Кломіфен цитрат - антиестрогенний препарат із нестероїдною структурою

Документи

Розшифровка кломіфен-цитрату - антиестрогенний препарат із нестероїдною структурою

КЛОМІФЕНОВИЙ ЦИТРАТ - АНТИЕСТРОГЕННИЙ ПРЕПАРАТ З А

Г. С. Гриненко, Є. М. Долгінова, Г. М. Кадацький, С. С. Ліберман

Нестероїдні препарати, що мають антиестрогенну дію, викликають великий інтерес у клініцистів. Розширення сфери клінічного застосування синтетичних нестероїдних антиестрогенів має наукове, а також практичне значення, оскільки використання антиестрогенів у дослідницьких цілях сприяє інтерпретації дії естрогенів на клітинному та молекулярному рівнях [i0, Ii, 26].

За своєю хімічною структурою нестероїдні антиестрогени групуються серед триарилалканових або триарилалкенових ефірів. Серед них найбільш відомими є препарати двох груп: похідні трифенілетилен або похідні дифеніл- (дигідро- або тетрагідро) нафталіну. При вивченні взаємозв'язку між хімічною структурою та біологічною активністю сполук, що належать до цих груп, було підтверджено, що їх антиестрогенна активність обумовлена наявністю бічного ланцюга аміноефіру у фенольної гідроксильної групи. Структура бічного ланцюга визначає швидкість зв'язування антиестрогену з відповідними рецепторами. Видалення бічного ланцюга призводить до високої естрогенної активності. Агоністичні та антагоністичні властивості антиестрогенів визначаються також стеричною конфігурацією їх молекул [6, 7].

До синтетичних нестероїдних антиестрогенних похідних трифенілетилену, які набули широкого застосування в медичній практиці, належать кломіфен цитрат (синоніми: ардомон, динерік, кломівід, кломід, клостилбегіт, оміфін, проліфен, хлораміфен та ін.)

Перші дослідження трифенилетиленів були проведені в тридцятих роках, коли з'явилися повідомлення про естрогенну активність деяких сполук цієї серії [25], включаючи хлоротріазізен (синоніми: хлоротризин, таїс та ін.), Л, л, 2-трианізил -2-хлоретилен, який за тривалістю дії перевершував відомі на той час естрогени і використовувався для лікування раку простати [21].

Кломіфен цитрат, отриманий в результаті подальших досліджень похідних трифенилетилену [18], є дигідроцитратом суміші цис- та транс-ізомерів 1-хлор-2- [4- (2-диетиламіноетокси) феніл] -l, 2- дифенілетилен. * Слабка естроген-подібна дія обумовлена цис-формою кломіфен-цитрату. Транс-форма має виражену антиестрогенну активність [7].

Кломіфен цитрат змінює фізіологічну дію естрогенів і впливає на тканини різних органів, чутливих до естрогенів (матки, піхви, молочних залоз, гіпоталамо-гіпофізарної системи тощо) [6, 14]. Однак точний механізм його дії, як і інших антиестрогенів, ще не з’ясований до кінця. Зрозуміло, що дуже важливим фактором, що обумовлює прояв активності кломіфен-цитрату, є конкуруючий антагонізм щодо цитоплазматичних рецепторів естрогенів (CR), що призводить до зменшення утворення рецепторних комплексів естрогену, в результаті чого біохімічна та фізіологічна реакція клітини на дію естрогену стає слабшою [19]. Цей ефект є оборотним і може бути повним або частковим. В експериментах in vitro було встановлено, що коли зв’язано більше 50% CR, утворений комплекс переноситься в ядро клітини [29]. На відміну від естрогенів, антиестрогени не стимулюють синтез ДНК і проліферацію клітинних елементів. Можливо, що антиестрогенна активність також пов'язана зі зменшенням інтенсивності виконання КР

Виграти в США окремі цис- та транс-ізомери цитрату кломіфену також продаються під назвою "цикломіфен" та "енкломіфен" відповідно.

Всесоюзний хімічний фармацевтичний інститут ім. С. Орджонікідзе, Москва. Хіміко-фармацевтичний журнал, вип. 23, No i, с. 118-123, січень, стаття, подана 17 липня 1987 р.

Переклад з 1989 р. Оригінал

0091-150X/89/2301-0075512.50 9 1989 Видавнича корпорація Пленум 75

в результаті зменшення швидкості дисоціації антиестроген-рецепторного комплексу та зменшення синтезу нових рецепторів [27].

Дія кломіфен цитрату залежить від початкового вмісту естрогенів в організмі. На низькому рівні він дає помірний естрогенний ефект, а при високому естрогенному насиченні проявляє виражену антиестрогенну активність.

У медичній практиці кломіфен цитрат застосовується головним чином при ановуляторній дисфункції яєчників та пов’язаній з цим патології, включаючи ендокринне безпліддя [i, 4, i0, 14, 28, 30], а також при деяких формах олігоспермії у чоловіків [24 ].

Виникнення овуляції під час лікування кломіфеном цитратом пояснюється його впливом на КР в області гіпоталамусу, що призводить до посилення елімінації люлюберину та посилення секреції лютеїнізуючих та фолікулостимулюючих гормонів аденогіпофізом, а також як безпосередньою стимуляцією утворення естрогенів в яєчниках. Є вказівки на те, що ефективність кломіфен-цитрату залежить від початкового рівня естрогену, і його дія незначна у пацієнтів з екскрецією естрогену нижче i0

г/добу. Ефективність лікування збільшується при поєднанні кломіфен-цитрату та горіонічного гонадотропіну, а також з деякими естрогенами [2, 3, 14, 27, 28].

Кломіфен цитрат також застосовується під час дисфункціональних внутрішньоутробних крововиливів, андрогенної недостатності та олігоспермії у чоловіків [5, 23], для встановлення диференційно-діагностичного тесту під час визначення функціонального стану гіпоталамо-гіпофізарно-яєчникової системи [8, 17 ] та при раку молочної залози [9, 13, 20]. Передбачається, що протипухлинна дія кломіфен цитрату пов’язана не тільки з його антиестрогенною активністю та зниженням концентрації естрогенних рецепторів, внаслідок чого пухлина втрачає чутливість до естрогенних подразників, а й із селективним токсичним ефектом на пухлинні клітини [6].

Спосіб отримання кломіфен-цитрату запатентований "Merrell" [16].

Реакція похідного натрію 4-гідроксибензофенону з діетиламіноетилхлоридом з подальшою реакцією Гриньяра з бензилмагнію хлоридом призводить до отримання 1,2-ди-феніл-1- (4-діетиламіноетоксифеніл) етанолу (i). Останній піддають зневодненню та хлоруванню, завдяки чому отримують основу кломіфену, яка звичайним способом перетворюється на цитрат кломіфену. Використовуючи N-хлорсукцинімід для введення хлору, загальний вихід кломіфенцитрату на основі сполуки 1 становить 11% від теоретичного, або становить 30% під час хлорування розчином хлору. Введення діетиламіноетокси-групи на початкових стадіях синтезу значно перешкоджає перебігу реакцій дегідратації та хлорування та призводить до зменшення виходу бажаного кінцевого продукту, спричиняючи кілька побічних процесів [23].

Відомий також спосіб отримання кломіфен-фенолу через проміжний продукт 1,2-дифеніл-1- (4-гідроксифеніл) -етанол (II), утворений реакцією Гриньяра з 4-гідроксибензофенону та бензилмагнію хлориду, але використання сполуки з фенольним гідроксилом у цій реакції вимагає великого надлишку бензилхлориду магнію, що технічно недоцільно. Таким чином, кількість побічних продуктів дибензильного типу, отриманих під час конденсації, збільшується, що призводить до зменшення виходу сполуки II [15].

Таким чином, методи, описані в літературі для отримання кломіфен-цитрату, потребують вдосконалення.

У Всесоюзному науково-дослідному хіміко-фармацевтичному інституті (ВНИХФІ) кломіфен цитрат готували новим методом, який був прийнятий хімічним фармацевтичним концерном "Акрихін".

На відміну від відомих схем, на початковому етапі синтезу для захисту фенольного гідроксилу використовували метильну групу, що дозволило значно збільшити врожайність на стадіях конденсації, дегідратації та хлорування Гриньяра. Препарат отримували із загальним виходом 45% від теоретичного на основі 1,2-дифеніл-1- (4-метоксифеніл) етанолу. За своїми фізико-хімічними та біологічними властивостями кломіфен цитрат, отриманий методом ВНИХФІ, не відрізнявся від іноземного зразка. Він має форму білого або кремового відтінку білого кристалічного порошку без запаху, який розчинний у метанолі, слабо розчинний у 95% етанолі та дуже важко розчинний у воді та хлороформі. Наявність смуг поглинання в ІЧ-спектрі при 1605, 1570, 1505 та 750 см-1 (aro-

матова система типу стильбена); 1245 см-I (арилалкильний ефір), 3400 см-I (група OH цитрат-іона) характерна для цитрату кломіфену.

Поглинання в [IV області за рахунок системи стильбену визначає характерну форму УФ-спектру цимітрату кломіфену, який містить два максимуми в області 235 3 і 296 3 нм і два мінімуми при 223 2 і 269 2 нм (розчин в метанолі або етанолі). УФ-спектри окремих цис- та транс-ізомерів суттєво відрізняються між собою положенням максимуму поглинання та величиною екстинкції; для транс-ізомеру спостерігається зсув положення максимуму до довгохвильової області.

Відповідно до фармацевтичних норм вміст транс-ізомеру в препараті становить від 50 до 70%. Для визначення співвідношення ізомерів використовують ІК, УФ та ПМР-спектроскопію, а також рідинну та газорідинну хроматографію [31].

У дослідженні гормональної активності кломіфен-цитру радянського виробництва