Амфетамін модифікує споживання етанолу у щурів-самців з психосоціальним стресом

Анотація

1. ВСТУП

Стресова реакція включає скоординовану фізіологічну та поведінкову реакцію організму на стресовий виклик. Хоча стресовий виклик (стрес) може бути екологічним або фізіологічним, адаптаційні механізми подолання як швидкі у випадку гострих стресових факторів, так і тривалі у випадку хронічних стресових факторів. Експериментальні дані вказують на те, що гризуни демонструють два загальних типи стратегій подолання, коли стикаються з психосоціальним стресором. Ці дві широко досліджені стратегії були визначені як "активне" подолання та "пасивне" подолання (наприклад, Benus et al., 1991; Koolhaas et al., 1999). Через чіткі характеристики «активного» подолання, як правило, пов’язаного з домінуючим (Dom) статусом, та «пасивного» стилю подолання, пов’язаного зі статусом, що не є Dom (Benus et al., 1991; Koolhaas et al., 1999), ймовірно, що чутливість до наркотиків також може відрізнятися залежно від статусу суб'єкта.

Вплив стресу на проковтування етанолу (EtOH) людьми та експериментальними тваринами в даний час добре визнано і підтверджено кількома оглядами (Björqvist, 2001; Jose et al., 2000; Pohorecky et al., 1990; Pohorecky та ін., 1991; Uhart and Wand, 2008). Специфічний вплив психосоціального стресу на поглинання EtOH оцінювали за допомогою ряду моделей на тваринах. Дослідження впливу соціальної ізоляції (одномісне житло, SiH) на вживання EtOH дали суперечливі висновки. Хоча деякі дослідники стресу повідомляли, що піддані ізоляції гризуни поглинали більше EtOH порівняно з груповими гризунами (Ehlers et al., 2007; Juarez and Vazquez-Cortes, 2003; Parker and Radow, 1974; Roske et al., 1994), інші повідомляли про зниження (Adams and Oldham, 1996) або про відсутність впливу на споживання EtOH (Doremus et al., 2005; Thorsell et al., 2005).

Значна кількість доказів документує вплив EtOH на дофамінергічну (DArgic) систему мозку. Встановлено, що EtOH збільшує вивільнення тонізуючого дофаміну (DA), тоді як його вплив на фазове вивільнення було менш надійним (Robinson et al., 2009), а швидкість випалювання нейронів DA у щурів з високим вмістом EtOH була вищою порівняно з інші, що не віддають перевагу EtOH (Melis et al., 2009; Morzorati et al., 2010). Поглинання EtOH також підвищувало активність DArgic нейронів (Appel et al., 2003; Brodie et al., 1999; Morzorati et al., 2010), а також рівні DA в ядерному нагромадженні (Di Chiara and Imperato, 1988). Вважається, що система DAgic опосередковує, принаймні частково, як самовведення EtOH, так і корисні аспекти прийому EtOH (Koob and Weiss, 1992; Melis et al., 2009).

Стресори також вносять зміни в функцію DArgic (оглянуто Марінеллі та ін., 2006), і дефіцит в боротьбі зі стресом може відображати дефіцит у цій системі (Kapur and Mann, 1992). Вагомі докази також накопичені щодо впливу психосоціального стресу на нейрони DA мозку. Наприклад, у мавп вплив соціального стресу на DArgic системи залежав від соціального рангу. Морган та його співробітники (2002) відзначають, що кокаїн функціонував як підсилювач для підлеглих, але не домінуючих мавп (Dom), припускаючи, що відмінності в DArgic-системах залежать від рангу. У гризунів ураження асоціювалося з DArgic гіперактивністю та посиленою фазовою DAgic-сигналізацією мезолімбічного шляху (Anstrom et al., 2009). Як повідомляється, у резидентних щурів рівень екстранейрональних DA підвищений у порівнянні з щурами-порушниками після постійного тесту на вторгнення (Ferrari et al., 2003), тоді як рівні зв’язування з рецепторами DA D2 були вищими в Dom, ніж у підлеглих макак cynomolgus (Morgan et та ін., 2002), і виявлено, що здатність зв'язування транспортерів DA менша у багаторазових землерийки (Isovich et al., 2000).

Попередні дані вказували на те, що депресивний вплив EtOH на поведінку залежав від статусу суб'єктів. Наприклад, розміщені в тріаді субдомінантні щури були більш чутливими, ніж щури Dom, до поведінково-депресивних ефектів EtOH (Blakley and Pohorecky, 2006). У цих дослідженнях розглядається гіпотеза про те, що статус рангу може також впливати на чутливість до інших лікарських засобів, зокрема до психостимулятора амфетаміну (Amp). Амфетамін був відібраний на основі доказів, що впливають на нейрональну систему DA як при вживанні EtOH, так і в соціальному стресі. Відомо, що препарати, що виділяють DA в мозок, такі як Amp (наприклад, Verheij and Cools, 2008 для огляду), підвищують винагородну цінність різних стимулів (Di Chiara and Imperato, 1988; Tupala and Tiihonen, 2004) і очікується, що це також змінить споживання EtOH. Додатковою метою нашого дослідження було подальше оцінювання ролі DArgic системи у поведінкових наслідках психосоціального стресу. Нарешті, для оцінки специфічності дії Amp на поглинання EtOH у щурів із психосоціальним стресом, ми також вивчили прийом сахарину, широко розціненої корисної речовини для гризунів.

2. МЕТОДИ

2.1. Предмети та житло

Рейтинг агоністичної поведінки

2.2. Протоколи пиття

Прийом етанолу

1-годинний сеанс пиття з обмеженим доступом розпочався приблизно о 13:30 вечора після періоду щоденної соціальної взаємодії та після заміни клітинних роздільників. Дві пляшки для пиття були прикріплені до кожного відділення клітки; одна містила водопровідну воду, а інша - розчин EtOH. Для контролю за зміщенням положення положення двох поїлок щодня чергували. Початкова концентрація 3% EtOH збільшувалась через день на 1% до 6% розчину (об./Об.), Який потім підтримували протягом дослідження. Розчини EtOH готували з 95% EtOH з використанням водопровідної води. Споживання EtOH та води визначали шляхом зважування пляшок з точністю до 0,1 г до і після кожного сеансу пиття. Споживання етанолу розраховували як грам споживаного EtOH на кілограм ваги. Перевагу етанолу визначали як спожитий об’єм розчину EtOH, поділений на об’єм загальної споживаної рідини [мл EtOH/(мл EtOH + мл води)]. Первинна оцінка встановила, що не було доказів значного витоку з пляшок для пиття.

Прийом сахарину

Протокол прийому сахарину відображав протокол для споживання EtOH, за винятком того, що 1-годинний обмежений доступ для прийому сахарину оцінювався протягом трьох послідовних тестових днів. Починаючи з 12:30 щурам дозволявся доступ до двох пляшок для пиття, одна містила 0,1% розчин сахарину у водопровідній воді (мас./Об.), А друга містила воду з-під крана. Поїлки щодня поповнювали свіжими розчинами щодня, і їх положення також чергували щодня діаду. Споживання сахарину усереднювалось протягом 4 тестових днів і розраховувалось як грами на кілограм маси тіла.

2.3. Експериментальне лікування

Ін’єкції фізіологічного розчину та Amp (0,3 мг/кг, 0,9 мг/кг та 2,7 мг/кг) вводили ІР за 15 хвилин до тесту на споживання EtOH.

2.4. Експериментальний дизайн

Таблиця 1

Експериментальний протокол для утримуваних на діаді щурів

Тести Одномісний корпус Діадний корпус Тільки вода Вибір етанолу/води Хронологія (дні)

Акліматизація	х	х	12
Тестування на сахарин	х	х	3
Відпочинок	х	х	5
Прийом етанолу	х	х	21
Амфетаміновий тест	х	х	37
Вимивання	х	х	21
-	-	-	-	-
Тестування на сахарин	х	х	3
Відпочинок	х	х	5
Прийом етанолу	х	х	21
Амфетаміновий тест	х	х	37

Графік випробувань, а також наявність води та вибір EtOH/вода для щурів-одномісних поселень були такими ж, як і для щурів, що утримувались у діадах, за винятком того, що ці щури залишались однодомними.

2.5. Статистичний аналіз даних

Всі дані були проаналізовані за допомогою StatView версії 5. Простий ANOVA був використаний для аналізу даних про загальні показники поведінкової соціальної взаємодії, що відображаються під час 10-хвилинного тесту, та про зміну маси тіла, причому головним фактором є статус рангу/житло (Дом, Сдом, неодружений). Для оцінки ефекту Amp на споживання EtOH та перевагу протягом двох разів тестування співвідношення зміни від попередньої діади до діади було розраховано таким чином: (відповідь при тесті діади/[відповідь при тестах перед діадою + діадою]). Потім розраховані дані коефіцієнта аналізували за допомогою повторного вимірювання тесту ANOVA із статусом статус/житло (Dom, Sdom, одиночний) та лікування наркотиками (фізіологічний розчин, 0,3, 0,9 та 2,7 мг/кг Amp) як між суб'єктами, так і серед суб'єктів. фактори, відповідно; статистичну значимість було встановлено при Р =/.05). Оскільки щурів, що утримували діаду, було розділено кліткою-роздільником після їх початкової короткочасної взаємодії, зменшення маси тіла внаслідок початкового 24-годинного утримання діади було невеликим (-3,13 ± 0,91 - 3,70 ± 0,72 і -0,70 ± 0,44 для щурів Dom, Sdom та SiH відповідно) порівняно із змінами, раніше зазначеними у щурів, що містять тріади (Pohorecky et al., 1999; 2004). Подібним чином, в останній день дослідження не спостерігалося групових відмінностей у масі тіла.

3.2. Прийом етанолу

Таблиця 2

Вживання етанолу та перевагу етанолу у введених фізіологічним розчином щурів, що перебувають на діаді та в одній домі

Виміряти час тесту Домінант Субдомінант Одиничний

Споживання етанолу (г/кг)	Попередня діада	0,587 ± 0,049	0,790 ± 0,055 D	0,697 ± 0,039
Споживання етанолу (г/кг)	Діада	0,841 ± 0,059 *	0,690 ± 0,043	0,658 ± 0,055
Перевага етанолу (%)	Попередня діада	77,96 ± 2,21	82,01 ± 2,30	73,98 ± 2,56
Перевага етанолу (%)	Діада	78,20 ± 1,53	82,81 ± 1,32	78,44 ± 1,38

Споживання етанолу оцінювали протягом 1-годинної щоденної сесії. Перевага етанолу розраховувалася як відсоток від загального споживання рідини. Дані представляють середнє значення ± SEM для 13 щурів на групу.