Фактори ризику церебральної ішемії у немовлят, народжених від матерів з гестаційним діабетом

Оригінальна стаття

Повна стаття
Цифри та дані
Список літератури
Цитати
Метрики
Ліцензування
Передруки та дозволи
PDF

Анотація

Завдання: Гестаційний цукровий діабет (GDM) - це непереносимість вуглеводів, яка виникає під час вагітності. Це дослідження було організоване для визначення ризику церебральної ішемії (ДІ) у немовлят, народжених від матерів із гестаційним цукровим діабетом та MTHFR генний поліморфізм.

Матеріал і методи: Дослідження включає 70 вагітних із ГДМ, розділених на дві групи залежно від наявності ішемії мозку (ДІ) у новонароджених немовлят. У всіх пацієнтів тестували на компоненти каскаду згортання, поліморфізм гена метилентетрагідрофолатредуктази (MTHFR) та оцінювали за допомогою тромбоеластографії (TEG).

Результати: Ми спостерігали, що частота (74,2%) збільшилась на 1298С MTHFR носії генотипу серед жінок з ХІ новонародженими. У жінок цієї групи діагностовано стан гіперкоагуляції за даними як каскадних тестів коагуляції, так і даних ТЕГ.

Висновки: Результати цього дослідження дозволяють припустити, що гіперглікемія може програмувати розвиток церебральної ішемії у немовлят, народжених жінками з 1298С MTHFR генний поліморфізм.

Вступ

Гестаційний цукровий діабет (GDM) - це часто зустрічається стан під час вагітності, пов’язане з резистентністю до інсуліну та неадекватною секрецією інсуліну при гіперглікемії. За даними Міжнародної діабетичної федерації, у 2015 році у світі народилося 20,9 мільйонів (16,2%) немовлят від матерів із ГРМ або матерів, які постраждали від інших форм гіперглікемії [1]. Існує значна відповідність спостеріганої частоти ГДМ, метаболічного синдрому та ожиріння у сучасній популяції вагітних жінок [2, 3].

Вплив діабету на систему згортання крові та функції ендотелію відомий вже багато років. На гемостатичні фактори та діяльність впливає гіперглікемічний стан. Більше того, вагітність викликає стан гіперкоагуляції як фізіологічний механізм для забезпечення гемостатичного балансу, запобігаючи масивній втраті крові матері при пологах [4].

Важливо чітко розпізнавати та контролювати ГРМ через ризик несприятливих наслідків для матері та плоду, таких як розвиток прееклампсії, плацентарної недостатності, недоношеності та необхідності проведення кесаревого розтину та його асоціації з родовими травмами [5].

Високий ризик метаболічних порушень, респіраторного дистрес-синдрому та неврологічних пошкоджень був продемонстрований у немовлят, народжених від матерів із ГРМ. Ці несприятливі наслідки можуть зберігатися у цих немовлят протягом подальшого життя [6].

Більшість перинатальних неврологічних пошкоджень (внутрішньошлуночкові крововиливи, церебральна ішемія) можна розглядати як складні порушення розвитку, що мають вплив як навколишнього середовища, так і гена. Було продемонстровано, що поліморфізми в метилентетра-гідрофолатредуктазі (MTHFR) гени пов'язані з травмами головного мозку новонароджених за наявності перинатальної гіпоксії [7].

Враховуючи вплив GDM на систему згортання крові та плацентарний транспорт кисню, вплив генних поліморфізмів на плід та новонароджене немовля залишається досі незрозумілим. Метою дослідження було визначити ризик церебральної ішемії у немовлят, народжених від матерів із гестаційним цукровим діабетом та MTHFR генний поліморфізм.

Методи

Набір піддослідних

Загалом було набрано 70 суб'єктів (2011–2016 рр.), Які дали свою поінформовану згоду під час прийому на роботу та пологів в Дослідницькому інституті материнства та догляду за дитиною (Єкатеринбург, Росія) в рамках поточного розслідування гестаційного діабету, затвердженого інституційним комітетом з етики.

Відповідно до критеріїв Міжнародної асоціації дослідницьких груп з діабету та вагітності (IADPSG) [8], незалежно від терміну вагітності, діагноз ГРМ під час вагітності ставиться на основі глюкози натще ≥126 мг/дл натще; глюкоза ≥200 мг/дл, виміряна через 2 год після перорального навантаження 75 г глюкози; або випадковий рівень глюкози в крові ≥200 мг/дл, пов'язаний з клінічними симптомами.

Значення глюкози натще 92–125 мг/дл або рівні глюкози 153–199 мг/дл, виміряні через 2 год після навантаження глюкозою 75 г, використовувались для підтвердження діагнозу ГДМ [9].

Критеріями виключення з цього дослідження були: цукровий діабет 1-го та 2-го типу, аутоімунні та запальні захворювання, інфекції матері та плода та вроджена аномалія плода.

Усім жінкам протягом усього періоду вагітності проводилось лише контроль дієти. Усіх новонароджених немовлят проконсультував дитячий невролог протягом 3 днів після народження, а дослідження УЗД мозку проводили за допомогою ультразвукового апарату Philips HD 15 (Philips Medical Systems, США) із зондом 5 МГц.

Жінки з ГРМ були розділені на дві групи залежно від наявності церебральної ішемії (ДІ) у новонароджених немовлят. Перша (основна) група включає 31 жінку, яка народила немовлят із ДІ, 2г (контрольну) групу містить 39 жінок, які народили немовлят без ІМ.

Стандартні тести на згортання крові контролювали для кожного пацієнта перед пологами чи кесаревим розтином. Зразки цільної венозної крові (3,0 мл) збирали у флакони, що містять 0,3 мл 3,2% цитрату натрію. Для дослідження тромболастографії (ТЕГ) видаляли один мілілітр крові, тоді як нагадування використовували для клінічно показаних досліджень РТТ та фібриногену. Визначення ТЕГ проводили на аналізаторі Helena AC-4 (Helena Bioscience Europe, UK) згідно з інструкцією виробника.

Безпосередньо виміряними чотирма змінними були: (1) Час згортання (R): час латентності до початкового утворення фібрину, (2) Кінетика згустків (K): швидкість, з якою досягається певний рівень міцності згустку (амплітуда 20 мм ), (3) Кут (α): швидкість зміцнення згустку та (4) Максимальна амплітуда (MA): гранична міцність згустку. Крім того, з чотирьох безпосередньо виміряних змінних був отриманий індекс коагуляції (ДІ). Нарешті, LY30 вимірює швидкість, з якою амплітуда зменшується через 30 хв після досягнення МА, і є репрезентативною для розпаду згустків або фібринолізу. Також були проведені стандартні тести, включаючи частковий тромбопластиновий час (PTT), міжнародне нормалізоване співвідношення (INR), тромбіновий час (TB), концентрацію фібриногену та фібринолітичну активність (FA) для оцінки ефективності каскаду згортання. Зразки щічного епітелію матері генотипували за допомогою ПЛР у режимі реального часу за допомогою обладнання DT-96, наборів та посібників ДНК-технології (ДНК-Технологія, Росія).

Статистичний аналіз

Збіг розподілу генотипу з рівновагою Харді-Вайнберга оцінювали за допомогою точного тесту. Для порівняння генотипу та розподілу алелів між групами використовували тест хі-квадрат. Параметри коагуляції порівнювали між групами генотипів за допомогою тесту Манна-Уітні. Статистичну значимість оцінювали за значенням стор Фактори ризику церебральної ішемії у немовлят, народжених від матерів з гестаційним діабетом

Опубліковано в Інтернеті:

Таблиця 1. Клініко-демографічні характеристики досліджуваної сукупності.

Ми проаналізували частоту визначення генотипу, який містить алелі «ризику», відповідно до поліморфних локусів генів, що кодують каскадні білки коагуляції F5: 1691 G> A, F2: 20210 G> A, FGB: 455 G> A, PAI-1: 5 G> 4 G, ITGA2: 807 C ≫ T, ITGB3 1565 Т ≪ С, MTR 2756 A> G, MTRR 66 A> G, MTHFR 677С> Т и MTHFR 1298 A> C.

Ми спостерігали, що спостерігається підвищена частота (74,2%) генотипу MTHFR з поліморфізмом 1298 A> C. Варіант алеля 1298 C у гомо- та гетерозиготному стані був виявлений у всіх жінок першої групи. У всіх жінок 2-ї групи генотип MTHFR Було визначено 1298АА.

Дані про згортання крові у жінок обох досліджуваних груп представлені в таблиці 2.

Опубліковано в Інтернеті:

Таблиця 2. Параметри ТЕГ та каскаду згортання крові у жінок досліджуваних груп.

Згортальні проби виявляють стан гіперкоагуляції у жінок 1-ї групи з алелем 1298С MTHFR гена порівняно з жінками групи 2. Збільшення вмісту фібриногену (6,09 ± 0,11 г/л проти 5,77 ± 0,19 г/л) було показано у жінок 1-ї групи. У цих жінок була визначена активація каскаду внутрішнього згортання ( PTT становив 28,4 ± 0,4 с. Проти 31,0 ± 0,5 с у групі 2). Також спостерігалося значне пригнічення фібринолітичної активності сироватки у жінок 1-ї групи (табл. 2).

Структурно-кінетичні характеристики утворення згустків за результатами ТЕГ були підвищені у жінок 1-ї групи. Як показники R, так і K були значно знижені у жінок цієї групи (табл. 2), що означає збільшення швидкості утворення згустків у жінок з поліморфним алелем 1298С MTHFR ген. Також як кут α, так і максимальна амплітуда згустку були збільшені у жінок 1-ї групи. Ці зміни параметрів ТЕГ призвели до значного збільшення індексу згортання (3,4 ± 0,2 у жінок 1-ї групи проти 2,5 ± 0,2 у жінок 2-ї групи).

Обговорення

Виробництво та активація протромботичних та фібринолітичних факторів дуже добре збалансовані у звичайній вагітності. Було показано, що рівні плазмових факторів згортання, таких як фібриноген та деякі інші фактори, зростають, тоді як фібриноліз пригнічується завдяки компактній структурі та вродженій стійкості молекули фібрину до лізису при цукровому діабеті [10]. GDM може бути дуже схожим на легшу форму метаболічного синдрому. Оскільки маса тіла вища у жінок з ГДМ порівняно зі здоровими жінками, резистентність до інсуліну може виникати у вагітних, що призводить до гестаційного діабету.

Одним з найважливіших заходів при оцінці каскаду згортання є РТТ. Є дослідження, які показують, що зниження рівня ПТТ підтримує статус гіперкоагуляції як при нормальній вагітності, так і при ГРМ [11]. Було встановлено, що кількість ПТТ та тромбоцитів була значно нижчою у 3 триместрі нормальної вагітності [12]. Однак інша група повідомила, що обидва параметри не змінились у жінок із ГДМ [13]. Згідно з нашими висновками, РТТ був нижчим у 1-й групі, ніж у 2-й. Ми вважаємо, що ці дані підтримують стан гіперкоагуляції в GDM. Більше того, не спостерігалось компенсаторного збільшення фібринолітичної активності у жінок першої групи з алелем 1298С MTHFR ген.

Ми виявили, що середня вага при народженні немовлят, народжених від матерів GDM з поліморфним геном MTHFR, була меншою, ніж у новонароджених жінок 2-ї групи. Можна припустити певний ступінь дисфункції плаценти внаслідок порушень згортання крові у жінок першої групи.

У цьому дослідженні ми розглянули зв'язок між MTHFR генний поліморфізм у жінок із ГРМ та церебральна ішемія їх новонароджених. Наші результати показали збільшення частоти ДІ та 1298С MTHFR генотип алелей серед жінок із ГДМ. Материнська MTHFR генна мутація має значний вплив на потомство. Повідомлялося, що мутація гомозиготності в MTHFR ген асоціювався з підвищеною частотою затримки росту плода та травм головного мозку новонароджених [14].

Існує гіпотеза, що травми головного мозку новонароджених є вторинними щодо взаємодії епігенетичних подразників та геному [15]. Епігенетичне програмування активне під час вагітності, і епігенетичні процеси реагують на подразники навколишнього середовища, починаючи від обмеження харчування матері до гіпоксії та гіперглікемії [16].

Отже, генетична схильність (поліморфний алель 1298С MTHFR ген) може представляти потенційний фактор ризику церебральної ішемії у новонароджених немовлят, народжених від матерів із гестаційним цукровим діабетом.

Таблиця 1. Клініко-демографічні характеристики досліджуваної сукупності.

* Статистичне значення стор Таблиця 2. Параметри ТЕГ та каскаду згортання крові у жінок досліджуваних груп.