ЗРАЗОК ЗВІТУ ЛАБОРАТОРІЇ

4.1. Як розвести білковий запасний розчин?

Бичачий сироватковий альбумін (BSA) - це єдиний поліпептидний ланцюг, що складається приблизно з 583 амінокислотних залишків і не містить вуглеводів. При рН 5-7 він містить 17 внутрішньоланцюгових дисульфідних мостів і 1 сульфгідрильну групу. Теоретична відносна молекулярна маса BSA з амінокислотної послідовності становить 66 399. Альбумін є одним із найбільш широко використовуваних білків у біологічних дослідженнях сьогодні. Він діє як потужний антиоксидант у культурі клітин.

Для того, щоб виміряти та побудувати стандартну криву концентрації білка проти поглинання при 595 нм, слід підготувати серію розведень стандартного базового розчину білка BSA. Запасні розчини використовуються для економії часу на підготовку, економії матеріалів, зменшення місця для зберігання та підвищення точності, з якою готуються робочі розчини з нижчою концентрацією. Найпростіший спосіб вирішити для обсягу запасу білкового розчину, необхідного для кожного розведення, - використовувати формулу C1V1 = C2V2.

Проблема: Побудуйте калібрувальну криву, побудувавши графік середнього поглинання для кожної стандартної концентрації щодо цільової концентрації білка. Концентрація вихідного розчину (С1) становить 100 мг/л, а об’єм розведеного зразка встановлений на рівні 2 мл (V2). Білкові стандарти слід готувати в тому самому буфері, що і зразки для аналізу. Зручну стандартну криву можна зробити, використовуючи бичачий сироватковий альбумін з концентрацією 0, 10, 20, 30, 40, 50 мг/л.

Посилаючись на цю сторінку:

Генераліч, Ені. "Довідка SolCalc: Розведення білкового розчину." EniG. Періодична система елементів. KTF-Спліт, 30 серпня 2017. Веб. . .