Карцинома підшлункової залози у африканської кігтячої жаби (Xenopus laevis)

Адам Ш Стерн

1 Ветеринарна діагностична лабораторія

Сара О Елісон

2 Відділ тваринних ресурсів, штат Іллінойс, і

Керолайн Чу

3 Кафедра патобіології, Університет Іллінойсу, Урбана, штат Іллінойс

Анотація

У цьому звіті описуються гістологічні особливості раку підшлункової залози у дорослої самки африканської кігтячої жаби (Xenopus laevis). Було виявлено, що тварина перебуває у поганому стані тіла, а згодом евтаназована для повного розтину. Гістологічно підшлункова залоза була знищена пакетами багатогранних клітин, що відповідають раку острівцевих клітин підшлункової залози. Метастатичної хвороби не виявлено. Пухлини підшлункової залози рідкісні у земноводних, і цей звіт є першим, що описує карциному підшлункової залози у африканської жабі з кігтями.

Африканська кігтяста жаба (Xenopus laevis) - один із найбільш часто використовуваних видів жаб у світі в біології розвитку, клітинній біології, токсикології та неврології. У літературі рідко повідомляється про неопластичні захворювання у Ксенопу, але вони включають гепатоми, тератоми, карциному нирок, фіброму, фібросаркому, нефробластому, дисгерміному яєчників, меланофороми та лімфоми. 1,2,5,6,10,14 Хоча була описана гіперплазія острівців підшлункової залози в Ксенопу, раніше не повідомлялося про новоутворення підшлункової залози у цих жаб. Повідомляється, що карциноми підшлункової залози трапляються у гібридних видів ставкових жаб роду Pelophylax (раніше Rana). 9 Цей звіт описує перше задокументоване виникнення раку підшлункової залози у X. laevis.

Звіт про справу

При огляді жаба була насторожена, але виснажена, з кістковим виступами хребта та тазу. Інших уражень та ознак травми не зафіксовано. Через поганий стан тіла жаба була евтаназована зануренням у забуференний 5 г/л розчину трикаїнметансульфонату (Sigma Aldrich, St Louis, MO). Жаба була передана у ветеринарно-діагностичну лабораторію Університету Іллінойсу для дослідження вскрыття.

Під час грубого розтину виявлено, що жаба знаходиться в поганому харчовому стані. Жаба важила 86,3 г, а внутрішньоцеоломічні жирові подушечки відсутні. Жодних інших суттєвих грубих відхилень не спостерігалося.

Аеробна бактеріальна культура селезінки не давала патогенів. Зразки селезінки аналізували за допомогою ПЛР із використанням специфічних для роду мікобактеріальних праймерів, ITSF та myocm 2. 12,13 Геномну ДНК виділяли із селезінки за допомогою набору для очищення (№ 947057, Набір для очищення ветеринара One-for-All, Qiagen, Венло, Лімбург, Нідерланди) та автоматизований процесор (процесор BioSprint, Qiagen). Реакційний об'єм ПЛР 25 мкл складався з 2,5 мкл 10 × буфера А (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA), 2,5 мкл 2 нМ dNTP, по 10 мкМ кожен праймер ITSF і mycom 2, 0,25 мкл 5U/мкл Taq полімерази (Invitrogen), 12,25 мкл стерильної води та 2,5 мкл матричної ДНК. Умови термоциклеру включали денатурацію 94 ° C протягом 5 хв з подальшим 29 циклами денатурації при 94 ° C протягом 1 хв, відпал при 60 ° C протягом 1 хв і розтягнення при 72 ° C протягом 1 хв з кінцевим продовженням протягом 10 хв.; потім реакцію проводили при 4 ° С. Електрофорез позитивного продукту ампліфікації на агарозному гелі від 1% до 2% дає смугу від 270 до 360 п.н. Відсутність ампліфікації Mycobacterium spp. Виявлено ДНК із селезінки жаби.

Збирали зразки, зафіксовані у формаліні, зразки вкладали у парафін, регулярно обробляли, розділяли на 4-5 мкм та фарбували гематоксиліном та еозином. Досліджені тканинні зрізи включали легені, печінку, нирки, селезінку, серце, тонку кишку, підшлункову залозу, яєчники, шлунок, тонку і товсту кишку, шкіру та скелетні м’язи. Підшлункова залоза була майже повністю знищена популяцією новоутворених клітин, розташованих пакетами і підтримуваних тонкою фіброзно-судинною стромою (рис. 1). Неопластичні клітини були багатогранними, мали чіткі клітинні краї, часті високі коефіцієнти ядер: цитоплазматичні, а також еозинофільну і вуглую цитоплазму, часто містять еозинофільні глобули змінних розмірів. Ядра були круглими, з мігнутим хроматином і 1-3 ядерцями. У неопластичних клітинах спостерігався помірний анізоцитоз та анізокаріоз. На випадкове поле 400 × було від 1 до 3 мітотичних фігур. Спостерігали розсіяний одноклітинний некроз новоутворених клітин та рідкісні залишкові ацинарні клітини підшлункової залози. Проведено гістохімічне фарбування трихомом Массона, і було колаген-позитивне (синє) фарбування фіброзної строми, що відокремлює пакети новоутворених клітин (рис.2).