Молекулярна
Ліки
Звіти

  • Журнал Головна
  • Поточне питання
  • Майбутній випуск
  • Найчитаніші
  • Найчастіше цитовані (розміри)
    • Останні два роки
    • Разом
  • Найчастіше цитовані (CrossRef)
    • Минулий рік 0
    • Разом

  • Соц.медіа
    • Минулий місяць
    • Минулий рік
    • Разом
  • Архів
  • Інформація
  • Онлайн подання
  • Інформація для авторів
  • Редагування мови
  • Інформація для рецензентів
  • Редакційна політика
  • Редакційна колегія
  • Цілі та сфера застосування
  • Абстрагування та індексування
  • Бібліографічна інформація
  • Інформація для бібліотекарів
  • Інформація для рекламодавців
  • Передруки та дозволи
  • Зверніться до редактора
  • Загальна інформація
  • Про Спандідос
  • Конференції
  • Вакансії
  • Зв'язок
  • Правила та умови
  • Автори:
    • Димитріс Цукалас
    • Персефоні Фрагкіадакі
    • Анка Оана Доцеа
    • Афанасіос К. Алегакіс
    • Євангелія Саранді
    • Марія Танасула
    • Деметріос А. Спандідос
    • Арістідіс Цацакіс
    • Майя Петрівна Розгонова
    • Даніела Каліна

  • Ця стаття згадується в:

    Анотація

    Вступ

    Метою цього дослідження було перевірити добавки та природні екстракти на їх здатність посилювати активність теломерази в мононуклеарних клітинах периферичної крові людини (PBMC). Ми демонструємо, що рецептура екстракту Centella asiatica (08AGTLF) може призвести до значно вищої активації теломерази порівняно з необробленими клітинами, а також TA-65 та інших добавок, що містять екстракт астрагалу та CAG. Це перше дослідження, принаймні наскільки нам відомо, продемонструвало, що природний склад, такий як екстракт екстракту Centella asiatica (08AGTLF), може призвести до такої високої активності теломерази щодо контрольних клітин.

    потужних

    Матеріали і методи

    Формулювання

    Препарат екстракту Centella asiatica (08AGTLF), який складався з> 95% тритерпенів високої чистоти, був отриманий від компанії ApexBio. Олеанолову кислоту (ОА) отримували з Sigma-Aldrich, а маслінову кислоту (МА) - з екстрасинтезу. Поживні речовини 1 та Поживні речовини 2 (вміст показано нижче) отримані від Lumis Research S.A. Поживні речовини 3 та Поживні речовини 4 (вміст показано нижче) отримані від Natural Doctor S.A. Кожна сполука розчинялася в етанолі для досягнення різних концентрацій, що підлягають випробуванню в клітинних культурах.

    Виділення клітин та вимірювання активності теломерази

    Протокол цього дослідження був затверджений Комітетом з етики пацієнтів та біологічних матеріалів Університету Криту з посиланням No. 63/22.03.2019. Усі процедури, що проводились із залученням людей, проводились відповідно до етичних стандартів Гельсінкської декларації 1964 р. Та її пізніших поправок або порівнянних етичних стандартів. Дослідження проводили з використанням зразків, приготованих від здорових донорів, які зголосились взяти участь у дослідженні. Зразки були анонімізовані, а особисті дані оброблялись відповідно до Загального регламенту захисту даних ЄС (GDPR).

    PBMC, де виділяють із зразків крові методом градієнтного центрифугування Ficoll-Hypaque. Клітини вирощували в DMEM (Biochrom AG; F0455) з додаванням 10% плодової бичачої сироватки (FBS; 10500-064, інактивована теплом; Invitrogen; Thermo Fisher Scientific), глутаміну (4 мМ; Biosera XCT1715), гентаміцину (15710– 049; Invitrogen; Thermo Fisher Scientific) та пеніцилін/стрептоміцин (100 ОД/мл; Biosera LMA4118). До додавання досліджуваних речовин клітини культивували в безсироватковому середовищі протягом 24 год при 37 ° C і 5% CO 2. Потім РВМС обробляли сполуками при різних концентраціях протягом 24–72 год. Зразки PBMC збирали через 24–72 год після обробки, промивали в буфері PBS і зберігали при -80 ° C. Активність теломерази вимірювали, використовуючи комерційну теломеразну ПЛР-ІФА (Sigma-Aldrich), на основі протоколу посилення теломерних повторів, як описано раніше (27–30). Всі процедури для кожного стану проводили у трьох примірниках.

    Зміст поживних речовин 1, 2, 3 та 4

    Поживна речовина 1 (My Shape) містила наступне: альфа-ліпоєва кислота, кориця) сухий екстракт кори 1/4 (Cinnamomum zeylanycum N.), цитрат магнію, L-глутамін, L-карнітин тартрат, цитрат калію, аскорбінова кислота, аскорбат магнію, зелений чай (Camellia sinensis K.) залишає сухий екстракт, титруваний до 95% поліфенолів, природний вітамін Е ацетат 50%, ензимікс (амілаза, протеаза, глюкоза амілаза, ліпаза, целюлаза, лактаза, пектиназа), ніацин, бітамін В1, вітамін К2 Мена Q7 0,2%, селен метіонін, вітамін В2, β-каротин, вітамін В5, холін бітартрат, інозит, пара-амінобензойна кислота (PABA), вітамін В6, вітамін В12 1%, піколінат хрому, вітамін D3 2,5%, біотин, фолієва кислота, засіб проти злежування (целюлоза, моно- та дигліцериди жирних кислот, стеарат магнію, діоксид кремнію).

    Поживна речовина 2 (My Health) містила наступне: змішати вітамін (аскорбінова кислота, вітамін Е ацетат 50% натуральний, ніацин, вітамін B1, вітамін K2 Mena Q7 0,2%, вітамін B6, β-каротин, вітамін B12 1%), анти- конденсатори (мікрокристалічна целюлоза, моно- та дигліцериди жирних кислот, стеарат магнію, діоксид кремнію).

    Поживна речовина 3 (кофактори Vit. D3 & K2, 1 капсула) містила: 2000 OH 25 D 3, 100 мкг вітаміну K2 (MK7), 56 мг елементарного магнію у вигляді бісгліцинату магнію.

    Поживна речовина 4 (REYOUTH, 1 капсула) містила: вітамін С (50 мг), магній (58 мг), CAG (16 мг) та амінокислотні суміші, що містять L-глутамін, L-лізин, L-пролін, L- гліцин, L-аргінін, L-лейцин, L-гістидин, L-ізолейцин, L-валін, L-метіонін, L-тирозин, глутамінова кислота, L-фенілаланін, L-серин, L-треонін, L-аланін, L -цитрулін, L-таурин, L-триптофан, аспарагінова кислота, вітамін Е (12 мг), кальцій, вітамін В3, сухий екстракт броколі, сухий екстракт фруктів і овочів, суміш травних ферментів (Ензимікс), калій, вітамін В1, цинк, Вітамін B6, марганець, фосфор, B-каротин, вітамін B5, інозитол, вітамін K2, вітамін B2, PABA, вітамін D3, біотин, хром, мідь, селен, молібден, вітамін B12.

    TA-65 (1 капсула) містив: екстракт астрагалу мембранацеусу моєвого (TA-65 ® MD, 8 мг).

    Статистичний аналіз

    Фігура 1.

    Таблиця I.

    Концентрації в мкг/мл усіх композицій та сполук, що використовуються для вимірювання активності теломерази в PBMC.

    Таблиця I.

    Концентрації в мкг/мл усіх композицій та сполук, що використовуються для вимірювання активності теломерази в PBMC.

    Концентрація поживних речовин (мкг/мл)
    Поживна речовина 1 20, 120, 600
    Поживна речовина 2 10, 60, 330
    Поживні речовини 3 4, 20, 100
    Поживна речовина 4 12,8, 25, 51
    08AGTLF 0,02, 0,2, 2
    ТА-65 0,16, 0,32, 0,64
    OA 1, 5, 10
    Магістр 1, 5, 10

    [i] PBMC, мононуклеари периферичної крові; 08AGTLF, Centella asiatica рецептура екстракту; МА, маслінова кислота; OA, олеанолова кислота.

    Рівні активності теломерази зростали з усіма 3 концентраціями, використаними для поживного речовини 4, порівняно з необробленими клітинами (до 4,3-кратного збільшення) з найвищою активацією при концентрації 12,8 мкг/мл (абсорбція 0,38; 95% ДІ, 0,311–0,456) і дотримувався дещо знижуваного малюнка при концентраціях 25 та 51 мкг/мл (95% ДІ, 0,321-0,426 та 0,320-0,414 відповідно). Крім того, різниця в активності теломерази щодо необроблених клітин була статистично значущою (Р 0,05).

    Малюнок 2.

    Малюнок 3.

    Композиції, що включали екстракт астрагалу з різними складами (наприклад, Поживна речовина 4 і ТА-65), також виявляли статистично значущий вплив на активність теломерази, але набагато нижчий у порівнянні з 08AGTLF, досягаючи 4,3-кратного збільшення поживної речовини 4 та 2-кратного збільшення ТА- 65 відносно необроблених клітин. Погоджуючись з нашими результатами, Molgora та співавт. Продемонстрували, що TA-65, що містить CAG, алгікон астрагалозиду IV, підвищує активність теломерази значно у 1,3-3,3 рази порівняно з контролем у культурах Т-клітин людини. Так само було показано, що CAG активує теломеразу як in vitro, так і in vivo (22). Зокрема, було показано, що CAG активізує теломеразу та подовжує теломери залежно від теломерази in vitro і зменшує відсоток критично коротких теломер та пошкодження ДНК у клітині (35).

    Примітно, що поживна речовина 4, суміш поживних речовин, яка містить CAG екстракту астрагалу, виявила більш високий вплив на активність теломерази порівняно з TA-65 (збільшення в 4,3 рази), що свідчить про синергетичний ефект екстракту астрагалу з іншими поживними речовинами, що містяться в поживному речовині 4. У недавньому дослідженні, проведеному Бруно та співавт., Автори досліджували вплив полівітамінної добавки на довжину теломер, і вони припустили, що активація теломерази, опосередкована цим добавкою, призводить до збільшення довжини теломер (36).

    Існує безліч досліджень, які пов’язують нутрицевтичні добавки з активністю теломерази, довжиною теломер та окислювальним стресом, і слід зазначити, що натуральні продукти, що містять більше одного антиоксиданту, ефективніші, ніж введення одного, що свідчить про синергетичний ефект серед цих сполук ( 43,44). У цьому дослідженні ми протестували Nutrient 1 і Nutrient 2, які складаються з суміші вітамінів та антиоксидантів, і виявили, що ці добавки викликають незначне підвищення активності теломерази. Погоджуючись з цим, Balcerczyk та співавт. Вивчали вплив дієтичної добавки на параметри, пов'язані з окислювально-відновним гомеостазом та старінням, і виявили, що активність теломерази в PBMC у здорових жінок зросла> 25% (45). Дивно, але поживна речовина 3, яка містить вітамін D, призвела до значно вищого збільшення активності теломерази (приблизно в 2 рази) порівняно з необробленими клітинами. Цей висновок відповідає тому факту, що добавки вітаміну D суттєво збільшували активність теломерази PBMC у афроамериканців із надмірною вагою, як показали Zhu et al, припускаючи, що вітамін D може покращити підтримку теломер, а також запобігти старінню клітин та індукованому ожирінням прискоренню клітинне старіння (46).

    На закінчення, згідно з нашою моделлю in vitro, збільшення активності теломерази від 2 до 9 складок порівняно з необробленими клітинами спостерігалося з нашими досліджуваними молекулами. Важливо, що препарат 08AGTL, що містить екстракт Centella asiatica, був найпотужнішим активатором серед інших комерційно доступних добавок, що спричинило майже 9-кратне збільшення активності теломерази при 0,02 мкг/мл. Більше того, ефективність 08AGTL у збільшенні активності теломерази була очевидною при переведенні в активацію теломерази щодо позитивного контролю, оскільки вона досягла 17,3% активності теломерази позитивного контролю, що значно вищий відсоток, ніж решта досліджуваних сполук (рис. . 3). Метою цього дослідження було виявити природні сполуки, які значно збільшують активацію теломерази і можуть призвести до збільшення тривалості життя та здорового старіння. 08AGTLF, що містить екстракт Centella asiatica, здається, є такою природною сполукою з сильним впливом на активність теломерази, що залишається підтвердженою майбутніми дослідженнями на основі незалежних рандомізованих контрольованих досліджень, що вивчають основні механізми. Важливо, що майбутні дослідження втручання на людях є обов’язковими для вивчення їх впливу на довжину теломер, старіння та здоров’я людини.

    Подяки

    Дослідження є частиною спеціальної частини доктора філософії. дисертація з Університету медицини та фармації в Крайові. Автори висловлюють подяку всьому адміністративному, технічному та медичному персоналу Toxplus S.A., Медичної клініки метаболомічної медицини S.A. та Лабораторії токсикології за їх віддану участь у цьому дослідженні.

    Фінансування

    Це дослідження фінансувалося Metabolomic Medicine S.A. та Toxplus S.A. та за підтримки Спеціального дослідницького рахунку Університету Криту (ELKE № 4602, 4920 та 3963).

    Наявність даних та матеріалів

    Набори даних, представлені в цьому дослідженні, доступні у відповідного автора за обґрунтованим запитом.

    Внески авторів

    DT, PF, AT, DAS і DC задумали та спроектували дослідження та написали рукопис. MT, PF, MPR та ES проводили обробку даних та оцінку контролю якості. AKA, AOD та MT проводили статистичний аналіз та інтерпретацію даних. Усі автори переглянули та схвалили рукопис перед поданням.

    Схвалення етики та згода на участь

    Протокол цього дослідження був затверджений Комітетом з етики пацієнтів та біологічних матеріалів Університету Криту з посиланням на номер 63/22.03.2019. Біологічний матеріал та інформацію пацієнтів отримували за письмовою інформованою згодою відповідно до Загального регламенту ЄС про захист даних (GDPR). Усі процедури, проведені в дослідженнях із участю людей, відповідали етичним стандартам згідно з Гельсінкською декларацією 1964 року та її пізнішими поправками, або порівнянними етичними стандартами.