Вплив колонізації, люмінесценції та автоіндуктора на транскрипцію господаря під час розвитку асоціації кальмар-вібріон

Відредаговано Ненсі А. Моран, Університет Арізони, Тусон, Арізона, та затверджено 8 травня 2008 року

ефекти

Особливості раннього розвитку хазяїна у симбіозі кальмарів-вібріонів. Тканини світло-органу зазнають низку подій розвитку, спричинених симбіонтами (див. Текст для деталей), які тут візуалізуються за допомогою скануючої електронної мікроскопії (верхня частина) та конфокальної мікроскопії (нижня частина). Після агрегації у слизі господаря, через 4 год, мічені GFP клітини V. fischeri (зелені) потрапляють у тканини хазяїна (червоні). Через 12 год симбіонти викликають втрату поверхневого миготливого епітелію, що полегшує колонізацію - процес, який завершується до 96 годин. До 18 год, час, коли були охарактеризовані відповіді транскрипції господаря, бактерії заповнюють крипти, вистелені епітелієм (червоні), і вони сильно світяться. До 48 год симбіонти індукують набряк клітин крипти - фенотип, який не спостерігається при колонізації мутантами luxA та luxI, і який корелює з їх нездатністю зберігатися.

Транскрипційні профілі легких органів, що піддаються різним умовам колонізації. Молоді кальмари або залишали неінокульованими (апо), або інокулювали штамами V. fischeri дикого типу, luxA або luxI, за наявності або відсутності доданого ШІ. Відносна подібність закономірностей експресії генів за різних умов була відображена за допомогою кореляції змін середнього зв’язку. Числа у вузлах представляють відсоток впевненості від аналізу завантаження (n = 1000). Також вказані відносні рівні люмінесценції, що утворюються в світлих органах за кожної умови.

Локалізація EsLBP у неповнолітніх криптах легких органів за допомогою конфокальної імуноцитохімії (ICC) (36). (A) У апосимбіотичних тварин, мічені FITC вторинні антитіла локалізували EsLBP (зелений) на апікальних поверхнях епітелію крипти. (B) У симбіотичних тварин епітелій залишався міченим; однак велика кількість маркування також з'явилася в просторах склепів. Фарбування не було результатом клітин V. fischeri, які безпосередньо зв'язували антитіло EsLBP. (Вставка) Коли ці бактерії (≈1 мкм), забарвлені йодидом пропідію (червоний; зліва від вставки), обробляли антитілом EsLBP, зв'язування не було (праворуч). (C) Преімунний контроль як апосимбіотичних, так і симбіотичних крипт не показав неспецифічного фарбування. На всіх зображеннях протизабарвлення тканин тварин включало TOTO3 (синій), який позначає нуклеїнові кислоти; і родамін фаллоїдин (червоний), який позначає ниткоподібний актин. Нумерація вказує на дві найбільші з трьох склепів на кожному зображенні; “Є” означає чорнильний мішечок. Детальніше див. У тексті SI.