Меліоративна ефективність житла єгипетської піраміди на односторонніх нефректомізованих щурах Том 12 - Випуск 5

Sohair R Fahmy *, Khadiga Gaafar, Dawlat A Sayed і Huda Nageeb

  • Кафедра зоології, факультет наук, Єгипет, 2 Лабораторний центр досліджень тварин, Китай
  • 3 Відділ ультрасонографії, Китай -> 4 Координатор хірургії травлення Загальної лікарні Форталези, Бразилія -> 5 Інститут медицини праці та промислової гігієни, Тайвань
  • 6 Департамент внутрішньої медицини та серцево-судинного центру, Тайвань
  • 7 Випускник Інституту клінічної медицини Медичного коледжу, Тайвань
  • 8 Медичний факультет, Тайвань -> 9 Кафедра хірургічних наук та інтегрованої діагностики, Італія ->

Отримано: 12 грудня 2018 р .; Опубліковано: 03 січня 2019 р

*Відповідний автор: Sohair R Fahmy, кафедра зоології, факультет наук, Єгипет

--> Реферат -> PDF

Анотація

Передумови: Хронічна хвороба нирок (ХХН) є світовою загрозою для здоров’я. Піраміди Єгипту - одне з найдивовижніших досягнень у світі. Таким чином, дане дослідження має на меті дослідити покращаючу ефективність утримання односторонніх нефректомізованих (UNx) щурів у моделі великої єгипетської піраміди.

Результати: Розміщення щурів UNx на 24 та 48 годин у моделі єгипетської піраміди спричинило значне збільшення ваги правої нирки, рівня натрію та кальцію в сироватці крові та виведення іонів калію із сечею. Кліренс креатиніну значно зріс після утримання щурів UNx всередині моделі єгипетської піраміди через 48 годин. Однак утримання щурів всередині єгипетських пірамід протягом 24 та 48 годин покращує маркери функції нирок (протеїнурія, сечовина та сечова кислота) та відновлює їх рівень до контрольних значень. Крім того, рівень гормонів реїну, ангіотензину та альдостерону значно підвищився після утримання щурів UNx всередині єгипетської піраміди протягом 24 та 48 годин.

Висновок: Це дослідження показало, що поселення нефректомізованих щурів всередині моделі єгипетської піраміди може бути потенційною новою стратегією запобігання ХХН після резекції пухлини нирки. Крім того, поточне дослідження припустило, що середовище піраміди відіграє важливу роль у пом'якшенні серйозних наслідків нефректомії шляхом посилення функції нирок.

Ключові слова: Моделі єгипетських пірамід; Односторонні нефректомізовані щури; Функції нирок; Система ренін-ангіотензин-альдостерон; Щури

Скорочення: ATRT: атипова тератоїдна рабдоїдна пухлина; ЦНС: Центральна нервова система; КТ: комп’ютерна томографія; МРТ: магнітно-резонансна томографія; AT/RT: атипова тератоїдна/рабдоїдна пухлина: реанімація: відділення інтенсивної терапії; DI: Діабет Insipidus; LMD: лептоменінгеальне розповсюдження; EMA: епітеліальний мембранний антиген; GFAP: гліальний фібрилярний кислотний білок; TSG: Ген-супресор пухлини

Вступ

Нефректомія (Nx) - це нове втручання, яке вперше було введено для лікування нирково-клітинного раку в 1969 р. [1]. Незважаючи на те, що хірургічна резекція залишається стандартом лікування ниркової карциноми, Nx також є визнаним фактором ризику розвитку хронічної хвороби нирок (ХБН) [2,3]. Дійсно, нефректомія є широко використовуваною моделлю для вивчення механізмів, що призводять до пошкодження нирок при ХХН [4]. Внутрішньониркова судинна система є найбільш ураженою структурою, що перешкоджає відповідному кровотоку, сприяючи склерозу клубочків [5]. ХХН, безумовно, призведе до прогресування хронічної ниркової недостатності (ХНН) через поступовий склероз ниркової тканини. Крім того, нефрони поступово втрачаються при нирковій недостатності. Залишилися нефрони гіпертрофуються, щоб компенсувати втрату функції нирок, а гіперфільтрація в цих рештках нефронів призводить до подальшої втрати нефрону [6].

Матеріали і методи

Експериментальні тварини

Здорові самці щурів-альбіносів Wistar (Rattus norvegicus), вагою 180-200г. Тварин було отримано з Національного дослідницького центру (NRC), Єгипет. Щурів утримували протягом тижня до початку експерименту з акліматизації. Тварин групували та розміщували в клітинах з поліпропілену (по п’ять тварин на клітку) в кондиціонованому приміщенні при температурі 25 ± 1 oC та у природних денних та нічних циклах. Тварин годували стандартними гранулами чау та питною водою.

Етична міркування

Експериментальний протокол був схвалений Інституційним комітетом з догляду та використання тварин (IACUC) (CUFS/S/PHY/15/14) Наукового факультету Каїрського університету, Єгипет.

Дизайн піраміди та розміри

Дерев'яна модель піраміди (рис. 1) висотою 30 дюймів, основою 45 дюймів та бортами 41,5 була виготовлена ​​на місці та використана в даний час [12].

Фігура 1: Дизайн єгипетської піраміди моделі.

ефективність

Одностороння неферектомія

Одностороння неферектомія проводилась згідно з Fahmy et al. [12]. Коротко кажучи, лапаратомію проводили в антисептичних умовах після знеболення щурів пентобарбіталом натрію (50 мг/кг маси тіла; в/в). Ліву нирку видалили після невеликого поздовжнього розрізу живота, який потім закрили за допомогою шовкової нитки 4-0 (група UNx). У підставних оперованих тварин ліву нирку оголювали та обережно маніпулювали, але залишали цілою (фіктивна група). Усі тварини отримували нормальний фізіологічний розчин однакового об'єму у відповідні моменти часу. Всі щури отримували 50 мкл 0,2% ропівакаїну підшкірно для післяопераційного знеболення.

Експериментальний дизайн

Чотири сотні щурів-самців Wistar були розподілені порівну на три основні групи (по 14 щурів на кожну). Підроблений контроль (підроблена група) та односторонні нефректомізовані щури (група UNx). Обидві групи утримувались у своїх домашніх клітках протягом 24 годин та 48 годин. Третя група (група, в якій розміщувались піраміди), в якій щури UNx утримувались у дерев’яній піраміді (6 годин/день) протягом 24 годин та 48 годин [13].

Збір і підготовка сечі

В кінці кожного експериментального періоду щурів переводили в окремі метаболічні клітини протягом 24 годин і збирали сечу. У цей час щури мали вільний доступ до води. Зібрані зразки сечі звільняли від фекальних забруднень і вимірювали об’єм сечі за допомогою вимірювального циліндра. Зразки сечі центрифугували протягом 10 хвилин, а супернатант сечі зберігали при -70 ° C до аналізу.

Поводження з тваринами

Тварин евтаназували під глибокою анестезією пентобарбіталом натрію. Кров збирали в пробірки для центрифуг, потім центрифугували при 3000 об/хв протягом 20 хвилин. Сироватка зберігається при -20 oC до використання для біохімічних та гормональних аналізів. Праву нирку видалили і негайно промокли за допомогою фільтрувального паперу для видалення слідів крові і зважили, а потім суспендували у 10% -ному формальному розчині для фіксації, що проводиться підготовчою до гістологічної обробки.

Визначення електролітів у зразках сечі та сироватки

Відповідні набори (Bio-Diagnostic, Dokki, Гіза, Єгипет) використовували для визначення іонів натрію, калію та кальцію колориметричним методом за методикою, описаною Trinder [14]; Сандерман та Сандерман [15] та Гінделар та король [16] відповідно

Визначення функції нирок у зразках сечі та сироватки крові

Сечовину визначали методом уреази-бертело з використанням біодіагностичних наборів, згідно з методикою, описаною Фосеттом і Сокттом [17]. Загальний білок визначали колориметричним методом з використанням біодіагностичних наборів, згідно з методом, описаним Gornal et al. [18]. Сечову кислоту визначали ферментативним колориметричним методом з використанням біодіагностичних наборів, згідно з методикою, описаною Barham and Trinder [19]. Креатинін визначали колориметричним методом (Кінцева точка) з використанням біодіагностичних наборів, згідно з методом, описаним Schirmeister et al. [20]. Кліренс креатиніну визначали згідно з таким рівнянням:

Гормональні аналізи

Рівні реніну, ангіотензину та альдостерону в плазмі крові визначали за допомогою наборів ELISA для мишей/щурів (Cat # SL0617Ra, SL0061Ra та SL0040Ra, відповідно, Sunlong Biotech Co. LTD).

Статистичний аналіз

Статистично дані цього дослідження були проаналізовані згідно з аналізом Шапіро-Вілка та Колмогорова. Усі статистичні аналізи, зроблені на основі параметричного аналізу, як вихідні дані, як правило, розподілялись. Значення виражали як середнє значення ± SEM. Для оцінки відмінностей між досліджуваними групами був використаний односторонній Аналіз дисперсії (ANOVA) із простим t-тестом для порівняння середніх значень групи та P Перейти до

  • Анотація
  • Вступ
  • Матеріали і методи
  • Результати
  • Обговорення
  • Висновок
  • Список літератури

Вплив єгипетської піраміди на вагу правої нирки у односторонніх нефректомізованих щурів (UNx)

Уміщення щурів UNx або в домашніх клітинах, або всередині моделі єгипетської піраміди спричинило значне збільшення (Р

Примітка: Значення - це середні значення ± SEM (n = 7 на групу) a: Значущі при (P

Примітка: Значення є середніми ± SEM (n = 7 на групу). a: Значущий при (P

Примітка: Значення є середніми ± SEM (n = 7 на групу). a: Значущий при (P

Малюнок 3:Вплив житла єгипетської піраміди на рівень білка в сироватці крові (г/дл) та на однобічних нефректомізованих щурах (UNx). Значення є середніми ± SEM (n = 7 на групу). a: Значущий при (P

Малюнок 4: Вплив житла єгипетської піраміди на рівень сечовини в сечі (г/дл) та у однобічних нефректомізованих щурів (UNx). Значення є середніми ± SEM (n = 7 на групу). a: Значущий при (P

Малюнок 5: Вплив єгипетської піраміди на рівень сечовини в сироватці (г/дл) та на односторонніх нефректомізованих щурах (UNx). Значення є середніми ± SEM (n = 7 на групу). a: Значущий при (P

Малюнок 6: Вплив єгипетської піраміди на рівень сечової кислоти в сечі (мг/дл) у однобічних нефректомізованих щурів (UNx). Значення є середніми ± SEM (n = 7 на групу). a: Значущий при (P

Малюнок 7: Вплив житла єгипетської піраміди на рівень сечової кислоти в сироватці крові (мг/дл) та на однобічних нефректомізованих щурах (UNx). Значення є середніми ± SEM (n = 7 на групу). a: Значущий при (P

Вплив житла єгипетської піраміди на рейнін, ангіотензин та альдостерон у однобічних нефректомізованих щурів (UNx)

Малюнок 8: Вплив житла єгипетської піраміди на рівень реніну (ммоль/л) та на однобічних нефректомізованих щурів (UNx). Значення є середніми ± SEM (n = 7 на групу). a: Значущий при (P

Дані, проілюстровані на малюнках 8-10, продемонстрували значне зменшення (P

Малюнок 10: Вплив житла єгипетської піраміди на рівень альдостерону (ммоль/л) та на однобічних нефректомізованих щурів (UNx). Значення є середніми ± SEM (n = 7 на групу). a: Значущий при (P

Гістологічні висновки

Рисунок 11 ілюструє гістологічні зміни в нирках щурів UNx після розміщення всередині єгипетської моделі піраміди. Фігури 11A та 11B представляють мікроскопічне дослідження нирок у фіктивних групах, що показують нормальні ниркові канальці та ниркові клубочки. Розширені клубочки з фокальною зоною вакуолізованих ниркових канальців (стрілки) спостерігали у щурів UNx, що розміщувались у їх клітках протягом 24 та 48 годин (рис. 11C і 11D). Розміщення щурів UNx на 24 та 48 год всередині пірамідної моделі продемонструвало здорову ниркову тканину (Фігура 11E & 11F).

Малюнок 11: Легкі мікрофотографії репрезентативних зрізів нирок (плями гематоксиліну та еозину, x 400) від підставних щурів (A, B), односторонніх нефректомізованих (UNx) щурів, розміщених у домашніх клітках протягом 24 та 48 год відповідно (C&D) та щурів UNx, розміщених під середовище моделі піраміди протягом 24 та 48 год відповідно (E&F). G: клубочок, BC: капсула Боумена, T: канальці.

Обговорення

Форма піраміди розглядається як надприродне джерело енергії Всесвіту. Енергетична сила всередині пірамід - це спосіб відновлення електромагнітних полів (ЕМП), які були необхідними для зв'язку живих клітин [21]. Зараз піраміди використовуються дуже ефективно для збалансування центрів енергії в організмі людини, лікувального та антистресового ефектів [22,23]. Наскільки нам відомо, ефективність побудови моделі єгипетської піраміди у запобіганні нирковій недостатності після хірургічної резекції ниркової карциноми до цього часу не вивчалась. Таким чином, це дослідження постулювало, що утримання нефректомізованих щурів на ранніх стадіях (24 і 48 годин) всередині моделі єгипетської піраміди може запобігати нирковій недостатності, супутній однобічній нефректомії (UNx).

Одним з найбільш відомих механізмів ниркової недостатності після нефректомії є гіперфільтрація в решті нефронів, яка, як вважають, індукує вогнищевий та сегментарний гломерулосклероз, додатково пошкоджуючи решту нефронів [24,25]. Тим самим решта нирок збільшується в розмірі у відповідь на гіперфільтрацію і починає компенсувати втрачений партнер [26,27]. Втрата ниркової маси або UNx пов'язана з функціональними та морфологічними адаптаціями в решті тканини. Найбільш помітною реакцією після UNx є збільшення розміру та ваги решти нирок. Спільно з попередньою пропозицією, це дослідження підтвердило знахідки Gava et al. [28] та Mjøen та ін. [29], який зафіксував значне збільшення ваги правої нирки після UNx у щурів. Більше того, Abdellatif та ін. [30] повідомляв, що UNx може бути пов'язаний із збільшенням та гіпертрофією решти нирок.

Однак компенсаторний ріст нирок відбувся у щурів UNx, або розміщених у їх домашніх клітках, або всередині пірамід. Щоб визначити, компенсуючий ріст нирок у щурів UNx супроводжувався нирковою недостатністю чи ні, це дослідження продовжувало досліджувати функцію нирок. Рівні сечовини та креатиніну в сироватці часто вважаються надійними маркерами для вимірювання функції нирок [31]. За погодженням зі звітом Барачо та співавт. [32] та Bai et al. [33] у цьому дослідженні зафіксовано помітне зниження рівня сечовини, сечової кислоти та креатиніну в сечі щурів UNx, розміщених у їхніх домашніх клітках, одночасно із помітним підвищенням їх рівня в сироватці крові. Порушення рівня сечовини та креатиніну в сечі та сироватці після нефректомії може свідчити про руйнівну здатність нирок фільтрувати ці відходи з крові та виводити їх із сечею [34,28]. Розміщення щурів UNx у пірамідній моделі протягом 24 та 48 год індукувало посилення функції нирок, як свідчить поліпшення рівнів досліджуваних параметрів.

Концентрація Na + та K + електролітів у позаклітинній рідині підтримується нирками [47]. Це дослідження підтвердило доповіді Gava et al. [28]; Калунга та ін. [48], який зафіксував значне зростання швидкості виведення натрію у щурів UNx супутньо із збільшенням сироватки. Це збільшення можна пояснити зниженням дробової реабсорбції натрію в проксимальних канальцях [49]. Висока швидкість виведення натрію, калію та кальцію з сечею може бути зумовлена ​​підвищеним фільтраційним навантаженням на залишкові клубочки, що може призвести до збільшення виведення іонів із плазми та зменшення накопичення йонів у плазмі [50]. Розміщення щурів Nx всередині єгипетських пірамід не впливало на рівень електролітів у сечі та сироватці, що може припустити, що житло всередині пірамідної моделі покращує роботу нирок за допомогою певного механізму, іншого ніж гомеостаз електролітів.

Висновок

Це дослідження показало, що поселення нефректомізованих щурів всередині моделі єгипетської піраміди може бути потенційною новою стратегією запобігання ХХН після резекції пухлини нирки. Крім того, поточне дослідження припустило, що середовище піраміди відіграє важливу роль у пом'якшенні серйозних наслідків нефректомії шляхом посилення функції нирок. Однак необхідні подальші дослідження для з'ясування механізму, за допомогою якого середовище піраміди перевертало дії нефректомії у щурів.