BSA (D1C8Q) Кролячий mAb # 23053

Вестерн-блот-аналіз зазначених кількостей DMEM/FBS та BSA з використанням BSA (D1C8Q) кролячого mAb.

BSA (D1C8Q) Кролячий mAb 23053

кролячий

Вестерн-блот-аналіз зазначених кількостей DMEM/FBS та BSA з використанням BSA (D1C8Q) кролячого mAb.

  • Ваш місцевий представник
  • Ваша інформація про місцеві покупки
  • Гарантія антитіл
  • FAQ
  • Технічна підтримка
  • Сертифікат аналізу
  • Супровідні дані
  • Супутні товари
  • Використання продукту
  • Протоколи
  • Передумови
  • Шляхи та білки
  • Цитати та відгуки

Супровідні дані

РЕАКТИВНІСТЬ B
ЧУТЛИВІСТЬ Рекомбінантний
МВт (кДа) 67
Джерело/Ізотип Кролячий IgG

Ключ програми:

  • W-Західний
  • IP-Імунопреципітація
  • IHC-Імуногістохімія
  • ЧІП-Імунопреципітація хроматину
  • ЯКЩО-Імунофлюоресценція
  • F-Проточна цитометрія
  • E-P-ІФА-пептид

Ключ перехресної реактивності виду:

  • H-Людина
  • М-Миша
  • Р.-Щур
  • Хм-Хом'як
  • Mk-Мавпа
  • Мі-Норка
  • C.-Курка
  • Дм-D. melanogaster
  • X-Ксенопус
  • Z-Данио
  • B-Бичачий
  • Dg-Пес
  • Стор-Свиня
  • Доктор-S. cerevisiae
  • Се-C. elegans
  • Хр-Кінь
  • Всі-Очікуються всі види
BSA (D4L9G) Миша mAb # 66271
FXR/NR1H4 (E4B8P) mAb для миші # 72105
Антитіло до β2-мікроглобуліну # 59035
Транстиретин (D8T4Q) Кролячий mAb # 29872
β2-мікроглобулін (D8P1H) Кролячий mAb # 12851
Антитіло до альбуміну # 4929
C-реактивний білок (D1N1U) кролячий mAb # 14316
Лізоцим C-1/2 Антитіло # 61137
Антитіло до лізоциму С # 55164
β2-мікроглобулін (D8P1H) Кролячий mAb (кон'югат PE) # 14730

Інформація про використання продукту

Зберігання

Поставляється в 10 мМ HEPES натрію (рН 7,5), 150 мМ NaCl, 100 мкг/мл желатину, 50% гліцерину та менше 0,02% азиду натрію. Зберігати при –20 ° C. Не аліквотуйте антитіло.

Протокол

Вестерн-протокол промокання

Для вестерн-блоттингу інкубуйте мембрану з розведеним первинним антитілом у 5% мас./Об. Нежирного сухого молока, 1Х TBS, 0,1% Твін ® 20 при 4 ° С з легким струшуванням протягом ночі.

ПРИМІТКА: Будь ласка, зверніться до веб-сторінки первинного продукту антитіл щодо рекомендованого розведення антитіл.

А. Розчини та реагенти

ПРИМІТКА: Приготувати розчини з деіонізованою зворотним осмосом (RODI) або рівноцінною водою.

B. Зміщення білків

Загальний протокол підготовки зразків.

  1. Обробляйте клітини, додаючи свіжий носій, що містить регулятор протягом бажаного часу.
  2. Аспіратні засоби масової інформації з культур; промити клітини 1X PBS; аспірувати.
  3. Лізують клітини шляхом додавання 1X буфера зразка SDS (100 мкл на лунку 6-лункової пластини або 500 мкл для пластини діаметром 10 см). Негайно зішкребіть клітини з пластини і перенесіть екстракт у пробірку для мікроцентрифуги. Тримайся на льоду.
  4. Ультразвук протягом 10–15 с для завершення лізису клітин та зсуву ДНК (для зменшення в’язкості зразка).
  5. Нагрійте 20 мкл зразка до 95-100 ° C протягом 5 хв; прохолодно на льоду.
  6. Мікроцентрифуга протягом 5 хв.

Завантажте 20 мкл на гель SDS-PAGE (10 см x 10 см).

ПРИМІТКА: Рекомендується завантаження попередньо фарбованих маркерів молекулярної маси (# 13953, 10 мкл/смуга) для перевірки електротрансферу та біотинільованих білкових драбин (# 7727, 10 мкл/смуга) для визначення молекулярних ваг.

  • Електротрансфер на нітроцелюлозну мембрану (# 12369).

    • C. Блокування мембрани та інкубації антитіл

    ПРИМІТКА: Обсяги для 10 см х 10 см (100 см 2) мембрани; для мембран різного розміру відповідно регулюйте гучність.

    I. Блокування мембрани

    1. (Необов’язково) Після перенесення промийте нітроцелюлозну мембрану 25 мл TBS протягом 5 хв при кімнатній температурі.
    2. Інкубуйте мембрану в 25 мл блокуючого буфера протягом 1 години при кімнатній температурі.
    3. Промити три рази по 5 хв по 15 мл TBST.

    II. Первинна інкубація антитіл

    1. Інкубуйте мембрану та первинне антитіло (при відповідному розведенні та розчиннику, як рекомендовано на веб-сторінці продукту) у 10 мл первинного буфера для розведення антитіл, обережно перемішуючи протягом ночі при 4 ° C.
    2. Промити три рази по 5 хв по 15 мл TBST.
    3. Інкубуйте мембрану з анти-кролячим IgG, зв'язаним з HRP антитілом (# 7074 на 1: 2000) та анти-біотином, зв'язаним з HRP-антитілом (# 7075 на 1: 1000–1: 3000) для виявлення біотинільованих білкових маркерів у 10 мл блокуючий буфер з легким перемішуванням протягом 1 години при кімнатній температурі.
    4. Промити три рази по 5 хв по 15 мл TBST.
    5. Продовжуйте виявлення (Розділ D).

    D. Виявлення білків

    Вказівки щодо використання:

    1. Промийте зв’язаний з мембраною HRP (кон’югат антитіл) тричі протягом 5 хвилин у TBST.
    2. Приготуйте 1X реагенту SignalFire ™ ECL (# 6883), розбавивши одну частину 2X реагенту A та одну частину 2X реагенту B (наприклад, для 10 мл додайте 5 мл реагенту A та 5 мл реагенту B). Добре перемішати.
    3. Інкубуйте субстрат з мембраною протягом 1 хвилини, видаліть надлишок розчину (мембрана залишається вологою), оберніть пластиком і піддайте рентгенівській плівці.

    * Уникайте повторного впливу на шкіру.

    розміщено в червні 2005 року

    переглянуто в червні 2020 року

    Ідентифікатор протоколу: 263

    Специфічність/Чутливість

    BSA (D1C8Q) Кролячий mAb розпізнає загальний білковий білок альбуміну. Антитіло не виявляє людський альбумін. Примітка: Для найкращих результатів уникайте реагентів, що містять BSA.

    Видова реактивність:

    Джерело/Очищення

    Моноклональні антитіла виробляються імунізацією тварин рекомбінантним бичачим білком BSA.

    Передумови

    Бичачий сироватковий альбумін (BSA) є найбільш поширеним білком у плазмі. Альбумін переважно синтезується в печінці і є основним транспортним компонентом для багатьох ендогенних та екзогенних сполук, включаючи жирні кислоти, стероїдні гормони, метаболіти та лікарські засоби. Він також відповідає за підтримку колоїдного осмотичного тиску і може впливати на цілісність мікросудин (1).

    Шляхи та білки

    Дослідіть шляхи + білки, пов’язані з цим продуктом.

    Білки вище/нижче за течією

    STRING - Відомі та передбачувані білково-білкові взаємодії.