Очищення перманганатом калію є ефективним санітарним методом зниження біологічного навантаження на сировину Coriandrum sativum

Супрам Хосуру Субраманія

1 Маніпальський коледж медичних наук, Покхара, Непал

Васудха Пай

2 Мелака Маніпал Медичний коледж, Університет Маніпал, Удупі, Індія

Індіра Бейрі

2 Мелака Маніпал Медичний коледж, Університет Маніпал, Удупі, Індія

Ніранджан Наяк

1 Маніпальський коледж медичних наук, Покхара, Непал

Шишир Гокхале

1 Маніпальський коледж медичних наук, Покхара, Непал

Бріеш Сатіан

1 Маніпальський коледж медичних наук, Покхара, Непал

Пов’язані дані

Набори даних, використані та/або проаналізовані під час поточного дослідження, доступні у відповідного автора за обґрунтованим запитом.

Анотація

Об’єктивна

Сирі овочі, включаючи квіти, листя, стебла та коріння, є важливими носіями збудників харчових продуктів. Ми оцінили бактеріологічне забруднення немитих листя коріандру та ефективність очищення 0,1% розчином перманганату калію як метод знезараження.

Результати

Значне бактеріальне забруднення, включаючи такі патогени, як сальмонели та види Aeromonas, було виділено з немитих листя коріандру. Дезактивація 0,1% перманганатом калію виявилася більш ефективною, ніж промивання стерильною водою в три етапи.

Вступ

Спалахи харчових захворювань у всьому світі збільшуються, листові зелені - добре відомі потенційні джерела бактеріальних інфекцій, що передаються їжею [1]. Безпека харчових продуктів має серйозні наслідки для здоров'я людини. Вживання свіжих, необроблених або частково приготовлених овочів відіграє важливу роль у спалахах інфекцій, що передаються через їжу [2, 3]. Безпека споживання листяних зелених овочів стає проблемою, що зростає, особливо в країнах, що розвиваються. Вони можуть забруднитися під час вирощування, транспортування та зберігання [2–4]. Нещодавній звіт засідання ФАО/ВООЗ 2007 року містив огляд патогенів, які найчастіше асоціюються зі свіжими фруктами та овочами (http://www.who.int/foodsafety). Свіжі овочі та зелень були сприйняті як транспортні засоби для передачі харчових мікробних інфекцій у всьому світі [3]. Спалах токсину шиги, що продукує кишкову паличку, спричинений споживанням листових овочів, спричинив майже 200 лабораторно підтверджених захворювань, 100 госпіталізацій та кілька смертей у США у 2006 році [5]. Хоча листові овочі є важливою частиною здорового харчування, споживання сирих забруднених смакових речовин є основною проблемою.

Основний текст

Матеріали і методи

Всього було придбано 35 пачок листя коріандру у 35 продавців, розміщених на 17 різних овочевих ринках, розташованих по всьому місту Удупі, Індія. Зразки збирали протягом двадцяти відвідувань продавців протягом півтора місяців у період з лютого по березень 2016 року. Зразки збирали у попередньо стерилізовані поліетиленові пакети та транспортували з мінімальною затримкою до мікробіологічної лабораторії. Коріння зразка обрізали асептично, а листя та частини стебла подрібнювали стерильними ножицями. Потім подрібнені листя аликвотировали на 3 порції А, В і С, кожна вагою приблизно 25–30 г. Вони оброблялись окремо.

Частину подрібненого листя інокулювали у відвар селеніту F (приблизно 20-25 об.%) Та інкубували при 37 ° C протягом 6 год для збагачення фекальних збудників, таких як сальмонели та види шигел [8]. Петлю бульйону селеніту F перевирощували на агарі ксилози-лізиндезоксихолату та досліджували через 14–18 год інкубації при 37 ° С. Колонії, що передбачають види сальмонел або видів шигел, були додатково вивчені та охарактеризовані морфологічно та біохімічно за допомогою автоматизованої системи VITEK [8].

Порцію B зразків аналізували кількісно для загальної кількості шляхом додавання 50 мл стерильної дистильованої води та ручного струшування протягом 3 хв, приблизно 20 струсів на хвилину. Зміст (вода) піддавали послідовному десятикратному розведенню (1: 10–1: 10000 у стерильній пептоновій воді) і 0,01 мл об'єму чистого і кожного розведення посіяли на агарові планшети MacConkey для визначення КУО/мл зразок. Процес промивання повторювали три рази, і вміст води інокулювали подібним чином. Всі пластини інокулювали при 37 ° С протягом 18–24 год. Загальний бактеріологічний показник відзначався під час кожного процесу промивання. Різні морфотипи бактерій були додатково ідентифіковані за допомогою стандартних біохімічних реакцій [8].

Порцію C занурювали в 0,1% розчин перманганату калію (KMnO4) з ручним струшуванням приблизно 20 струсів на хвилину, забезпечуючи загальний час контакту 10 хвилин при кімнатній температурі. Розчин зливали, а до листя додавали свіжу стерильну дистильовану воду і зливали для видалення слідів KMnO4. Наповнену прісну воду енергійно струшували і використовували для визначення кількості колоній, застосувавши ту ж процедуру, що була згадана вище для порції В. Всі експерименти проводились у двох примірниках і при кімнатній температурі приблизно 23 ° C.

Аналіз даних

Отримані дані були проаналізовані за допомогою програмного забезпечення IBM SPSS Statistics 20 від IBM Corporation, Armonk, Нью-Йорк, США. 95% довірчий інтервал, що використовується для узагальнення всіх середніх показників. Підрахунок життєздатності нормалізували шляхом перетворення журналу перед застосуванням t-тесту для порівняння з базовим рядком. значення р 7 КУО/мл (7,2 log10 КУО/мл). У всіх зразках були виявлені коліформні грамнегативні палички. Непередбачений випадок у таблиці 1 показує кількість та відсоток ізоляції різних бактерій. Потенційний збудник Aeromonas spp. були виявлені в 6 (17%) зразках. З 95% (33/35) зразків було виділено два або більше двох типів бактерій. Етапи промивання порції B водою виявили середнє зменшення життєздатного бактеріального навантаження на 1,2 log під час першого промивання з подальшим зменшенням 1,9 log після другого промивання та 3,4 зменшення журналу після третього промивання. Порівняно з висновками порції B, життєздатність кількості порції C (промивання KMnO4) зменшилась на 4,1 log. Зменшення біологічного навантаження на кожному етапі промивання водою та одноразове знезараження перманганатом калію показано на рис. 1 .

Таблиця 1

Бактерії, виділені з листя коріандру різних зразків (порція B)

Зразок No Бактерії Кількість бактеріальних ізолятів (%)
N = 35

1	Salmonella spp.	1 (2,85)
2	Klebsiella spp.	22 (62,85)
3	Enterobacter spp.	21 (60)
4	кишкова паличка	12 (34,28)
5	Citrobacter spp.	8 (22,85)
6	Providencia spp.	2 (5,71)
7	Morganella spp.	1 (2,87)
8	Serratia spp.	3 (8,57)
9	Pseudomonas spp.	4 (11,42)
10	Aeromonas spp.	6 (17,14)
11	Неферментатори	8 (22,85)
12	Staphylococcus spp.	4 (11,42)

Життєздатний бактеріальний вміст листя коріандру після стерильної води та промивання KMnO4

Обговорення

У цьому дослідженні Pseudomonas aeruginosa, Providenia spp., Morganella spp. та Serretia spp. були виявлені серед 11,42, 5,71, 2,87 та 8,57% зразка відповідно. Майкл та ін. [14] також повідомляв про ці організми в сирих овочах. Синьогнійна паличка, звичайний природний мешканець ґрунту, може забруднювати овочі. Морганела та Провіденсія, які є частиною нормальної флори шлунково-кишкового тракту людини та тварин, можуть забруднювати грунт через дефекацію відкритого поля. Ці умовно-патогенні мікроорганізми можуть спричинити септицемію у людей із ослабленим імунітетом. Тому увагу слід зосередити на переробці, зберіганні та транспортуванні їжі, щоб усунути потенційні патогени.

Миття листяних овочів водою, яке повинно вимити мікроорганізми, вважається задовільним методом знезараження в побуті. Але на цей метод впливають різні фактори, такі як наявність достатньої кількості чистої води та вихідне біозавантаження на продукти харчування. Показано, що промивання водою кілька разів значно зменшує біонавантаження [7], лише коли етапи промивання багаторазові, жорсткі та енергійні. У цьому дослідженні, а також у подібному дослідженні, проведеному раніше [6], для початкового етапу промивання використовували стерильну дистильовану воду, що може здатися не ідеальною технікою, оскільки це може пошкодити бактеріальні клітини. Однак таке первинне вплив стерильної дистильованої води протягом дуже обмеженого періоду часу не могло не вплинути на якість результату.

Багато дослідників працювали над ефективністю різних дезінфікуючих засобів та знезаражувачів, таких як розчини NaCl, оцет, суміш солі та оцту, пральний порошок, побутові відбілювачі, йод, тринатрійфосфат тощо у різних концентраціях та з різним часом контакту, але жоден з них не міг повністю усунути популяції фекальних коліформ з овочів та фруктів [9].

З доступних методів знезараження листової зелені хлорування було ефективним, але це впливає на структурну цілісність листя. Ефективність звичайного відбілювача є змінною та ненадійною. Гамма-опромінення з низькими дозами було ще одним методом, який ефективно зменшував мікробне навантаження, зберігаючи якість листяних овочів, що вживаються в сирому вигляді [15].

Відомо, що розчин перманганату калію зменшує кількість патогенних бактерій та паразитів на свіжих овочах та фруктах [7, 16, 17]. У цьому дослідженні ми спостерігали, що життєздатне бактеріальне навантаження на кінзу значно зменшилося промиванням KMnO4.

KMnO4 у низьких концентраціях часто використовується як антисептик для промивання порожнини рота для підтримки гігієни порожнини рота, а також як засіб для очищення колодязної води, що використовується для пиття. Згідно з останніми вказівками ВООЗ, KMnO4 у концентрації до 1: 10 000 може бути безпечним для місцевого застосування на відкритих ранах [18, 19], причому летальний ефект був далеко один від одного, що відповідає дозі до 10 г [20]. Таким чином, миття їстівних предметів з дуже низькою концентрацією (0,1%) розчину KMnO4 з подальшим промиванням простою водою може не мати негативного впливу на здоров'я людини.

Роль освіти, навчання та обізнаності серед виробників, обробників та споживачів є важливою для підвищення безпеки продукції. Миття овочів перед споживанням є важливим підходом для зменшення ризику для здоров'я. Це дослідження показало, що листя коріандру мають високу бактеріальну контамінацію, включаючи такі патогени, як Salmonella spp., Aeromonas spp. та E coli. Ефект знезараження розчину перманганату калію на листках виявився кращим, ніж три етапи промивання звичайною водою. Вплив розчину KMnO4 на здоров'я людини та смак або аромат листя в цій роботі не вивчався; це наголошувало на необхідності подальших досліджень у певних областях для сприяння ефективному санітарному методу.

Висновок

Поточна робота підкреслює різноманітність бактерій та навантаження на сире листя коріандру. Розчин перманганату калію в концентрації 0,1% протягом мінімум 10 хвилин часу контакту виявився ефективним і простим методом, що дозволяє значно зменшити бактеріальне навантаження. Це можна використовувати як альтернативу чи в поєднанні з промиванням простою водою. Наскільки нам відомо, це перше в історії дослідження, що демонструє ефективність розчину перманганату калію як миючого засобу для кінзи.

Обмеження

У цьому дослідженні беруть участь лише культивовані бактерії in vitro. Бактеріальні ізоляти додатково не характеризували щодо властивостей вірулентності або стійкості до лікарських засобів. Ефективність промивання KMnO4 тестували на одну концентрацію та час контакту.

Внески авторів

SHS задумав і спроектував дослідження, зібрав зразки, обробив зразок, проаналізував дані та написав рукопис. В.П. сприяв збору та обробці зразків та аналізу даних. І. Б. сприяв написанню рукописів та критичній оцінці рукопису. «НН» та «СГ» зробили внесок у дистиляцію результатів, обговорення та підготовку рукописів. БС зробив внесок у статистичний аналіз. Усі автори прочитали та схвалили остаточний рукопис.

Подяки

Автори вдячні викладачам та технічним працівникам, кафедрі мікробіології Маніпальського університету, Індія та Навчальній лікарні Маніпалу, Непал, за технічну підтримку. Ми висловлюємо нашу особливу подяку доктору Вандані К.Є., професору мікробіології, Медичний коледж Кастурби, Університет Маніпал, Індія, за незабутню підтримку.

Конкуруючі інтереси

Автори заявляють, що у них немає конкуруючих інтересів.

Наявність даних та матеріалів

Згода на публікацію

Схвалення етики та згода на участь

Пропозиція дослідження була схвалена Комітетом інституційної етики Медичного коледжу Кастурби, Маніпал, Індія.

Фінансування

Автори не отримали жодного фінансування від жодної установи для підтримки роботи, представленої в цьому поданні.

Примітка видавця

Springer Nature залишається нейтральним щодо юрисдикційних вимог в опублікованих картах та інституційних приналежностей.