Самоконтроль нікотину та відновлення нікотину, що шукає у самців та самок щурів

Анотація

Передумови

Залежність від тютюну є рецидивуючим розладом, який становить значну проблему здоров’я у всьому світі, і факти свідчать, що нікотин та пов’язані з нікотином подразники відіграють неоднакову роль у підтримці поведінки куріння у чоловіків та жінок. Хоча тваринні моделі тютюнової залежності, які використовують самовживання нікотину, набули більш широкого поширення, систематичне вивчення численних факторів, що спонукають до рецидивів до пошуків нікотину, було обмеженим. Тут ми досліджували самовведення нікотину та подальший пошук нікотину у самців та самок щурів Спрег-Доулі, використовуючи тваринну модель самовведення та рецидиву.

Методи

Важіль щурів натискали на нікотин (0,03 та 0,05 мг/кг/інфузія, внутрішньовенно) протягом 15 щоденних 2-годинних сеансів з наступним вимиранням важеля, що реагував. Після того, як відповідь згасла, ми дослідили здатність раніше поєднаних нікотином сигналів (тон + світло), анксіогенного препарату йохімбіну (2,5 мг/кг, ІП), первинної ін'єкції нікотину (0,3 мг/кг, СК) або комбінацій наркотиків + підказки для відновлення пошуку нікотину.

Результати

Як чоловіки, так і жінки легко набувають нікотину самостійно і демонструють порівнянні рівні реакції та споживання в обох дозах нікотину. Після зникнення, вплив раніше сполучених нікотином сигналів або йохімбіну, але не лише самого нікотину, відновив пошук нікотину у чоловіків та жінок. Більше того, в поєднанні з поєднаними з нікотином сигналами, як йохімбін, так і нікотин покращують відновлення. Під час тестів на відновлення не було зафіксовано суттєвих відмінностей між статями та змін, пов’язаних з естрозним циклом.

Висновки

Ці результати демонструють здатність відновлювати пошук нікотину з різними способами, і що вплив на нікотин асоційованих ознак у періоди стресового стану або нікотину може посилити пошук нікотину.

1. Вступ

Залежність від тютюну є важливою проблемою для охорони здоров’я, оскільки, за оцінками, щодня курять тютюн у всьому світі 1,3 мільярда (Guindon and Boisclair, 2003; Thun and da Costa e Silva, 2003). Незважаючи на значне зменшення відсотка населення, яке вживає тютюн за останні чотири десятиліття, вживання тютюну залишається провідною причиною передчасної смерті та захворювань, яку можна запобігти, у Сполучених Штатах щорічно спричиняється 440 000 смертей (Fellows et al., 2002) . Подібно до інших зловживань наркотиками, однією з найбільш значущих проблем при тривалому лікуванні нікотинової залежності є висока частота рецидивів до наркоманів, які шукають наркотики та приймають наркотики після тривалих періодів утримання. Насправді більшість курців, які кидають, рецидивують (Fiore, 2000; Shiffman et al., 1998), і майже всі курці, які рецидивують після першої спроби кинути, повернуться до звичайного куріння (Brandon et al., 1990; Chornock et співавт., 1992; Кенфорд та ін., 1994).

Встановлено, що три основні фактори сприяють рецидиву нікотину у людини: пов'язані з нікотином ознаки (Perkins et al., 1999; Perkins et al., 1994), стрес (Brandon et al., 1990; Patton et al., 1997) та вплив самого препарату (Chornock et al., 1992; Sofuoglu et al., 2005). Подібним чином ці тригерні фактори використовувались на тваринних моделях рецидиву поведінки, яка шукає наркотики, особливо в моделі вимирання/відновлення після відмови від хронічного самовведення нікотину, завдяки чому вплив парних нікотином стимулів (LeSage et al., 2004; Liu et al., 2008; Liu et al., 2006), стрес від удару (Buczek et al., 1999; Martin-Garcia et al., 2009; Yamada and Bruijnzeel, 2011; Zislis et al., 2007), або неконденсуючий введення нікотину (Le et al., 2006; Martin-Garcia et al., 2009; Shaham et al., 1997; Shram et al., 2008) відновить пошук нікотину, виміряний реакцією на попередньо спарений нікотин.

2. Матеріали та методи

2.1. Предмети

Старі самці (початкова вага 250–300 г, P59–67) та самки (початкова вага 175–225 г, P57–74) Щури Спрег-Доулі (Charles River Laboratories, Вілмінгтон, Массачусетс, США) розміщувались окремо в окремих контрольований температурою та вологістю віварій на 12-годинному циклі світло-темно (світиться о 06:00). Всі експериментальні процедури відбувались з 07:00 до 16:00. У домашній клітці тварини мали доступ до води ad libitum і їх утримували на контрольованому харчуванні (20–25 г/добу) стандартного чау-чау (Harlan, Indianapolis, IN, USA) протягом усього експерименту. Усі експериментальні процедури були схвалені Інституційним комітетом з догляду та використання тварин Медицинського університету Південної Кароліни та відповідали федеральним правилам, як описано в "Посібнику з догляду та використання лабораторних щурів" Інституту лабораторних тваринних ресурсів з наук про життя, Національна наукова рада.

2.2. Хірургія

Щурів знеболювали за допомогою суміші кетаміну гідрохлориду та ксилазину (66 та 1,33 мг/кг відповідно ІП) та еквітезину (пентобарбітал натрію 4 мг/кг, гідрату хлоралу 17 мг/кг та 21,3 мг/кг гептагідрату сульфату магнію, розчиненого у Вводили та підтримували 44% пропіленгліколь, 10% розчин етанолу, ІП) та яремні катетери, використовуючи раніше описані методи (Reichel et al., 2011). Для оцінки прохідності катетера щури час від часу отримували інфузію метогекситалу натрію 0,1 мл (Eli Lilly, Indianapolis, IN, США; 10 мг/мл, розчиненого в 0,9% фізіологічному розчині), барбітурату короткої дії, що спричиняє швидку втрату м’язовий тонус при внутрішньовенному введенні.

2.3. Самостійне вживання і вимирання нікотину

Важіль щурів, натиснутий на нікотин, у стандартних камерах самоврядування, пов'язаних з комп'ютеризованою програмою збору даних (MED-PC, Med Associates Inc., Сент-Олбанс, штат Техас, США). Камери були оснащені двома важелями, білим стимулюючим світлом над нікотиновим (тобто активним) важелем, генератором тонів та білим будинковим світлом. Кожна камера містилася в звукопоглинальній кабіні, обладнаній вентилятором.

2.4. Відновлення нікотину

2.5. Моніторинг еструозного циклу

Для того, щоб встановити стадії естрольного циклу, зразки просвіту піхви відбирали безпосередньо перед і після кожного з п'яти тестів на відновлення. Однак, щоб звикнути самок до вагінальної цитологічної процедури, проби брали щодня протягом усього експерименту. Зразки просвіту піхви збирали, обережно промиваючи 30 мкл подвійної дистильованої води та екстрагуючи зразок за допомогою мікропіпетки та наконечників піпетки 100 мкл. Зразки розміщували на предметних предметних стеклах, фарбували за допомогою Quick-Dip Hematology Stain (Mercedes Medical, FL, США), досліджували за допомогою світлового мікроскопа (10-кратне збільшення), а фази естрального циклу класифікували відповідно до раніше опублікованих критеріїв (Marcondes et al. ., 2002).

2.6. Аналіз даних

Змішані фактори дисперсійного аналізу (ANOVA) використовували для аналізу реакцій важелів та споживання нікотину (мг/кг) під час самостійного введення нікотину (останні сім днів) та вимирання (перші сім днів), а секс і сеанс як між -і фактори всередині суб'єктів, відповідно. Для тестування на відновленні були використані тристоронні ANOVA для аналізу реакцій важеля із статтю (чоловік, жінка), кий (без кий, кий), наркотиками (транспортний засіб, йохімбін, нікотин-прем'єр) та естрозною фазою (проеструс, еструс, дієструс) I/II) як фактори, де це доречно. Значні взаємодії були додатково досліджені за допомогою ANOVA або незалежних t-тестів, де це доречно. Точки даних усували, якщо вони складали 2,5 стандартних відхилення, що перевищували середнє значення для групи. Всі пост-hoc аналізи проводились із використанням Стьюдента-Ньюмана-Кеульса з альфа-значенням 0,05, і представлені лише значущі значення F або t.