аналізу був неможливим у поперечних дослідженнях, в яких аналіз базувався на середніх значеннях з груп, що складаються з різних жінок.

На закінчення, наші дані спростовують попередні гіпотези щодо пов'язаного з вагітністю зниження концентрації tHcy. Зниження концентрації tHcy відбувається за відсутності добавок фолієвої кислоти і не корелює зі зниженням концентрації гематокриту або сироваткового альбуміну. Враховуючи дані літературних джерел про вплив жіночих гормонів на концентрацію tHcy, можливо, що зниження концентрації tHcy під час вагітності в основному відбувається на ендокринній основі.