Експериментальний
і терапевтичний
Ліки

  • Журнал Головна
  • Поточне питання
  • Майбутній випуск
  • Найчитаніші
  • Найчастіше цитовані (розміри)
    • Останні два роки
    • Разом
  • Найчастіше цитовані (CrossRef)
    • Минулий рік 0
    • Разом

  • Соц.медіа
    • Минулий місяць
    • Минулий рік
    • Разом
  • Архів
  • Інформація
  • Онлайн подання
  • Інформація для авторів
  • Редагування мови
  • Інформація для рецензентів
  • Редакційна політика
  • Редакційна колегія
  • Цілі та сфера застосування
  • Абстрагування та індексування
  • Бібліографічна інформація
  • Інформація для бібліотекарів
  • Інформація для рекламодавців
  • Передруки та дозволи
  • Зверніться до редактора
  • Загальна інформація
  • Про Спандідос
  • Конференції
  • Вакансії
  • Зв'язок
  • Правила та умови
  • Автори:
    • Мі Рім Лі
    • Джи Ын Кім
    • Джун Янг Чой
    • Парк Джин Джу
    • Хе Рьонг Кім
    • Пісня Бо Рам
    • Молодий Ван Чой
    • Кюнг Мі Кім
    • Хункеунська пісня
    • Де Юн Хван

  • Ця стаття згадується в:

    Анотація

    Вступ

    На підставі попередніх звітів ми висунули гіпотезу, що EMfC викликає свої ефекти проти ожиріння шляхом регулювання ліпідного обміну. Тому ми використовували мишей, що страждають ожирінням, спричиненим дієтою, для оцінки змін накопичення жиру та ліпідних профілів, а також вивчали основні механізми адипогенезу, ліпогенезу та ліполізу.

    проти

    Матеріали і методи

    Підготовка ЕМЗ

    Один з авторів (професор Янг Уан Чой) охарактеризував зразки листя шовковиці, зібрані з плантацій в районі Санджу в Кореї в жовтні 2015 р. Зразки ваучерів (номер приєднання Mul-PDRL-1) були здані на зберігання в гербарій Пусанського національного Університет (Мірян, Корея). Професор Санг Монг Лі з кафедри біологічних наук та біохімії навколишнього середовища Національного університету Пусан люб'язно надав C. militaris, що використовується для бродіння. Сільськогосподарські федерації сільського господарства з шовкопрядів (Jeongeup, Корея) постачали порошок лялечок шовкопряда.

    Дизайн експерименту на тваринах

    Вісім тижнів мишей-самців C57BL/6 були придбані у Samtako Bio-Korea Inc. (Осан, Корея) та забезпечували вільний доступ до води та стандартну опромінену дієту чау (Samtako Bio-Korea Inc.). Під час експерименту мишей підтримували у вільному від патогенів стані під суворим світловим циклом (включення світла о 08:00 год. Та вимкнення о 20:00 год.) При 23 ± 2 ° C та відносній вологості 50 ± 10%. З усіма мишами C57BL/6 працювали в Пусанському національному університеті-лабораторії Центру тваринних ресурсів, акредитованому Корейською адміністрацією з питань харчових продуктів і медикаментів (FDA; Акредитована одиниця № 000231) та AAALAC International (Акредитована одиниця № 001525).

    Комітет з питань етики тварин Пусанського національного університету (PNU-2017-1519) затвердив протокол дослідження на тваринах. Усі тварини були акліматизовані на нормальній дієті (D12450K; Research Diets, Нью-Брансвік, Нью-Джерсі, США) протягом 1 тижня. Потім мишей C57BL/6 розподілили на 4 досліджувані групи (7 мишей/групу): (1) контрольна група, яка годувалась нормальним раціоном (без групи лікування), (2) група, яка годувала HFD (дієта з високим вмістом жиру) плюс носій (оливкова олія) + 1% DMSO) (HFD + група, оброблена транспортним засобом), (3) група, яка отримує HFD плюс 10 мг/кг орлістат (Sigma-Aldrich Co.) (група, що отримує HFD + OT), і (4) група, що отримує HFD плюс 50 мг/кг EMfC (група, оброблена HFD + EMfC). Протягом 12 тижнів миші всіх груп лікування HFD споживали HFD, що містить 60% ккал жиру, придбаного у Research Diets (кат. № D12492; Research Diets, Inc., Нью-Брансвік, США). Через 24 години остаточної обробки EMfC всіх мишей евтаназували за допомогою газу CO 2, після чого зразки тканин відбирали і зберігали в пробірках Еппендорфа при -70 ° C до аналізу.

    Вимірювання маси тіла, дієтичного споживання та маси органів

    Протягом експериментального періоду масу тіла мишей, оброблених Vehicle, OT або EMfC, вимірювали щодня о 10:00 за допомогою електронних ваг (кат. № AD-2.5; Mettler Toledo, Greifensee, Швейцарія) згідно з керівництвом KFDA . Крім того, ваги печінки та органів черевної порожнини, зібрані від померлих мишей C57BL/6, визначали, використовуючи той самий метод, який застосовували для вимірювання маси тіла. Споживання корму вимірювали одночасно раз на тиждень протягом досліджуваного періоду, використовуючи хімічний баланс (Mettler Toledo, Швейцарія).

    Біохімічний аналіз сироватки крові

    Після 12 тижнів годування експериментальними дієтами кров відбирали з черевних вен всіх мишей C57BL/6 після голодування протягом 18 год. Зразки крові інкубували протягом 30 хв при кімнатній температурі в пробірках для відділення сироватки (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, США). Сироватку отримували центрифугуванням при 1500 × g протягом 15 хв. Рівні глюкози в сироватці крові, TC (загальний холестерин), TG (тригліцериди), ліпопротеїни високої щільності (HDL) -холестерин та ліпопротеїни низької щільності (LDL) -холестерин аналізували за допомогою автоматичного хімічного аналізатора (BS-120 Chemistry Analyzer; Mindray, Шеньчжень Китай). Крім того, сироватку аналізували на вміст лужної фосфатази (ALP), аланінамінотрансферази (ALT), аспартатамінотрансферази (AST), азоту сечовини крові (BUN) та креатиніну (Crea) за допомогою автоматичного біохімічного аналізатора (BS-120; Mindray). Всі аналізи проводились у двох примірниках із використанням свіжої сироватки.

    Гістопатологічний аналіз

    Печінкові та жирові тканини, розсічені від мишей усіх підгруп, фіксували протягом ночі у 10% нейтральному забуференному формальдегіді (pH 6,8). Потім зневоднену тканину печінки вкладали у парафін. Потім із вкритих парафіном тканин із мікротомом Leica вирізали низку ділянок печінки та жиру (4 мкм) (кат. DM500; Leica Microsystems, Bannockburn, IL, США). Потім ці зрізи депарафінізували ксилолом (кат. № 8587-4410; Daejung, Gyeonggi-do, Корея), регідратували градуйованим етанолом (зниження концентрацій 100-70%) і, нарешті, промили дистильованою водою. Слайди з ділянками печінки фарбували гематоксиліном (кат. № MHS16) та еозином (кат. № HT110332; обидва Sigma-Aldrich Co.), промивали dH 2 O, а патологічні зміни оцінювали за допомогою програми Leica Application Suite ( Leica Microsystems).

    Аналіз зворотної транскрипції-кількісної полімеразної ланцюгової реакції (RT-qPCR)
    Вестерн-блот-аналіз
    Статистичний аналіз значимості

    Фігура 1.

    Малюнок 2.

    Малюнок 3.

    Малюнок 4.

    Малюнок 5.

    Експресія білків, пов’язаних з ліполізом, у тканинах печінки. (A) Вестерн-блот-аналіз вимірював фосфорилювання або експресію декількох асоційованих з ліполізом білків, включаючи (B) периліпін, p-периліпін, HSL, p-HSL та ATGL. Інтенсивність кожної смуги визначали за допомогою візуалізаційного денситометра, а відносні рівні чотирьох білків розраховували на основі інтенсивності актину. П’ять-шість щурів на групу аналізували в трьох примірниках методом вестерн-блот. Дані представлені як середнє значення ± стандартне відхилення трьох повторень. * Р 1

    Хаслам Д.В. та Джеймс В.П .: Ожиріння. Ланцет. 366: 1197–1209. 2005. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Després JP та Lemieux I: Абдомінальне ожиріння та метаболічний синдром. Природа. 444: 881–887. 2006. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Співпраця з факторами ризику НИЗ (NCD-RisC): Світові тенденції розвитку діабету з 1980 року: зведений аналіз 751 популяційного дослідження з 4,4 мільйонами учасників. Ланцет. 387: 1513–1530. 2016. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Магуайр Т та Хаслам Д: Епідемія ожиріння та управління нею. Метью Райт: Фармацевтична преса; Лондон: с. 264–267. 2010 рік

    Pittler MH, Schmidt K та Ernst E: Побічні ефекти трав'яних харчових добавок для зменшення маси тіла: Систематичний огляд. Обес Рев.6: 93–111. 2005. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Gunjal S, Ankola AV і Bhat K: In vitro антибактеріальна активність етанолового екстракту Morus alba лист проти збудників пародонту. Indian J Dent Res. 26: 533–536. 2015. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Раман СТ, Ганешан АК, Чень С, Цзінь С, Лі Ш, Чень ХЖ і Гуй З: In vitro in vivo антиоксидантна активність флавоноїдів, вилучених із плодів шовковиці (Morus alba Л.). Pharmacogn Mag. 12: 128–133. 2016. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Wang Y, Xiang L, Wang C, Tang C і He X: Антидіабетичні та антиоксидантні ефекти та фітохімікати плодів шовковиці (Morus alba Л.) поліфенольний екстракт, посилений. PLoS Один. 8: e711442008. Переглянути статтю: Google Scholar

    Jo SP, Kim JK та Lim YH: Антигіперліпідемічні ефекти стильбеноїдів, виділених з Morus alba у щурів, які харчуються дієтою з високим вмістом холестерину. Food Chem Toxicol. 65: 213–218. 2014. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    El-Beshbishy HA, Singab AN, Sinkkonen J та Pihlaja K: Гіполіпідемічні та антиоксидантні ефекти Morus alba Доповнення фракцій кори коріння L. (шовковиці єгипетської) у щурів, що харчуються холестерином. Life Sci. 78: 2724–2733. 2006. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Eo HJ, Park JH, Park GH, Lee MH, Lee JR, Koo JS та Jeong JB: Протизапальна та протиракова активність шовковиці (Morus alba Л.) кора кореня. BMC Complement Altern Med. 14: 2002014. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Chan EW, Lye PY та Wong SK: Фітохімія, фармакологія та клінічні випробування Morus alba. Chin J Nat Med. 14: 17–30. 2016.PubMed/NCBI

    Kobayashi Y, Miyazawa M, Kamei A, Abe K і Kojima T: Поліпшувальні ефекти шовковиці (Morus alba L.) листя на гіперліпідемії у щурів, які харчуються дієтою з високим вмістом жиру: Індукція окислення жирних кислот, пригнічення ліпогенезу та придушення окисного стресу. Biosci Biotechnol Biochem. 74: 2385–2395. 2010. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Yang SJ, Park NY та Lim Y: Антиадипогенна дія етанолового екстракту листя шовковиці в адипоцитах 3T3-L1. Nutr Res Pract. 8: 613–617. 2014. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Ann JY, Eo HY та Lim YS: Листя шовковиці (Morus alba L.) покращують індукований ожирінням печінковий ліпогенез, фіброз та окислювальний стрес у мишей, що харчуються дієтою. Гени Nutr. 10: 462015. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Naowaboot J, Pannangpetch P, Kukongviriyapan V, Prawan A, Kukongviriyapan U та Itharat A: Екстракт листя шовковиці стимулює поглинання глюкози та транслокацію GLUT4 в адипоцитах щурів. Am J Chin Med. 40: 163–175. 2012. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Сугімото М, Арай Х, Таура Ю, Мураяма Т, Хаенгхан П, Нісіо Т, Оно К, Аріасу Х, Акамізу Т, Уеда Ю та ін: Лист шовковиці покращує профіль експресії адипоцитокінів, пригнічуючи окислювальний стрес у білій жировій тканині db/db мишей. Атеросклероз. 204: 388–394. 2009. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Sung GH, Hywel-Jones NL, Sung JM, Luangsa-Ard JJ, Shrestha B і Spatafora JW: Філогенетична класифікація Кордицепс та плісові гриби. Стад Микол. 57: 5–59. 2007. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    De Silva DD, Rapior S, Sudarman E, Stadler M, Xu J, Alias ​​SA та Hyde KD: Біоактивні метаболіти з макрогрибів: етнофармакологія, біологічна активність та хімія. Дайвери-грибники. 62: 1–40. 2013. Переглянути статтю: Google Scholar

    De Silva DD, Rapior S, Fons F, Bahkali AH та Hyde KD: Лікарські гриби при підтримуючій терапії раку: Підхід до протиракових ефектів та передбачуваних механізмів дії. Дайвери-грибники. 55: 1–35. 2012. Переглянути статтю: Google Scholar

    Pao HY, Pan BS, Leu SF та Huang BM: Кордицепін стимулював стероїдогенез у клітинах пухлини Лейдіга миші MA-10 через шлях протеїнкінази C. J Agric Food Chem. 60: 4905–4913. 2102. Переглянути статтю: Google Scholar

    Кім Дж., Йон Ш., Кім Х. С. і Ан Й. Й.: Ларцицидна активність проти Plutella xylostella кордицепіну з плодового тіла Росії Cordyceps militaris. Pest Manag Sci. 58: 713–717. 2012. Переглянути статтю: Google Scholar

    Ramesh T, Yoo SK, Kim SW, Hwang SY, Sohn SH, Kim IW ​​і Kim SK: Кордицепін (3′-дезоксиаденозин) послаблює віковий окислювальний стрес і покращує антиоксидантну здатність щурів. Досвідчений геронтол. 47: 979–987. 2012. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Guo P, Kai Q, Gao J, Lian ZQ, Wu CM, Wu CA та Zhu HB: Кордицепін запобігає гіперліпідемії у хом'яків, які харчуються дієтою з високим вмістом жиру, шляхом активації АМФ-активованої протеїнкінази. J Pharm Sci. 113: 395–403. 2010. Переглянути статтю: Google Scholar

    Kim SS, Lim KS, Kim HJ, Chong MS, Cho HE, Choi YH, et al: Ефекти екстрактів із змішаної культури з Трихолома Мацутаке міцелій і Cordyceps Militaris міцелій на глюкозу крові у діабетичних щурів, індукованих стрептозотоцином. Корейський J Orient Physiol Pathol. 22: 365–370. 2008 рік.

    Hung YP і Lee CL: Вищий ефект проти фіброзу печінки кордіцепс мілітаріс-ферментований продукт, культивований глибокою океанічною водою шляхом інгібування проявів запалення та вираження факторів, пов’язаних з фіброзом. Мар наркотики. 15 (pii): E1682017. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Lee MR, Kim JE, Yun WB, Choi JY, Park JJ, Kim HR, Song BR, Choi YW, Kim KM і Hwang DY: Ліполітичний ефект нових екстрактів з шовковиці (Morus alba) листя ферментовані с Cordyceps militaris у первинних адипоцитах, отриманих від щурів SD. Lab Anim Res. 33: 270–279. 2017. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Livak KJ та Schmittgen TD: Аналіз даних відносної експресії генів за допомогою кількісної ПЛР у реальному часі та методу 2 (-Delta Delta C (T)). Методи. 25: 402–408. 2001. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Хофбауер К.Г., Ніколсон Дж. Та Босс О: Епідемія ожиріння: поточні та майбутні фармакологічні методи лікування. Annu Rev Pharmacol Токсикол. 47: 565–592. 2007. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Шарма Б та Хендерсон, округ Колумбія: Сибутрамін: Сучасний статус препарату проти ожиріння та його перспективи на майбутнє. Експерт Opin Pharmacother. 9: 2161–2173. 2008. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Lean ME: Патофізіологія ожиріння. Proc Nutr Soc. 59: 331–336. 2000. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Апостолопулу М, Савопулос С, Міхалакіс К, Коппак С, Дардавессіс Т та Хацітоліос А: Вік, вага та ожиріння. Maturitas. 71: 115–119. 2012. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Morimoto C, Kameda K, Tsujita T та Okuda H: Зв'язок між ліполізом, індукованим різними ліполітичними агентами, та чутливою до гормонів ліпазою в жирових клітинах щурів. J Ліпід. 42: 120–127. 2001.PubMed/NCBI

    Брей Г.А .: Медикаментозне лікування ожиріння. Преподобний Endocr Metab Disord. 2: 403–418. 2001. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Mayer MA, Höcht C, Puyó A та Taira CA: Останні досягнення у фармакотерапії ожиріння. Curr Clin Pharmacol. 4: 53–61. 2009. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Васкес-Вела М.Є., Торрес Н та Товар А.Р .: Біла жирова тканина як ендокринний орган та її роль у ожирінні. Arch Med Res. 39: 715–728. 2008. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Schoonjans K, Staels B та Auwerx J: Рецептори, активовані проліфератором пероксисоми (PPARS), та їх вплив на ліпідний обмін та диференціацію адипоцитів. Biochim Biophys Acta. 1302: 93–109. 1996. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Розен Е.Д., Walkey CJ, Puigserver P та Шпігельман Б.М .: Транскрипційна регуляція адипогенезу. Genes Dev. 14: 1293–1307. 2000.PubMed/NCBI

    Kliewer SA та Willson TM: Ядерний рецептор PPARgamma більший за жир. Curr Opin Genet Dev. 8: 576–581. 1998. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Шпігельман Б.М .: PPAR-гамма: Адипогенний регулятор і тіазолідиндіон-рецептор. Діабет. 47: 507–514. 1998. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Boizard M, Le Liepvre X, Lemarchand P, Foufelle F, Ferré P та Dugail I: Надмірна експресія гена синтази жирної кислоти в жировій тканині, пов’язана з ожирінням, включає фактори транскрипції білків, що зв’язують регулюючий елемент стеролу. J Biol Chem. 273: 29164–29171. 1998. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Coe NR та Bernlohr DA: Фізіологічні властивості та функції внутрішньоклітинних білків, що зв’язують жирні кислоти. Biochim Biophys Acta. 1391: 287–306. 1998. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Zimmermann R, Strauss JG, Haemmerle G, Schoiswohl G, Birner-Gruenberger R, Riederer M, Lass A, Neuberger G, Eisenhaber F, Hermetter A і Zechner R: Мобілізація жиру в жировій тканині сприяє жировій тригліцерид-ліпазі. Наука. 306: 1383–1386. 2004. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Haemmerle G, Lass A, Zimmermann R, Gorkiewicz G, Meyer C, Rozman J, Heldmaier G, Maier R, Theussl C, Eder S, et al: Дефектний ліполіз та змінений енергетичний обмін у мишей, у яких відсутня жирова тригліцеридна ліпаза. Наука. 312: 734–737. 2006. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Ahmadian M, Duncan RE, Varady KA, Frasson D, Hellerstein MK, Birkenfeld AL, Samuel VT, Shulman GI, Wang Y, Kang C і Sul HS: Жирова надмірна експресія деснутріну сприяє вживанню жирних кислот і послаблює ожиріння, спричинене дієтою. Діабет. 58: 855–866. 2009. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Tansey JT, Sztalryd C, Hlavin EM, Kimmel AR та Londos C: Центральна роль периліпіну а у ліпідному обміні та ліполізі адипоцитів. IUBMB Life. 56: 379–385. 2004. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Марселін G та Чуа Юніор: Внесок ліпідного обміну адипоцитів у вміст жиру в організмі та наслідки для лікування ожиріння. Curr Opin Pharmacol. 10: 588–593. 2010. Переглянути статтю: Google Scholar: PubMed/NCBI

    Пов’язані статті

    Березень-2019
    Том 17 Випуск 3

    Друк ISSN: 1792-0981
    Інтернет ISSN: 1792-1015