Розробка ортотопічних моделей мишей з пухлиною підшлункової залози

Анотація

Створено генно-інженерні моделі мишей раку підшлункової залози, які рекапітулюють пухлину підшлункової залози людини. Однак витрати, пов'язані з виробництвом та утриманням цих мишей, можуть бути надмірними. Латентність пухлини та прогресування до інвазивних захворювань у цих моделях також сильно варіюються. Моделі мишей ксенотрансплантата раку підшлункової залози людини, включаючи гетеротопічні та ортотопічні, широко використовуються в доклінічних дослідженнях завдяки порівняно низькій вартості та швидкому, передбачуваному зростанню пухлини. З двох, ортотопічні моделі пухлинних мишей є кращими, оскільки вони пропонують тканинну специфічну патологію, дозволяють проводити дослідження метастазів і, як правило, вважаються більш клінічно значущими. Тут ми описуємо процедури імплантації клітинних ліній раку для створення ортотопічних моделей миші для раку підшлункової залози.

розробка

1. Вступ

Рак підшлункової залози є четвертою причиною смерті від раку в розвинених країнах, включаючи США. Захворювання має найгірший прогноз щодо злоякісних захворювань шлунково-кишкового тракту із загальним рівнем виживання 5 років менше 5%. На жаль, цей низький рівень виживання не покращився за останні десятиліття, хоча був досягнутий значний прогрес у розумінні молекулярної генетики канцерогенезу підшлункової залози людини (1). Тому пошук біомаркерів раннього виявлення та нових цільових генів та розробка нових терапевтичних стратегій для цієї хвороби все ще є нагальним попитом. Моделі мишей раку підшлункової залози, включаючи генетично модифіковані моделі мишей та моделі мишей пухлинного ксенотрансплантата, виявились дуже корисними для просування цих напрямків досліджень раку (2–5).

Імунодефіцитні мишачі моделі ортотопічної імплантації не повністю повторюють процес природного пухлинного розвитку у людини через відсутність порівнянного мікросередовища пухлини. Загальновизнано, що імунні клітини господаря в мікросередовищі пухлини відіграють важливу роль у прогресуванні та метастазуванні пухлини підшлункової залози. Однак ксенотрансплантація ракових клітин людини безпосередньо в імунокомпетентного мишачого господаря призведе лише до відторгнення трансплантата. Нещодавно було затверджено кілька моделей генно-інженерних мишей, які рекапітулюють весь спектр туморогенезу підшлункової залози у людини (2, 3, 8). Інвазивні пухлини підшлункової залози з цих моделей мишей можуть бути хорошим джерелом для генерації сингенних ортотопічних моделей підшлункової залози у імунокомпетентного господаря миші (9). Синтенічні ортотопічні моделі підшлункової миші охоплюють як переваги ортотопічних моделей мишей, так і генно-інженерних моделей мишей, і є дешевшою альтернативою моделям генно-інженерних мишей. Тут ми зосереджуємось на процедурах хірургічного генерування ортотопічних моделей мишей з раком підшлункової залози з використанням клітинних ліній раку.

2. Матеріали

2.1. Реагенти

RPMI-1640 або DMEM середовище для культури клітин пухлини.