Вплив обліпихи на фіброз печінки: Клінічне дослідження

Листування доктору Зе-Лі Гао, кафедра гастроентерології лікарні Баоган, Шанхайський другий медичний університет, Шанхай 201900, Китай. moc.anis@ilezg

Анотація

ЦІЛЬ: Оцінити вплив обліпихи (Hippophae rhamnoides) на хворих на цироз печінки.

МЕТОДИ. П’ятдесят хворих на цироз печінки класів А та В ступеня Чайлда-П’ю були випадковим чином розділені на дві групи: Група А як оброблена група (n = 30), що приймали перорально екстракт обліпихи по 15 г 3 рази на день протягом 6 місяців. Група В як контрольна група (n = 18), приймаючи комплекс вітаміну В по одній таблетці, 3 рази на день протягом 6 місяців. Наступні тести проводили до і після лікування в обох групах для визначення LN, HA, колагенів III і IV типів, цитокінів IL-6 і TNFα, альбуміну сироватки печінки, загальної жовчної кислоти, ALT, AST та протромбінового часу.

РЕЗУЛЬТАТИ: Сироваткові рівні TNFα, IL-6, ламініну та колагену IV типу в групі А були значно вищими, ніж у контрольній групі. Після курсу лікування обліпихою рівень ЛН, ГК, колагену III та IV типів загальної жовчної кислоти (ТБК) у сироватці крові значно зменшився порівняно з показниками до та після лікування у контрольній групі. Обліпиха помітно скоротила тривалість нормалізації амінотрансфераз.

ВИСНОВОК: Обліпиха може бути надійним препаратом для профілактики та лікування фіброзу печінки.

ВСТУП

Цироз печінки - це поширене хронічне ураження печінки, спричинене хронічним гепатитом В, споживанням етанолу та порушенням обміну речовин тощо. Пацієнти часто помирають від печінкової недостатності через портальну гіпертензію, кровотечу варикозного розширення стравоходу та шлунка. Недавні дослідження показали, що клітини, що накопичують жир, зараз називаються печінковими зірчастими клітинами (HSC) - це основні клітини, що продукують колаген у фіброзній печінці. Під впливом запальних цитокінів клітини, багаті на вітамін А, активуються, проліферуючи та трансформуючись у міофібробласти, утворюючи позаклітинний матрикс (ECM) [1,2]. Краплі ретиноевої кислоти та рецептори ретиноевої кислоти (RAR) зменшуються. Недавні дослідження також показали, що коли ретинілові ефіри та вміст RAR відновлюються в HSC, HSC залишаться в інактивованому стані. Отже, ГСК розглядаються як терапевтичні цілі для профілактики та лікування фіброзу печінки [3]. У цьому дослідженні обліпиху (Hippophae rhamnoides,) застосовували у хворих на цироз печінки, щоб визначити її вплив на зміни фіброзних показників, поліпшення функції печінки та чи можна її використовувати як терапевтичний антифібротичний засіб.

МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ

Предмети

У цьому дослідженні брали участь 50 пацієнтів у віці 20-70 років, принаймні з підвищенням двох елементів з наступних параметрів: е, г, сироватковий колаген III і IV типів, ламінін (ЛН), гіалуронова кислота (ГК). Ці пацієнти були розділені на проліковану групу (група A, n = 30, 25 цирозу гепатиту B та 5 алкогольних) та контрольну групу (група B n = 20, 17 цирозу гепатиту B та 3 алкогольні). Ці дві групи мали схожі демографічні характеристики. Всі ці пацієнти не приймали жодного антифібротичного препарату, імуномодулятора та противірусних трав протягом останніх 6 місяців. Група А отримувала екстракт обліпихи у дрібних гранулах (виробник Sichuan Pharmaceutical Co.LTD, Китай), 15 г, тричі на день протягом 6 місяців. Група В отримувала вітамін-В комплекс, 2 таблетки один раз, 3 рази на день протягом 6 місяців.

Вимірювання цитокінів, параметрів фіброзу печінки та тестів функції печінки

Цитокіни: IL6 та TNFα вимірювали за допомогою імуноферментного аналізу (ІФА). LN, HA, колаген III та IV типів вимірювали радіоімуноаналізом (RIA). Сироватковий альбумін (Alb), загальний білірубін, аспартатамінотрансфераза (AST), аланінамінотрансфераза (ALT), лужна фосфатаза (ALP), кон’югати, загальна жовчна кислота (TBA), протромбіновий час (PT) вимірювали біохімічним автоаналізатором.

Статистичний аналіз

Таблиця 1

Вимірювання TNFα, IL-6, LN, колаген типу IV (¯x ± s)

Таблиця 2

Нормалізація норм AST, ALT (¯x ± s)

Група	AST (МО/л)		Нормалізація (%)	ALT (МО/л)		Нормалізація (%)
Група	Перед лікуванням	Після лікування		Перед лікуванням	Після лікування	Нормалізація (%)
A	59,87 ± 26,70	49,03 ± 18,99	Нормалізація (%)	24/30 (80) а	50,57 ± 32,47	44,12 ± 26,05	24/30 (80) а
B	154,75 ± 20,21	47,85 ± 23,53	10/18 (56)	41,65 ± 23,54	39,15 ± 16,68	10/18 (56)

Тест рангу Вілкоксона.

Таблиця 4

Зміни TBA, PT, Alb (¯x ± s)

Параметри	Група	Перед лікуванням	Після лікування	Перед лікуванням		До/після лікування		Порівняння двох груп до/після лікування
Параметри	Група	Перед лікуванням	Після лікування	Статистика (Z)	Значення Р	Статистика (т)	Значення Р	Статистика (S)	Значення Р
TBA (нг/л)	A	38,70 ± 27,50	22,83 ± 12,28	189,32	0,0001
B	40,50 ± 34,02	38,55 ± 22,60	0,751	0,743	35,55	0,1922	545,0	0,0003
PT (сек)	A	14,57 ± 0,97	13,50 ± 0,73	7.443	0,0001
B	15,15 ± 0,93	14,40 ± 0,74	4.35	0,048	5.252	0,0001	2.21	0,1415
Альба (г/л)	A	34,07 ± 9,35	35,13 ± 7,13	1.205	0,238
B	27,45 ± 7,41	27,40 ± 6,25	7.02	0,010	0,053	0,958	0,48	0,4887

Підписаний ранг-тест та ранг-тест Вілкоксона.

ОБГОВОРЕННЯ

Обліпиха - рослина, що росте в сильно холодному регіоні Південно-Західного Китаю, її плодовий сік прийняли місцеві монголи та тибетці як загальнозміцнюючий засіб. Він містить велику кількість вітамінів, амінокислот та мікроелементів, корисних для здоров’я людини [4]. Недавні дослідження показали, що обліпиха містить багато попередників вітаміну А, включаючи β-каротин та ненасичені жирні кислоти. Чжао та ін. [5] повідомили, що обліпиха може захистити печінку від пошкодження CCl4. Поєднання противірусного препарату та обліпихи при лікуванні хворих на хронічний гепатит В може скоротити тривалість нормалізації рівня АЛТ у сироватці крові. Швидкість перетворення негативу HBeAg та HBsAg становила 52,16% та 16,67% відповідно [6].

У нормальній печінці HSC в основному беруть участь у накопиченні вітаміну А. Крім того, вони синтезують позаклітинні компоненти матриксу, матрикс, що розкладає металопротеїнази, цитокіни та фактори росту [7,8]. Після гострого або хронічного ураження печінки HSC активуються і проходять процес трансдиференціації, що призводить до міофібробластичного фенотипу. Активовані HSC характеризуються втратою крапель вітаміну А, збільшенням проліферації, вивільненням запальних, профіброгенних та промітогенних цитокінів та міграцією до місць пошкодження із збільшенням вироблення компонентів позаклітинного матриксу та змінами активності матричної протеази та забезпеченням основні потреби відновлення тканин [9]. При гострому або самообмеженому пошкодженні печінки ці зміни є тимчасовими, тоді як у разі постійних травм вони призводять до хронічного запалення з накопиченням позаклітинного матриксу, що призводить до фіброзу печінки та, зрештою, цирозу. Кілька факторів росту та цитокіни беруть участь в активації та проліферації HSC, з них трансформаційний фактор росту β (TGFβ), похідний від тромбоцитів фактор росту (PDGF), TNFα та IL-6 є, мабуть, найбільш важливими [10].

TNFα є не тільки протипухлинним фактором, але також бере участь у процесі імунологічної реакції та запалення. Синтез колагену та деяких позаклітинних матриксів підвищувався у 3 рази та у 2,6 рази відповідно, коли HSC щурів інкубували з TNFα (5,0 нмоль/л) протягом 24 годин [11]. IL-6 - це цитокін, який має безліч біологічних функцій, таких як сприяння проліферації та диференціації клітин, регулюючи імунну функцію. Wang та співавт. [12,13] повідомили про збільшення IL-6 у периферичній крові на ранній тваринній моделі фіброзу печінки, а рівень IL-6 у периферичній крові у хворих на цироз печінки був набагато вищим, ніж у тих, у кого не було [14].

HSC представляють 5% -8% всіх клітин печінки людини. У них тривалі цитоплазматичні відростки, які йдуть паралельно синусоїдальній стінці ендотелію. Гілки другого порядку проростають із відростків і охоплюють синусоїди. Деякі HSC знаходяться в тісному контакті з нервовими закінченнями, деякі з них містять нейропептиди, такі як речовина P, нейропептид Y, соматостатин та пептид, пов'язаний з геном кальцитоніну [15,16].

Наше попереднє дослідження показало [17], що рецептори ретиноевої кислоти (RAR) та цАМФ в основному культивованих HSC були знижені порівняно з тими, що були у свіжовиділених HSC. Вміст RAR та цАМФ у культивованих HSC збільшувались після обробки повністю трансретинової кислотою (10 -5 моль/л).

На основі нещодавніх статей та наших результатів ми можемо зробити висновок, що спочиваючі HSC активуються TNFα та IL-6, що виділяються клітинами Купфера під час гострого або хронічного запалення, тоді TNFα та IL-6, в свою чергу, стимулюють клітини Купфера до вивільнення TGFβ та PDGF. Зрештою, проліферація HSC і синтез ECM, разом із втратою крапель вітаміну А, трансформуються в міофібробласт, що продукує фіброз печінки [18,19].

Це дослідження показало, що обліпиха може знизити сироваткові рівні ламініну, гіалуронової кислоти, TBA, колагену III та IV типів у пацієнтів з цирозом печінки, вказуючи на те, що вона може стримувати синтез колагену та інших компонентів ECM. Ми намагаємось відновити вміст вітаміну А та РАР у HSC, щоб утримати HSC у стані спокою та запобігти прогресуванню фіброзу печінки. Обліпиха може бути надійним препаратом для профілактики та лікування фіброзу печінки, але необхідні подальші добре контрольовані клінічні випробування.